Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Bioengineering

Aşırı Kullanıma Bağlı Tendinopatinin In Vivo Modeli için Pasif Ayak Bileği Dorsifleksiyon Test Sistemi

Published: March 1, 2024 doi: 10.3791/65803

Summary

Bu protokol, aşırı kullanıma bağlı tendinopatinin in vivo bir modeli için bir sıçan Aşil tendonunda ölçülebilir ve kontrollü yorgunluk yaralanmalarını indüklemek için kullanılan bir test sistemi sunar. Prosedür, sıçanın ayak bileğini, özel olarak yazılmış bir MATLAB komut dosyası ile pasif ayak bileği dorsifleksiyonu gerçekleştiren bir eklem aktüatörüne sabitlemekten oluşur.

Abstract

Tendinopati, ağrı ve fonksiyon kaybı ile sonuçlanan kronik bir tendon rahatsızlığıdır ve tendonun tekrar tekrar aşırı yüklenmesi ve sınırlı iyileşme süresinden kaynaklanır. Bu protokol, sıçan Aşil tendonuna pasif dorsifleksiyon yoluyla mekanik yükleri döngüsel olarak uygulayan bir test sistemini açıklar. Özel olarak yazılmış kod, geri besleme kontrolüne dayalı döngüsel yorulma yükleme rejimi ile birlikte yükleme protokolünün etkilerini değerlendirmek için döngü öncesi ve sonrası yükleme ölçümlerinden oluşur.

Bu çalışma için 25 Sprague-Dawley sıçan kullandık ve grup başına 5 sıçan 500, 1,000, 2,000, 3,600 veya 7,200 döngü yorgunluk yükü aldı. Histerezis, pik gerilme ve yükleme ve boşaltma modüllerinin döngü öncesi ve sonrası yükleme ölçümleri arasındaki yüzde farkları hesaplandı. Sonuçlar, sistemin uygulanan yüklerin sayısına bağlı olarak Aşil tendonunda değişen derecelerde hasara neden olabileceğini göstermektedir. Bu sistem, yorgunluğa bağlı aşırı kullanım tendon yaralanmasının in vivo bir modeli için Aşil tendonuna niceliksel ve fizyolojik değişen derecelerde döngüsel yükler uygulamak için yenilikçi bir yaklaşım sunar.

Introduction

Tendonlar kası kemiğe bağladığından ve yaşamları boyunca günlük tekrarlayan hareketler yaşadığından, ağrılı ve sınırlayıcı olan ve nüfusun %30-50'sini etkileyen mekanik fonksiyonun bozulmasına neden olan aşırı kullanım yaralanmalarına oldukça yatkındırlar1. Tendinopatiler, tekrarlayan yorgunluk hareketleri ve yaralanma öncesi seviyelere yetersiz iyileşme nedeniyle aşırı kullanım yaralanmaları olarak kabul edilen kronik durumlardır. Rotator manşet, dirsek, Aşil tendonu ve patellar tendon 2,3,4,5 dahil olmak üzere hem üst hem de alt ekstremiteler yaygın olarak etkilenir. Aşil tendinopatisi, koşu ve atlamayı içeren aktivitelerde, özellikle atletizm, orta ve uzun mesafe koşuları, tenis ve diğer top sporlarıyla uğraşan sporcularda yaygındır ve koşucuların %7-9'unu etkiler 6,7. Koşma ve zıplamadan kaynaklanan yaralanmalar da Aşil ve patellar tendinopatiler için bir risk faktörü olan sınırlı ayak bileği dorsifleksiyonuna neden olabilir 8,9,10. Bu nedenle, bu çalışmanın aşırı Aşil tendonu yaralanmaları için pasif ayak bileği dorsifleksiyonunun bir sıçan modeli olarak sağlayabileceği tendinopatinin daha iyi değerlendirilmesine ve karakterizasyonuna ihtiyaç vardır.

