साक्षात्कार: एचआईवी-1 Proviral डीएनए एक विकसित Recombinase का उपयोग छांटना

Biology

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Summary

वर्तमान एचआईवी 1-रणनीतियों वायरल जीवन चक्र को दबाने लेकिन संक्रमण प्रभावी ढंग से नहीं उन्मूलन के लिए काम करते हैं. यहाँ, हम दिखाना है कि एक इंजीनियर recombinase कुशलतापूर्वक उत्पाद एकीकृत कर सकते हैं संक्रमित कोशिकाओं के जीनोम से एचआईवी -1 proviral डीएनए.

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Hauber, J. Interview: HIV-1 Proviral DNA Excision Using an Evolved Recombinase. J. Vis. Exp. (16), e793, doi:10.3791/793 (2008).

Please note that all translations are automatically generated.

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Abstract

एचआईवी -1 संक्रमित कोशिकाओं के गुणसूत्र मेजबान में एकीकृत है और एक लंबे टर्मिनल को दोहराता द्वारा flanked provirus के रूप में बनी रहती है. वर्तमान उपचार रणनीति मुख्य रूप से संक्रमण के उन्मूलन के बिना वायरस एंजाइमों या वायरस सेल संलयन, दबा वायरल जीवन चक्र का लक्ष्य. चूंकि एकीकृत provirus इन दृष्टिकोण, एचआईवी -1 के नए प्रतिरोधी उपभेदों द्वारा लक्षित नहीं है उभर सकता है. यहाँ, हम रिपोर्ट है कि इंजीनियर recombinase Tre (Tre recombinase, Buchholz, एफ, मैक्स प्लैंक इंस्टीट्यूट सेल बायोलॉजी और आनुवंशिकी के लिए, ड्रेस्डन के आण्विक विकास देखें) कुशलता से संक्रमित कोशिकाओं के जीनोम से एकीकृत एचआईवी -1 proviral डीएनए excises. हम वायरल pseudotypes और संक्रमित HELA कोशिकाओं से युक्त करने के लिए जांच loxLTR उत्पादन Tre recombinase एचआईवी -1 संक्रमित मानव कोशिकाओं के जीनोम से provirus आबकारी कर सकते हैं कि क्या. एक वायरस सेल कण रिहा लाइन क्लोन किया गया था और एक प्लाज्मिड व्यक्त Tre के साथ या एक माता पिता का नियंत्रण सदिश के साथ ट्रांसफ़ेक्ट. Recombinase गतिविधि और वायरस उत्पादन की निगरानी की गई. सभी assays दिखाई साइटोटोक्सिक प्रभाव के बिना संक्रमित कोशिकाओं से provirus के कुशल विलोपन प्रदर्शन किया. इन परिणामों के सिद्धांत का सबूत के रूप में सेवा है कि यह संभव है के लिए एक recombinase विकसित करने के लिए विशेष रूप से एक एचआईवी 1 लीटर के लक्ष्य और इस recombinase एचआईवी -1 संक्रमित मानव कोशिकाओं के जीनोम से एचआईवी -1 provirus excising के लिए सक्षम है कि.

इससे पहले एक इंजीनियर recombinase चिकित्सकीय क्षेत्र में प्रवेश कर सकता है, तथापि, महत्वपूर्ण बाधाओं को दूर करने की आवश्यकता है. सबसे महत्वपूर्ण मुद्दों के अलावा, कि हम चेहरा, लक्षित कोशिकाओं को एक कुशल और सुरक्षित प्रसव और दुष्प्रभावों के अभाव हैं.

Protocol

कृपया देखने के संबंधित वीडियो हकदार साइट विशिष्ट पुनर्संयोजन और इंजीनियरिंग recombinase एंजाइमों की साइट विशिष्टता के बारे में अधिक जानकारी के लिए साइट - विशिष्ट Recombinase प्रौद्योगिकी (SSR ) और Tre Recombinase के आण्विक विकास के सिद्धांतों .

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Comments

10 Comments

  1. Please this must be in clinical trials asap..  

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 24, 2008 - 7:26 PM
  2. Moving faster with recombinase. To tell the truth i don' t trust completely in the results of the research, any kind of research, humans trial included. Kp-1461 has been halted almost at the end of phase ² humans trial.. and now seems that kp-1461 can not work in vitro too.. The koronispharma managers have to pay for this.. A LOT OF MONEY.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 25, 2008 - 8:56 AM
  3. how can I download a video protocol in my flash disc?  

    Reply
    Posted by: Anonymous
    September 20, 2008 - 4:36 PM
  4. Dear Anonymous, please feel free to contact us at support@jove.com and we could discuss your problem.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 6, 2008 - 6:34 PM
  5. How can I get in touch with doctor Joachim Hauber? I am HIV positive, there isn´t a single day ever since I was diagnosed this disease that I don´t feel like my life just ended. I would do anything to get cured.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 20, 2008 - 1:37 PM
  6. Reply
    Posted by: Anonymous
    November 3, 2008 - 8:41 AM
  7. Interesting presentation on remarkable research. Worthy of further discussion

    Reply
    Posted by: Anonymous
    February 23, 2009 - 1:48 PM
  8. Have you sequenced the host cell genome in the wild type control vs. the HIV-1 infected vs Tre recombinase cells to
    definitively show where the HIV-1 genome is inserting, and that it is removed?

    Reply
    Posted by: Douglas C.
    October 21, 2009 - 9:41 AM
  9. why can't i get an update on this work?? i have looked everywhere. it has gotten so little publicity..i dont get it

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 25, 2010 - 1:04 AM
  10. hi
    i need full text this article
    plz
    tanx

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 10, 2010 - 4:23 PM

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