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Article de méthode

Explorer les choix de cycle vital : Utilisation de la température et du type de substrat comme facteurs d’interaction pour les préférences des larves et des femelles de la mouche à viande

2.6K vues

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DOI :

10.3791/65835

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17 novembre 2023

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* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

Dans le présent document, deux protocoles d’évaluation de la source de nourriture et des préférences de ponte chez les larves et les femelles de mouches à viande sont détaillés. Ceux-ci comprennent quatre choix avec deux facteurs en interaction : le type de substrat et la température. Les tests permettent de déterminer la préférence de la source de nourriture des larves et la préférence du site de ponte pour les femelles.

Résumé

Les mouches à viande (Diptera : Calliphoridae) présentent un large éventail de modes de vie larvaires, généralement classés comme parasitisme obligatoire, parasitisme facultatif et sapro-nécrophage complet. Plusieurs espèces parasites, à la fois obligatoires et facultatives, sont considérées comme ayant une importance sanitaire et économique, car leurs larves peuvent provoquer une myiase (infestation d’asticots dans les tissus vivants). Cependant, il convient de noter que la femelle adulte joue un rôle décisif dans le choix du site de ponte et, par conséquent, détermine en grande partie les habitudes alimentaires et les conditions de développement des larves. Dans cette étude, deux protocoles sont proposés pour tester la préférence alimentaire des larves et la préférence des femelles pour le site de ponte en tenant compte de deux facteurs en interaction : le type de substrat de viande et la température. Les montages présentés ici ont permis de tester des larves et des femelles gravides de Lucilia cuprina dans un test à quatre choix avec deux températures (33 ± 2 °C et 25 ± 2 °C) et deux types de substrats de viande (viande fraîche supplémentée en sang et viande avariée de 5 jours). Les larves ou les femelles gravides peuvent choisir de creuser ou de pondre leurs œufs, respectivement, dans l’un ou l’autre des endroits suivants : viande pourrie à 25 °C (simulant l’état d’une espèce nécrophage), viande fraîche supplémentée en sang à 33 °C (simulant une condition d’espèce parasite) et deux témoins, viande avariée à 33 °C ou viande fraîche supplémentée en sang à 25 °C. La préférence est évaluée en comptant le nombre de larves ou d’œufs pondus dans chaque option pour chaque répétition. La comparaison des résultats observés à une distribution aléatoire a permis d’estimer la signification statistique de la préférence. Les résultats ont indiqué que les larves de L. cuprina ont une forte préférence pour le substrat pourri à 25 °C. À l’inverse, la préférence des femelles pour le site de ponte était plus variée selon le type de viande. Cette méthodologie peut être adaptée pour tester la préférence d’autres espèces d’insectes de taille similaire. D’autres questions peuvent également être explorées en utilisant des conditions alternatives.

Introduction

Les mouches, en particulier les muscoïdes calyptrates (y compris les mouches à viande, les mouches domestiques, les mouches bots et les mouches à chair, entre autres), présentent un large éventail de modes de vie, englobant des comportements parasites et nécro-saprofages1. Les espèces parasites causent généralement la myiase, c’est-à-dire l’infestation des tissus vivants par les asticots (larves)2. Dans la famille des Calliphoridae, les espèces parasites obligatoires et facultatives sont des ravageurs majeurs du bétail responsables de pertes économiques et d’un mauvais bien-être animal en raison d....

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Protocole

Les échantillons de mouches ont été prélevés à l’aide de pièges et non sur des animaux infestés. Une licence SISBIO (67867-1) a été délivrée pour la collecte et la détention de mouches de la famille des Calliphoridae en captivité dans des conditions de laboratoire. Les échantillons d’insectes sont exemptés de l’évaluation éthique dans la recherche au Brésil. De la viande et du sang bovins étaient obtenus dans le commerce, et aucune autorisation éthique n’était requise.