Küçük hayvan modellerini kullanan önceki çalışmalar, tendinopatinin gelişimini ve belirteçlerini incelemeyi amaçlamıştır. Bunlar arasında koşu bandı egzersizi, tekrarlayan uzanma, doğrudan tendon yüklemesi, kollajenaz enjeksiyonları, cerrahi ve in vitro çalışmalar 11,12,13,14,15,16 yer alır. Literatür, bu tendinopati modellerinin kullanılmasından kaynaklanan hasar belirteçlerinin tanımlanmasından yararlanmış olsa da, sınırlamalar, tendonun doğrudan yüklenmesi durumunda olduğu gibi, fizyolojik olarak ilgili olmayan eklem hareketlerinde tendonun yüklenmesini, koşu bandı çalışmalarında olduğu gibi uygulanan yüklerin doğrudan ölçülmemesini ve kollajenaz enjeksiyonlarında olduğu gibi fizyolojik aşırı kullanımın kullanılmamasını içerir. diğerleri arasında. Bu amaçla, bu çalışma, tendinopati için daha önce geliştirilmiş küçük hayvan modellerindeki boşlukları doldurmak için aşırı kullanıma bağlı tendinopati çalışmaları için uygulama ile Aşil tendonuna noninvaziv olarak niceliksel yükler uygulayan bir sistem geliştirmeyi amaçladı. Sistemin bir dizi yükleme döngüsü boyunca mekanik özelliklerde tekrarlanabilir değişikliklere neden olduğunu göstermek için bir pilot çalışma gerçekleştirdik. Bu sistem, fizyolojik olarak ilgili hareket ve yüklemenin aşırı kullanımı indüklemesini sağlarken, aynı zamanda yükleme rejimi sırasında tendona uygulanan ve tendon tarafından maruz kalınan kuvvetleri ölçer ve ölçer.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Bu çalışma, Beth Israel Deaconess Tıp Merkezi'nde Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (IACUC) onayına göre yapılmıştır. Hayvanlar indüksiyon için %5 ve bakım için %2.5 izofluran kullanılarak uyuşturuldu ve hipotermiyi önlemeye özen gösterildi.

1. Test sisteminin kurulması

  1. Tutarlı dönüş ve tork uygulamak için pasif ayak bileği dönüşünü bir step motor ile kontrol edin. Step motoru bir mikrodenetleyici ile kontrol edin. Dönme derecelerini işaretlemek için 3D konum ve yönlendirme sisteminden gelen girişleri kullanın. Eşik sınırına ulaşılmazsa dorsifleksiyon açısını artırmak için geri bildirim kontrolü sağlamak için tork sensöründen gelen çıkışları kullanın.
  2. Başlamak için mikrodenetleyiciyi, tork sensörünü, 3D elektromanyetik konumlandırmayı ve yönlendirme sistemini bir bilgisayara ve güç kaynağına bağlayın. Şirket içinde geliştirilen bir MATLAB kodunu kullanarak özel olarak oluşturulmuş sistemi kontrol edin (Şekil 1). MATLAB kod dosyalarını GitHub'dan indirin ve GitHub sayfası yönergelerinden (https://github.com/Nazarian-Lab/PassiveAnkleDorsiflexionSystem) kodu çalıştırmayla ilgili belirli yönergeleri izleyin.
  3. MATLAB'ı kod dosyalarıyla açın. 3D elektromanyetik konumlandırma ve yönlendirme sistemini MATLAB programına bağlamak için PDImfc yazılımını açın. Bağlan'a tıklayın | Sürekli P&O | StartSockExport() komutunu kullanın. Uygulamayı arka planda açık tutun.

