ההפרדה Electrophoretic של חלבונים

Biology

Your institution must subscribe to JoVE's Biology section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

בסרטון הזה, אנחנו מראים שיטה electrophoretic הפרדה של חלבונים באמצעות מרובה acrylimide ג'ל אלקטרופורזה (עמוד).

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Chakavarti, B., Chakavarti, D. Electrophoretic Separation of Proteins. J. Vis. Exp. (16), e758, doi:10.3791/758 (2008).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

אלקטרופורזה משמש כדי להפריד תערובות מורכבות של חלבונים (למשל, מתאי, שברים subcellular, שברים עמודה, או immunoprecipitates), לחקור את יצירות למקטע, וכדי לאמת את ההומוגניות של דגימות חלבון. זה גם יכול לשמש כדי לטהר חלבונים לשימוש ביישומים נוספים. בשנת ג'ל אלקטרופורזה polyacrylamide, חלבונים להעביר בתגובה שדה חשמלי דרך הנקבוביות במטריצה ​​ג'ל polyacrylamide, גודל הנקבוביות יורדת עם הגדלת ריכוז acrylamide. השילוב של גודל הנקבוביות ולחייב חלבון, גודל, צורה קובע את קצב ההגירה של החלבון. ביחידה זו, השיטה תקן Laemmli מתואר על ג'ל אלקטרופורזה רציפה בתנאים denaturing, כלומר בנוכחות של נתרן גופרתי dodecyl (SDS).

Protocol

פרוטוקול טקסט מלא לגישה זו ניסיוני זמין הפרוטוקולים נוכחי בביולוגיה מולקולרית .

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Comments

10 Comments

  1. Hi nice demo but I did not understand why the presenters kept on showing an agarose gel electrophoresed DNA gel in between as a representation instead of a protein gel.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 15, 2008 - 1:11 PM
  2. SYPROorange and SYPROruby staining - two fluorescent-based protein detection methods - can appear like ethidium bromide stained DNA gels.  So those gels you are speaking of may actually be protein gels. 

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 16, 2008 - 9:34 AM
  3. Yeah possible,  but then why do we see only a single band.I guess SYPRO detection methods would detect the entire protein panel and not specific bands. unless otherwise they are detecting some specific enzyme activity using flourescent detection methods.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 16, 2008 - 9:52 AM
  4. We loaded BSA.

    Thanks.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 17, 2008 - 2:12 AM
  5. Please not that we showed polyacrylamide gel electrophoresis and not agarose gel electrophoresis.

    Thanks.

    Bulbul Chakravarti

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 17, 2008 - 2:08 AM
  6. why cannot i see the video...? pls help me..

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 10, 2008 - 3:35 AM
  7. i can see it now..thanks...

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 10, 2008 - 4:50 AM
  8. my network is poor, I can not enjoy the video

    Reply
    Posted by: Huang C.
    March 15, 2009 - 6:30 AM
  9. Hello, Please shoot me an email at nikitab@jove.com and we'll figure something out for you. Cheers, Nikita

    Reply
    Posted by: Anonymous
    March 22, 2009 - 10:26 PM
  10. Hi, thanks what can I download your video ? please help me

    Reply
    Posted by: violet s.
    January 14, 2012 - 10:35 AM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Usage Statistics