Method Article

שיטת איסוף Fungiform (טעם) ואדומות מן הלשון האדם

DOI:

10.3791/2201

⸱

September 18th, 2010

 ,  ,  , 
1Department of Basic Science and Craniofacial Biology, College of Dentistry, New York University, 2Department of Internal Medicine and Department of Psychiatry, School of Medicine, Washington University in St. Louis, 3Veterans Affairs Medical Center, 4School of Dental Medicine, Department of Biochemistry, University of Pennsylvania-School of Medicine, 5Monell Chemical Senses Center, 6Monell Chemical Senses Center

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הידע של המנגנונים המולקולריים שבבסיס התמרה התעורר אצלם נהנתה לאחרונה התקדמות משמעותית, בעיקר בשל שימוש במודלים של בעלי חיים. עם זאת, מגוון רחב של רגישות וספציפיות טעם בקרב היונקים מחקרים צווי ברקמות אנושיות. אנו מתארים טכניקה ביופסיה כדי לאסוף טעם תאים חיים מ גבשושיות על הלשון האנושית.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

חוש הטעם הוא קריטי עבור חיי אדם. הוא מיידע את הגוף על איכות המזון יהיה ingested פוטנציאלי ומעורר תהליכים מטבוליים כי להכין את העיכול לעיכול. התקדמות יציבה נעשית להבנת אירועים ביוכימיים מוקדם המולקולריים שבבסיס התמרה טעם (לסקירה, ברסלין ו ספקטור, 2008 1). עם זאת, ההתקדמות עד כה הביאה במידה רבה במודלים של בעלי חיים. עם זאת, מאז הבדלים מסומן סגוליות הקולטן צפיפות קולטני להשתנות בין המינים, התמרה טעם אנושי שתובן רק באמצעות רקמות הטעם האנושי. כאן אנו מתארים טכניקה ביופסיה כדי לאסוף אדם fungiform ואדומות, נראה כמו מבנים מעוגלים הקדמי ורוד, על 0.5 מ"מ בקוטר המכילים בלוטות הטעם. גבשושיות אלו ביופסיה משמשים למטרות מספר כולל בידוד של תאים ניצן קיימא טעם, ב אימונוהיסטוכימיה באתרו הכלאה, ובאמצעות טכניקות של ביולוגיה מולקולרית, לזיהוי של טעם ספציפי חלבונים חדשים.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. מבוא שיקולים כלליים

ההליך כרוך בהרדמה מקומית כללית של אזור (1 ס"מ 2) קטן של פני השטח הגבי של הלשון הקדמי, ואחריו הסרת מספר (6-8) של fungiform (טעם) ואדומות מאזור זה בהרדמה באמצעות קפיץ מיקרו מעוקל , מספריים (מקפרסון-Vannas סוג # SR 5603, Roboz, Rockville, MD). הורידו fungiform ואדומות כ 0.25 מ"מ 3 כל אחד. יש מעט מאוד אי - ואדומות (טעם) רקמת האפיתל להסיר יחד עם כל פטמית. טופס חדש ואדומות באזור זה לאחר 3 עד 5 שבועות ולהשיב תפקוד בלוטות הטעם (שפילמן ו ברנד, תצפיות לא פורסם). אין השפעה ניכרת על טעם או טעם של מזון לאחר הסרת כמות קטנה של חומר ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אחד היתרונות הבולטים בשימוש בתאים אנושיים הוא הספציפיות שלהם. ההליך המתואר כאן בפירוט מספק רקמות לשון לבידוד של הקולטן בתאי הטעם של בני אדם. תאים אלה יכולים לשמש טעם ללימודי מולקולרית, המבקשים לגלות מולקולות חשובות עבור התמרה של מידע הטעם, הדמיה מחקרים סידן שהצג תא פעילות טעם לגירויים. בנוסף, רקמות לשון מסופק על ידי הליך זה ניתן לנתח עם טכניקות שונות, כגון אימונוהיסטוכימיה, ב הכלאה באתרו, ומאפשר ללכוד תאים בודדים עבור הליכים מולקולרית כגון תגובת שרשרת פולימראז (P.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
אין ניגודי אינטרסים הכריז.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עבודה זו נתמכה על ידי NIH R21 DC03969-01 (עד JGB). אנו מודים לד"ר פריץ לישקה עבור לכידת יחיד ניצן הטעם תאים, ד"ר Tauf Huque עבור ביצוע RT-PCR שמוצג באיור 4 ב 'ו - ד ביילי מר וגב' ס אלארקון לקבלת סיוע טכני. מ ינינה Pepino הוא בחור נתמך על ידי DA07313 NIDAT32 וושינגטון הספר לרפואה של אוניברסיטת סנט לואיס, מיזורי (Cottler, LB PI).

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
מקפירסון-ואנאס. קצה חיתוך מעוקל וחד 5 מ"מ. מסרק, רוחב קצה 0.2 מ"מ אורך כולל 3 אינץ'Roboz Surgical Instruments Co.RS-5603, רובוז
קטן דומונט מלקחייםRoboz Surgical Instruments Co.RS-4915, רובוז

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Breslin, P. A., Spector, A. C. Mammalian taste perception. Curr Biol. 26 (4), R148-R155 (2008).
  2. Miller, I. Anatomy of the peripheral taste system. Handbook of Olfaction and Gustation. Doty, R. I., Dekker, M. , Marcel Dekker. New York. 521-547 (1995).
  3. Figure 12.67.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Fungiform Papillae CollectionHuman Tongue BiopsyTaste Papillae IsolationMicro Scissors TechniqueSterile Gauze PadLidocaine Anesthesia InjectionRinger Buffer PreparationEnzymatic Dissociation MethodSingle Cell PCRImmunohistochemistry Staining

Related Articles