2. Ex-vivo ve post-mortem

  1. Altı adet 13 haftalık Sprague-Dawley sıçanını CO2 inhalasyonu ve torakotomi yoluyla ikincil bir ötenazi yöntemi ile ötenazi yapın. Sağ Aşil tendonunu kalkaneus ve miyotendinöz bileşke sağlam olacak şekilde inceleyin. Daha sonra mekanik test yapmak için -20°C'de dondurun. Tendon çözüldükten, ince diseke edildikten ve mekanik test için hazırlandıktan sonra, tendonun nihai gerilme mukavemetini (UTS) elde edememek için çekme yüklemesi gerçekleştirin (0,1 N'ye kadar ön yük, 0,1 - 1 N arasında 10 döngü için ön koşullandırma, 0,1 mm/s'lik sabit bir yer değiştirmede arızaya kadar rampa). Adım 3.4'te açıklandığı gibi, sistemin daha sonraki bir adım için ön koşullandırma gerçekleştirmesi için UTS'nin %15'ini girdi olarak kullanın.
  2. Moment kolu ve gerinim ölçümleri için aynı prosedürle beş hayvandan oluşan başka bir gruba ötenazi yapın. Referans olarak bir cetvelin yanında ayak bileği 90° dorsifleksiyonda sol bacağın röntgenini çekin. Görüntüdeki cetveli referans olarak kullanarak X-ışını görüntüsünü Fiji'de açın, MATLAB kodunda bir girdi olarak kullanılmak üzere ayak bileği ekleminin dönme merkezinden ayak bileğinin arkasına kadar tendon moment kolunu ölçün adım 2.1'de açıklanan ön koşullandırma için giriş kuvvetini karşılık gelen tork değerine ve veri analizi için çıkış torku ile kuvvet arasındaki dönüşüme dönüştürün.
  3. Dizinizi tam ekstansiyona yerleştirmek için iki atel bantlayarak sol arka ayağı hareketsiz hale getirin. Ayak bileğini hafifçe dorsiflekse ederek ayak bileğini hafifçe dorsifleks yaparak ayak bileği rotasyonunun çevredeki yumuşak dokuları tutmaktan ziyade izole tendon nedeniyle oluşmasını ve gergin olmasını sağlayın. Gergin değilse veya dizde hareket varsa, ateli tekrar bantlayın.
  4. Aşil tendonunun etrafındaki deriyi çıkararak tendonu açığa çıkarın. Yapıştırıcıyı 1/32 inçlik bir alüminyum boncuk üzerine yerleştirin, Aşil tendonunun miyotendinöz bileşkesine en yakın serbest tendonun üzerine yerleştirin ve fazla yapıştırıcıyı çıkarmak için tuzlu su içeren bir pamuklu çubuk kullanın. Dokunun nemliliğini sağlamak için kalan prosedür boyunca Aşil tendonuna tekrar tekrar salin uygulayın.
  5. Herhangi bir yük uygulamadan önce dijital bir kumpas kullanarak tendonun kesit alanını ölçün. Tendonun bir elips olduğunu varsayalım ve genişliği ve kalınlığı üç kopya halinde ölçün.
  6. Fareyi yüzüstü pozisyonda tüm vücut platformuna yerleştirin. Ayak bileğini, ayak bileğinin etrafına ve ayak parmaklarının etrafına bir fermuar ile eklem aktüatörüne sabitleyin ve diz yarığını iki fermuarla sabitleyin. Aksı, ayak bileği tam plantarfleksiyonda olacak şekilde döndürün.
  7. 3D elektromanyetik konum ve yönlendirme sisteminin sayısallaştırma kalemini bilgisayara bağlayın ve güç kaynağını açın.
  8. Belirtilen döngü sayısı için sistem kodunu (Adım 3'te daha ayrıntılı olarak açıklanmıştır) çalıştırın (bu çalışmada, altı ötenazi sıçan 7.200 döngü aldı).
  9. 0, 500, 1.000, 2.000, 3.600 ve 7.200 döngülerinde ex vivo gerinim ölçümleri, döngüsel yükleme rejimini duraklatın ve kalkaneustan alüminyum boncuka kadar tendonun uzunluğunu 0 ila 40° dorsifleksiyondan 5°'lik artışlarla ölçün (sistemin fiziksel kısıtlamaları nedeniyle çalıştırma sınırı) 3D sayısallaştırma kalemini dönüşümlü olarak üçlü olarak kullanın.
  10. Başlangıç uzunluğunun her döngü sayısı için 0° dorsifleksiyonda olduğu adım 2.9'dan elde edilen uzunlukları kullanarak tendon gerginliğini değişen açılarda hesaplayın. Her döngü numarasında dorsifleksiyon açısı ve gerinim arasındaki ilişkiyi elde etmek için doğrusal bir uyum gerçekleştirin. Ham açı verilerini veri analizi için gerinim haline getirmek için bu ilişkiyi kullanın.
  11. 0° ve 40°'de tendon uzunluğu ölçümleri ve 0°'de ölçülen kesit alanı ile sıkıştırılamazlığı (sabit hacim) varsayarak 40° dorsifleksiyonda dijital bir kumpas kullanarak tendon kesit alanını hesaplayın. Veri analizi için kuvveti gerilime dönüştürmek için her döngü sayısında bu kesit alanını kullanın (gerilim = kuvvet / kesit alanı).

