Intervista: HIV-1 DNA provirale escissione Utilizzando un ricombinasi Evolved

Biology

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Summary

Corrente di HIV-1 strategie agire per sopprimere il ciclo di vita virale, ma non in modo efficace sradicare l'infezione. In questo studio dimostriamo che una ricombinasi progettato può DNA in modo efficiente accise integrati di HIV-1 provirale dal genoma delle cellule infette.

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Hauber, J. Interview: HIV-1 Proviral DNA Excision Using an Evolved Recombinase. J. Vis. Exp. (16), e793, doi:10.3791/793 (2008).

Please note that all translations are automatically generated.

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Abstract

HIV-1 integra nel cromosoma ospite delle cellule infettate e persiste come un provirus fiancheggiata da ripetizioni terminali lunghi. Strategie di trattamento corrente principalmente bersaglio enzimi virus o fusione cellulare, sopprimendo il ciclo di vita virale senza sradicare l'infezione. Poiché il provirus integrato non viene bersagliata da questi approcci, nuovi ceppi resistenti di HIV-1 possono emergere. Qui, si segnala che il progettato ricombinasi Tre (vedi evoluzione molecolare della ricombinasi Tre, Buchholz, F., Max Planck per la Biologia Cellulare e Genetica, Dresda) accise in modo efficiente DNA integrato da HIV-1 provirale dal genoma delle cellule infette. Abbiamo prodotto loxLTR contenente pseudotypes virale e le cellule HeLa infettate esaminare se può ricombinasi Tre soggetti ad accisa il provirus dal genoma del virus HIV-1 le cellule umane infettate. Una particella di rilascio della linea cellulare virus è stato clonato e transfettate con un plasmide che esprime Tre o con un vettore di controllo parentale. Ricombinasi attività e la produzione del virus sono stati monitorati. Tutti i test hanno dimostrato la cancellazione efficiente del provirus dalle cellule infette senza visibili effetti citotossici. Questi risultati servono come prova di principio che si può evolvere una ricombinasi per indirizzare specificamente un HIV-1 LTR e che questo ricombinasi è in grado di estirpare il virus HIV-1 provirus dal genoma delle cellule umane da HIV-1-infetti.

Prima di una ricombinasi progettato poteva entrare nel campo terapeutico, tuttavia, significativi ostacoli devono essere superati. Tra le questioni più critiche, che abbiamo di fronte, sono una consegna efficiente e sicuro per le cellule bersaglio e l'assenza di effetti collaterali.

Protocol

Si prega di vedere i video correlati intitolato Principi di Site-Specific ricombinasi (SSR) Tecnologia ed evoluzione molecolare della ricombinasi Tre per ulteriori informazioni sul sito-specifica ricombinazione e di ingegneria il sito-specificità di enzimi ricombinasi.

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Comments

10 Comments

  1. Please this must be in clinical trials asap..  

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 24, 2008 - 7:26 PM
  2. Moving faster with recombinase. To tell the truth i don' t trust completely in the results of the research, any kind of research, humans trial included. Kp-1461 has been halted almost at the end of phase ² humans trial.. and now seems that kp-1461 can not work in vitro too.. The koronispharma managers have to pay for this.. A LOT OF MONEY.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 25, 2008 - 8:56 AM
  3. how can I download a video protocol in my flash disc?  

    Reply
    Posted by: Anonymous
    September 20, 2008 - 4:36 PM
  4. Dear Anonymous, please feel free to contact us at support@jove.com and we could discuss your problem.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 6, 2008 - 6:34 PM
  5. How can I get in touch with doctor Joachim Hauber? I am HIV positive, there isn´t a single day ever since I was diagnosed this disease that I don´t feel like my life just ended. I would do anything to get cured.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 20, 2008 - 1:37 PM
  6. Reply
    Posted by: Anonymous
    November 3, 2008 - 8:41 AM
  7. Interesting presentation on remarkable research. Worthy of further discussion

    Reply
    Posted by: Anonymous
    February 23, 2009 - 1:48 PM
  8. Have you sequenced the host cell genome in the wild type control vs. the HIV-1 infected vs Tre recombinase cells to
    definitively show where the HIV-1 genome is inserting, and that it is removed?

    Reply
    Posted by: Douglas C.
    October 21, 2009 - 9:41 AM
  9. why can't i get an update on this work?? i have looked everywhere. it has gotten so little publicity..i dont get it

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 25, 2010 - 1:04 AM
  10. hi
    i need full text this article
    plz
    tanx

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 10, 2010 - 4:23 PM

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