אנו מדגימים את הטכניקות הבסיסיות הקלטה תיקון presynaptic מהדק את גביע של הלד, מסוף יונקים העצבים המרכזית מערכת העצבים. הקלטות חשמל ממסוף presynaptic לאפשר מדידה של פוטנציאל פעולה, ערוץ זרמי סידן, איחוי שלפוחית (exocytosis) ספיגת הקרום הבאים (אנדוציטוזה). שילוב של שלפוחית המכילה הנוירוטרנסמיטר גורם קרום שלפוחית שיתווספו קרום התא של גביע. גידול זה בהיקף של קרום התא הוא, כפי שהיא נמדדת עלייה קיבול. הירידה עוקבת קיבול מציין אנדוציטוזה, תהליך של ספיגת קרום או הסרה של קרום גביע. אנדוציטוזה, נחוצה כדי לשמור על המבנה של גביע והוא נחוץ גם כדי ליצור שלפוחית כי יתמלאו הנוירוטרנסמיטר לאירועים exocytosis בעתיד. הקלטות קיבול על גביע של הלד אפשרו ישירות ובמהירות למדוד לשחרר שלפוחי ו אנדוציטוזה מאוחרות מסוף יונקים עצב במערכת העצבים המרכזית. בנוסף, הפעילות postsynaptic המקביל ניתן למדוד בו זמנית באמצעות הקלטות לזווג. לכן תמונה מלאה של הפעילות החשמלית presynaptic ו postsynaptic בסינפסה מערכת העצבים המרכזית הוא בר השגה באמצעות הכנה. כאן, שיטות להכנת פרוסה, תכונות מורפולוגיות לזיהוי calyces, בטכניקות נערך תיקון בסיסי clamping, ודוגמאות של הקלטות קיבול למדוד exocytosis ו אנדוציטוזה מוצגים.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
במאמר זה
תקציר
פרוטוקול
הצמד תיקון התקנה:
אופטיקה: אופטיקה חשובים מאוד למצוא תא טובה, כדי לקבוע את המיקום של זה.
נסה להשיג תמונה ברורה של התאים: קצוות חדים, רך למראה תא.
סרוק את שדה שלם כדי לחפש טוב התאים העיקריים MNTB עם גביע המצורפת. סיבוב צלחת לחפש calyces מזוויות שונות. בהתחלה זה בסדר להתאמן על מסוף, בלון בצורת.
פיק התא על פני השטח של פרוסה או שכבה 2 nd
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