3. Mekanik yükleme protokolü

  1. Çalışmanın bu bölümü için, her biri 500, 1,000, 2,000, 3,600 veya 7,200 döngü yorgunluk yüklemesi almak üzere rastgele tahsis edilen 5 sıçan ile 25 dişi Sprague-Dawley 11 haftalık sıçan kullandık.
    NOT: Ön koşullandırma, ilk kalibrasyon ve ön ve son ölçümün çalıştırılması yaklaşık 15 dakika sürer ve döngüsel yorulma yükleme rejimi döngü başına 1 saniye sürer. Bu nedenle, sıçanın anestezi altında kaldığı en uzun süre, IACUC onaylı protokoller altında gerçekleştirilen yaklaşık 2 saattir.
  2. Mikrodenetleyiciyi, tork sensörünü, 3D elektromanyetik konumlandırmayı ve yönlendirme sistemini bir bilgisayara ve güç kaynağına bağlayın. Şirket içinde geliştirilen MATLAB kodunu kullanarak özel yapım sistemi kontrol edin (Şekil 1).
  3. Bilgisayarı açın ve kod dosyalarıyla MATLAB'ı açın. 3D elektromanyetik konumlandırma ve yönlendirme sistemini MATLAB programına bağlamak için PDImfc yazılımını açın. Bağlan'a tıklayın | Sürekli P&O | StartSockExport() komutunu kullanın. Uygulamayı arka planda açık tutun.
  4. Bir indüksiyon odasında inhalasyon yoluyla% 5 izofluran ile anesteziyi indükleyin. İndüksiyonu takiben, sıcaklığı korumak ve bir burun konisi eki aracılığıyla% 2.5 izofluran ile anesteziyi sürdürmek için su bazlı bir ısıtma elemanı takılı olarak hayvanı tam vücut platformuna sabitleyin. Anestezi sırasında kuruluğu önlemek için gözlere ıslak bir merhem kullanın.
  5. Fareyi yüzüstü pozisyonda tüm vücut platformuna yerleştirin. Ayak bileğini, ayak bileğinin etrafına ve ayak parmaklarının etrafına bir fermuar ile eklem aktüatörüne sabitleyin ve diz yarığını iki fermuarla sabitleyin. Aksı, ayak bileği tam plantarfleksiyonda olacak şekilde döndürün.
    NOT: Fermuarların daralmaya veya lezyonlara neden olmadığından emin olun, sıkmaya özen gösterin ve gerekirse bir koruma tabakası için fermuar ile cilt arasına gazlı bez yerleştirin.
  6. Sistem kodunu çalıştırmayı içeren aşağıdaki adımlar için, belirli yükleme testine karşılık gelen kodun her bölümü için MATLAB'de Çalıştır'ı tıklatın.
  7. Adım 2.1'e göre ölçülen ex vivo çekmeden başarısızlık testlerine kadar Aşil tendonunun nihai gerilme geriliminin değerine bağlı olarak ayak bileğini 50 kat ila %15 arasında çevirin.
