Окрашивание белков в гелях

Published 7/08/2008
8 Comments
  CITE THIS  SHARE 
Biology
 

Summary

После отделения от электрофоретического методов, белки в геле можно обнаружить с помощью нескольких методов окрашивания. Окрашивание белков Кумасси синий, серебряный Окрашивание, SYPRO Orange, SYPRO Рубин продемонстрированы в этом видео.

Cite this Article

Copy Citation

Gallagher, S., Chakavarti, D. Staining Proteins in Gels. J. Vis. Exp. (17), e760, doi:10.3791/760 (2008).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

После отделения от электрофоретического методов, белки в геле можно обнаружить с помощью нескольких методов окрашивания. Это устройство описывает протоколы для выявления белков четырех популярных методов. Кумасси синего окрашивания является простым и быстрым способом. Серебряный окрашивания, в то время как больше времени, значительно более чувствительны и могут таким образом быть использованы для обнаружения меньшее количество белка. Флуоресцентные окрашивание популярной альтернативой традиционной процедуры окрашивания, главным образом, потому что она более чувствительна, чем окрашивание Кумасси, и часто в качестве чувствительных, как серебро окрашивания. Окрашивание белков с SYPRO Оранжевый и SYPRO Рубин также продемонстрировали здесь.

Protocol

Полный текст протокола для этого экспериментальный подход доступен в текущих протоколов в области молекулярной биологии .

Comments

8 Comments

  1. WHICH REACTION EQUATION OF CONVERT Cu+² TO Cu+1 in the protein test

    Reply
    Posted by: Anonymous
    August 3, 2008 - 7:45 AM
  2. thank you!very good!

    Reply
    Posted by: Anonymous
    September 6, 2008 - 8:51 PM
  3. It is very good, thanks

    Reply
    Posted by: Anonymous
    November 12, 2008 - 6:43 AM
  4. A good and cheap alternative to SYPRO Rubi is RuBPS staining. Here are some protocols. More information can be found on www.ruthenium.ag.vu   RuBPS staining protocol I (quality) 1. Fix the gel in 30% EtOH, 10% acetic acid overnight ². Rinse the gel in ²0% EtOH for 30 min and repeat 3 times 3. Incubate the gel in 1 mM RuBPS solution for 6 h 4. Equilibrate the gel in water for 10 min and repeat once 5. Destain the gel with 40% EtOH/10% acetic acid for 15 h 6. Equilibrate the gel in water for 10 min repeat once and scan   all% are in V/V   Procedure as published in Proteomics ²004, 4, 599–608.     RuBPS staining protocol II (fast)   1. Incubate the gel in 50 ml of 40% Ethanol/10% acetic acid containing    1 mM RuBPS for 1 h. ². Destain the gel for ²0 min in 40% Ethanol/10% acetic acid 3. Wash the gel for 10 min in water and scan   all% are in V/V   Procedure as published in PLoSONE. ²007 Feb ²8;²(²)e²63.       RuBPS staining protocol III (co-electrophoretical)   1. Add 1 ml of ²0 mM stock solution to one pocket of your SDS gel. Run     the gel according to your standard procedure. ². Incubate the gel in 50 ml of 40% Ethanol/10% acetic acid for ²0 min 3. Incubate the gel in 50 ml water for 10 min and scan       RuBPS staining protocol IV (loading buffer)   1. Add 1 ml of ²0 mM stock solution to your loading buffer (omit all other     dyes like bromophenol blue). Run the gel according to your standard     procedure. ². Incubate the gel in 50 ml of 40% Ethanol/10% acetic acid for ²0 min 3. Incubate the gel in 50 ml water for 10 min and scan  

    Reply
    Posted by: Anonymous
    February 16, 2009 - 1:20 PM
  5. Itz realy ² gud!

    Reply
    Posted by: sathya r.
    May 18, 2009 - 11:01 AM
  6. Thank yoy

    Reply
    Posted by: JASSIM A.
    May 20, 2009 - 9:39 AM
  7. thank you

    Reply
    Posted by: ibrahim b.
    August 27, 2010 - 12:31 AM
  8. thanks! This is very useful for my job!

    Reply
    Posted by: Anonymous
    August 31, 2010 - 4:33 AM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Video Stats