1. Préférence alimentaire des larves

  1. Préparation des boîtes de Pétri contenant 2% d’agar
    1. Préparez quatre boîtes de Pétri avec de l’agar-agar....

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Résultats

Pour démontrer l’efficacité des méthodes présentées, les expériences ont été menées sur une population de laboratoire de Lucilia cuprina (famille : Calliphoridae), une mouche parasite facultative2. L’ensemble des données brutes obtenues pour cette espèce se trouve dans le fichier supplémentaire S3 avec les résultats des tests de préférence de substrat des larves et des femelles. Afin d’évaluer si les larves et les femelles manifestent une préférence pour un substrat quelc.......

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Discussion

Pour comprendre l’évolution des habitudes alimentaires, en particulier dans le contexte du parasitisme chez les mouches à viande, il faut examiner les préférences en matière de substrat à différents stades de vie pour l’alimentation ou la ponte. Par conséquent, dans cette étude, des méthodes robustes et simples ont été proposées pour étudier les préférences de substrat chez les larves et les femelles de mouches à viande. Ces méthodes ont été testées chez Lucilia cuprina, une mouche parasite facultative

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Déclarations de divulgation

Aucune n’a été déclarée.

Remerciements

Nous remercions Patrícia J. Thyssen, Gabriela S. Zampim et Lucas de Almeida Carvalho pour avoir fourni la colonie de L. cuprina et pour leur aide dans la mise en place de l’expérience. Nous tenons également à remercier Rafael Barros de Oliveira pour le tournage et le montage de la vidéo. Cette recherche a été financée par la subvention de recherche sur les pays en développement de l’Animal Behavior Society à V.A.S.C. et par une subvention FAPESP Dimensions US-Biota-São Paulo à T.T.T. (20/05636-4). S.T. et D.L.F. ont bénéficié d’un soutien de la FAPESP (bourse postdoctorale 19/07285-7 et bourse doctorale 21/10022-8, respectivement). V.A.S.C. et A.V.R. ont été ....

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
AgarSigma-Aldrich05038-500GPour la microbiologie
Cartonsnoirs--70x50 cm
Sang bovin avec anticoagulant  ;--50 % de sang bovin pur avec anticoagulant (3,8 % de citrate de sodium) + 50 % d’eau filtrée
Viande hachée bovine--Environ 7-8 % de matière grasse
Brosse--Fabriqué avec
tube coniqueFalcon ou Generic-50mL
Récipients en verre en forme de croixFait à la mainNA48x48 cm, 8 cm de hauteur et 8 cm de largeur
ErlenmeyerVidrolaborNA500 mL
70 % EthanolSynthA1084.01.BL70 % éthyléthanol absolu + 30 % d’eau filtrée
Cylindre graduéNalgon ou Generic-500mL et 50 mL
Coussin chauffantThermolux-30x40cm dimensions, 40 W, 127 V
Thermomètre infrarougeHeTaiDaHTD8808Thermomètre corporel sans contact (fréquence d’échantillonnage : 0,5 S,
Précision : ± ; 0,2 ° ; C,
Mesure : 5-15 cmBoîte
Pétri (Verre)PrécisionNA150x20 mm dimensions
  ;   ;  ;   ;  ;   ;   ;(Remarque : les boîtes de Pétri peuvent être en plastique si elles ne sont utilisées qu’une seule fois)
Boîte de Pétri PSCralplast1813060x15 mm dimensions Pipette
Pasteur en plastique--3 mL (volume total)
Citrate de sodiumSynthC11033.01.AG3,8 % Citrate de sodium (38 g dilué dans 1L d’eau filtrée)
Cuillères--Plus d’une cuillère est nécessaire. Utilisez-en un pour chaque type de substrat de viande. De préférence en acier inoxydable.
Spatule en acier inoxydableGeneric-Extrémitéplate et extrémité cuillère
Stéréomicroscope/22
Lentilles Pince à épiler--Métal fabriqué et pointe fine
Bandes lumineuses LED blanchesNANA NA4.8 W, 2x0.05 mm² ;, 320 lumens, Température de couleur :6500 K (blanc)
un en plastique de Bioptika-WF10X

Références

  1. Kutty, S. N., et al. Phylogenomic analysis of Calyptratae: Resolving the phylogenetic relationships within a major radiation of Diptera. Cladistics. 35 (6), 605-622 (2019).
  2. Zumpt, F. Myiasis in Man and ....

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Réimpressions et autorisations

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