  8. Tendonu üç kez 12°'ye kadar dorsiflekse ederek ilk kalibrasyonunu yapın. Eğrinin üstel bölgesini hesaplamak için histerezis eğrisinin yükleme bölgesinin doğrusal bölgesinin eğimini kullanın.
  9. Eğrinin üstel bölgesi, eğrinin yükleme bölgesinin tepe noktasının eğimi hesaplanarak elde edilene kadar (şirket içinde geliştirilen MATLAB kodu kullanılarak hesaplanır) veya 40°'ye döndürülene kadar (hangisi önce gerçekleşirse) ayak bileğini artan açılarda kademeli olarak dorsiflex yapın.
  10. Elde edilen son açıda, ön yükleme taban çizgisi olarak beş döngüsel mekanik ölçüm gerçekleştirin.
  11. Döngüsel yorulma yükleme rejimini belirli sayıda döngü için gerçekleştirin (bu çalışmada, 500, 1.000, 2.000, 3.600 veya 7.200 döngü için).
  12. Her 50 döngüde bir, hala üstel bölgede olduğundan emin olmak için histerezis eğrisinin yükleme kısmının eğimini (şirket içinde geliştirilen MATLAB kodu aracılığıyla hesaplanır) hesaplayın. Bu üstel bölge elde edilene kadar dorsifleksiyon açısını zaten 40° olmadıkça 1° artırın.
  13. Döngüsel yükleme rejimi tamamlandıktan sonra, tendonun mekanik özelliklerini ölçmek için başlangıçta seçilen açıda yükleme sonrası ölçümler olarak beş döngüsel mekanik ölçüm gerçekleştirin.
  14. Fermuarları ve ateli çıkarın. Hayvanı kurtarma odasına geri koyun. Hayvan, yeterli bilinci yeniden kazanana kadar gözetimsiz bırakılmaz, ardından kafesine geri döndürülür. Hayvanları herhangi bir olumsuz klinik belirti açısından günlük olarak izleyin ve varsa, her 72 saatte bir deri altından 1.2 mg / kg'lık bir dozda buprenorfin uygulayın veya erken ötenazi uygulayın. CO2 inhalasyonu ve torakotomi yoluyla ikincil bir ötenazi yöntemi yoluyla 7 günlük kafes aktivitesinin ardından hayvanlara ötenazi yapın.
    NOT: Döngüsel yükleme uygulaması ve mekanik ölçümler, daha önce grubumuz17 tarafından bildirildiği gibi, bir tork sensörü, 3D baskılı ayak bileği eklem aktüatörü ve hayvan yatağı, bir 3D elektromanyetik konum ve yönlendirme sistemi ve dorsifleksiyon elde etmek için bir şaftı döndüren bir step motordan oluşan özel yapım bir aparat ile elde edilmiştir. Bu sistem, adım 1.2'de bahsedilen bir MATLAB betiği tarafından kontrol edilir. Tork sensörü ve konum ve yönlendirme sistemi, sistemin yükleme protokolü boyunca tork ve konum verilerini yakalar.

4. Veri analizi

  1. Ölçüm öncesi ve sonrası verileri ayrı ayrı MATLAB'a yükleyin.
  2. Denklem (1) ve (2) kullanılarak adım 2.2'den ölçülen moment koluna ve adım 2.11'den elde edilen belirtilen uygulanan yük sayısında ölçülen kesit alanına dayalı olarak torku gerilime dönüştürün:
    Equation 1(1)
    Equation 2(2)
  3. Adım 2.10'dan elde edilen dönüşüme dayalı olarak açıyı gerinim haline getirin.
  4. Ölçüm öncesi ve sonrası döngüler için ortalama histerezis (yükleme ve boşaltma eğrileri arasındaki alan), tepe gerilimi (çevrimin maksimum gerilim değeri) ve yükleme ve boşaltma modüllerini (yüklemenin son %50'sinin ve boşaltma eğrilerinin ilk %60'ının doğrusal uyumu) hesaplayın.
  5. Adım 4.4'ten itibaren ölçüm öncesi ve sonrası döngüler arasındaki mekanik özelliklerdeki yüzde değişimini hesaplayın.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Uygulanan siklus sayısının artmasıyla, in vivo tendon mekanik özelliklerinde daha büyük bir azalma olmuştur. 3.600 ve 7.200 döngü gruplarına kıyasla 500 döngü grubu için histerezis ve yükleme ve boşaltma modüllerinde önemli ölçüde daha düşük bir azalma vardı (p < 0.05) (Şekil 2). 500 döngüden 3.600 döngü grubuna döngü başına pik streste önemli bir azalma olurken, 500 ve 7.200 döngü grupları arasında önemli bir azalma olmamıştır. 3.600 ve 7.200 döngü grubu için histerezis, pik stres ve yükleme ve boşaltma modüllerinde tutarlı bir yüzde azalma oldu. Tendon örneklerinin hematoksilen ve eozin ve Masson'un Trikrom boyalı görüntüleri, daha yuvarlak hücreler, hiper hücrelilik, lif bozulması ve lif kıvrılması ile daha yüksek dorsifleksiyon döngüleri ile daha yüksek mikroyapısal hasar seviyelerini doğruladı (Şekil 3). Bu makaledeki sonuçlar, daha yüksek dorsifleksiyon döngülerinin Aşil tendonunda artan hasar seviyelerine neden olduğunu göstermektedir.

Figure 1
Şekil 1: Pasif ayak bileği dorsifleksiyon test sistemi. (A) Güç kaynağı, (B) mikrodenetleyici, (C) step motor, (D) tork sensörü, (E) 3D elektromanyetik konumlandırma ve yönlendirme sensörü, (F) 3D baskılı ayak bileği montajı, (G) 3D baskılı hayvan yatağı, (H) 3D baskılı burun konisi tutucusu. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 2
Şekil 2: Temsili döngüsel yükleme gerilim-gerinim eğrileri. Histerezis 0, 500, 1.000, 2.000, 3.600 ve 7.200 döngülerinde eğriler. Ok, artan döngü sayısı ile azalan tepe gerilimini gösterir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 3
Şekil 3: Tendon örneklerinin temsili histolojik olarak boyanmış görüntüleri. Bu çalışma için 500, 1.000, 2.000, 3.600 ve 7.200 döngü grubu için tendonların Hematoksilen ve Eozin (solda) ve Masson'un Trikrom (sağda) boyanmış görüntüleri, uygulanan döngü sayısının arttırılmasının daha yuvarlak hücreler, hiper hücrelilik (yıldızlar), lif bozulması ve lif kıvrılması (oklar) ile sonuçlandığını göstermiştir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Bu çalışma, in-vivo aşırı kullanıma bağlı bir tendinopati modeli için sıçan Aşil tendonunu pasif bir ayak bileği dorsifleksiyon sistemi ile döngüsel olarak yüklemek için bir yöntem sunmaktadır. Sistemin önemi, Aşil tendonunu izole etme, tendona cerrahi olarak erişmeden ölçülebilir yükler uygulama ve in-vivo tendon özelliklerini ölçme yeteneğinde yatmaktadır.

2010 yılında, Fung ve ark. özel yapım bir test sistemi14 ile bir sıçan patellar tendon yorgunluğu modeli sundu. Çalışmaları, tendonu açığa çıkararak patellar tendonu doğrudan yüklemenin bir yöntemini sundu. Bu yöntem aynı zamanda tendona ölçülebilir yorgunluk yükleri uygularken, yüklerin doğrudan uygulanması, cilt insizyonuna ve ardından kapanmaya ek bir inflamatuar yara iyileşme tepkisi getirebilir. Yöntemimizle, noninvaziv olarak uygulanan yükler, ölçülen herhangi bir biyolojik yanıtın herhangi bir dış faktörden ziyade tamamen yükleme protokolüne bağlı olmasını sağlar.

Bu yükleme protokolünün kritik bir bileşeni, geri bildirim-kontrol döngüsüdür. Histerezis yükleme eğrisinin eğimini kontrol ederek ve gerekirse dorsifleksiyon açısını arttırarak, sistem aşil tendonunu sürekli olarak yorar. Diz splintleme, dorsifleksiyonun dizi ve çevresindeki diğer yumuşak dokuları hareket ettirmek yerine sadece tendonu germesini sağladığı için kritik bir adımdır. Splintlemenin doğru yapılıp yapılmadığını kontrol etmek için, sert bir tendon hissetmek için splintlemeden sonra ayak bileğini manuel olarak çalıştırın ve döngüsel yükleme adımından önce üretilen histerezis eğrilerini izleyin.

Bu çalışmanın sınırlamalarından biri, gerinim değerlerinin nispeten büyük olmasıdır. Bununla birlikte, insan Aşil tendonlarının pasif dorsifleksiyonu ile karşılaştırılabilirler ve Aşil tendonunun ve gastroknemius kasının uzamasından kaynaklanabilirler18. Diğer bir sınırlama, tork ve stres arasındaki dönüşümlerin, hayvanlar arasında değişebilen, ayak bileği eklemi etrafındaki ex vivo ölçülen ortalama tendon kesit alanı ve moment kolu ile sınırlı olmasıdır.

Kronik tendinopatinin patolojisi ve erken evreleri henüz aydınlatılamamıştır. Yaş ve diğer risk faktörlerinin yanı sıra, aşırı kullanım kronik tendinopati gelişimine katkıda bulunan önemli bir faktördür. Tekrarlanabilir aşırı kullanım yaralanmaları, sistemimiz aracılığıyla birden fazla yorulma döngüsel yükleme nöbeti uygulamasıyla simüle edilebilir. Ayrıca, bu sistemin noninvaziv olması, tendinopatideki kritik biyobelirteçleri anlamak için tendon hasarındaki biyolojik ve yapısal değişikliklerin ve uzun süreler boyunca iyileşme yanıtlarının değerlendirilmesine izin verir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazarların beyan edecek herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Acknowledgments

Finansman desteklerimizi kabul etmek isteriz: Joe Fallon Araştırma Fonu, Dr. Louis Meeks BIDMC Spor Hekimliği Stajyer Araştırma Fonu ve okul içi hibe (AN), tümü BIDMC Ortopedi'den ve Ulusal Sağlık Enstitüleri'nden (2T32AR055885 (PMW)).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
1/32'' Aluminum beads
2.5% isoflurane
3D digitizing pen Polhemus, Vermont, NH, USA
3D electromagnetic positioning and orientation sensor Polhemus, Vermont, NH, USA
5% isoflurane
Customized device: 1) Assembly, sensors, 3D printed animal bed and ankle mount actuator Assembled as described in manuscript
MATLAB code MATLAB, Natick, MA, USA
Microcontroller Ivrea, Italy Arduino UNO, Rev3 
Nose cone
Scalpel and scalpel holder No. 11 scalpel
Sprague-Dawley rats Charles River Laboratories, Wilmington, MA, USA 11-13 weeks old
Stepper driver SparkFun Electronics, Niwot, CO 80503 DM542T
Stepper motor SparkFun Electronics, Niwot, CO 80503 23HE30-2804S
Straight forceps
Torque sensor assembly Futek Inc., Irvine, CA, USA  FSH03985, FSH04473, FSH03927
Water heating pad

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Kaux, J. F., Forthomme, B., Goff, C. L., Crielaard, J. M., Croisier, J. L. Current opinions on tendinopathy. J Sports Sci Med. 10 (2), 238-253 (2011).
  2. Maffulli, N., Longo, U. G., Kadakia, A., Spiezia, F. Achilles tendinopathy. Foot Ankle Surg. 26 (3), 240-249 (2020).
  3. Teunis, T., Lubberts, B., Reilly, B. T., Ring, D. A systematic review and pooled analysis of the prevalence of rotator cuff disease with increasing age. J Shoulder Elbow Surg. 23 (12), 1913-1921 (2014).
  4. von Rickenbach, K. J., Borgstrom, H., Tenforde, A., Borg-Stein, J., McInnis, K. C. Achilles tendinopathy: evaluation, rehabilitation, and prevention. Curr Sports Med Rep. 20 (6), 327-334 (2021).
  5. Aicale, R., Oliviero, A., Maffulli, N. Management of Achilles and patellar tendinopathy: what we know, what we can do. J Foot Ankle Res. 13 (1), 59 (2020).
  6. Jarvinen, T. A., et al. Achilles tendon injuries. Curr Opin Rheumatol. 13 (2), 150-155 (2001).
  7. Silbernagel, K. G., Hanlon, S., Sprague, A. Current clinical concepts: conservative management of Achilles tendinopathy. J Athl Train. 55 (5), 438-447 (2020).
  8. Tayfur, A., et al. Are landing patterns in jumping athletes associated with patellar tendinopathy? A systematic review with evidence gap map and meta-analysis. Sports Med. 52 (1), 123-137 (2022).
  9. Malliaras, P., Cook, J. L., Kent, P. Reduced ankle dorsiflexion range may increase the risk of patellar tendon injury among volleyball players. J Sci Med Sport. 9 (4), 304-309 (2006).
  10. Backman, L. J., Danielson, P. Low range of ankle dorsiflexion predisposes for patellar tendinopathy in junior elite basketball players: a 1-year prospective study. Am J Sports Med. 39 (12), 2626-2633 (2011).
  11. Glazebrook, M. A., Wright, J. R. Jr, Langman, M., Stanish, W. D., Lee, J. M. Histological analysis of achilles tendons in an overuse rat model. J Orthop Res. 26 (6), 840-846 (2008).
  12. Carpenter, J. E., Flanagan, C. L., Thomopoulos, S., Yian, E. H., Soslowsky, L. J. The effects of overuse combined with intrinsic or extrinsic alterations in an animal model of rotator cuff tendinosis. Am J Sports Med. 26 (6), 801-807 (1998).
  13. Gao, H. G., et al. Increased serum and musculotendinous fibrogenic proteins following persistent low-grade inflammation in a rat model of long-term upper extremity overuse. PLoS One. 8 (8), e71875 (2013).
  14. Fung, D., et al. Early response to tendon fatigue damage accumulation in a novel in vivo model. J Biomech. 43 (2), 274-279 (2010).
  15. Ueda, Y., et al. Molecular changes to tendons after collagenase-induced acute tendon injury in a senescence-accelerated mouse model. BMC Musculoskelet Disord. 20 (1), 120 (2019).
  16. Bloom, E., et al. Overload in a rat in vivo model of synergist ablation induces tendon multi-scale structural and functional degeneration. J Biomech Eng. 145 (8), 081003 (2023).
  17. Williamson, P. M., et al. A passive ankle dorsiflexion testing system to assess mechanobiological and structural response to cyclic loading in rat Achilles tendon. J Biomech. 156, 111664 (2023).
  18. Oliveira, L. F., Peixinho, C. C., Silva, G. A., Menegaldo, L. L. In vivo passive mechanical properties estimation of Achilles tendon using ultrasound. J Biomech. 49 (4), 507-513 (2016).

Tags

JoVE'de Bu Ay Sayı 205
Aşırı Kullanıma Bağlı Tendinopatinin <em>In Vivo Modeli için Pasif Ayak</em> Bileği Dorsifleksiyon Test Sistemi
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Chainani, P. H., Williamson, P. M.,More

Chainani, P. H., Williamson, P. M., Yeritsyan, D., Momenzadeh, K., Kheir, N., DeAngelis, J. P., Ramappa, A. J., Nazarian, A. A Passive Ankle Dorsiflexion Testing System for an In Vivo Model of Overuse-induced Tendinopathy. J. Vis. Exp. (205), e65803, doi:10.3791/65803 (2024).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter