Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Создание Реверсивные холестатическая Модель Крыса

Published: May 21, 2011 doi: 10.3791/2692
* These authors contributed equally

Summary

Холестаза клинического состояния обычно сталкиваются обе хирургов и гастроэнтерологов. Создание модели обратимого крысы холестатическая может оказаться непростой задачей ввиду меньших размеров и уникального гепатопанкреатобилиарной анатомии у крыс. Это видео статья демонстрирует создание модели обратимого холестатический.

Abstract

Холестаза клинического состояния обычно сталкиваются обе хирургов и гастроэнтерологов. Холестаз может вызывать различные физиологические изменения, и повлиять на состояние питания и хирургические результаты. Изучение патофизиологических изменений, происходящих в печени и других органов имеет важное значение. Различные исследования были проведены в холестатическая модели крысы.

Мы использовали модели обратимого крысы холестатическая в нашем недавнем исследовании, глядя на роль метилпреднизолона в травме реперфузия ишемии. Различные методы для создания модели обратимого холестатическая были описаны. Создание модели обратимого крысы холестатическая может оказаться непростой задачей ввиду меньших размеров и уникального гепатопанкреатобилиарной анатомии у крыс. Это видео статья демонстрирует создание модели обратимого холестатический.

Эта модель может быть использована в различных исследованиях, таких как, глядя на изменения в питании, физиологические, патологические, гистологические и иммунологические изменения в желудочно-кишечном тракте. Эта модель также может быть использован, чтобы увидеть последствия холестаза и различных терапевтических вмешательств на крупных операций печени.

Protocol

1. Крыса желчных анатомии

Средний желчных протоков диаметром и длиной 1 мм и 29 мм соответственно. Среднее расстояние между привратника и сосочка двенадцатиперстной кишки была 28 мм. Существуют две основные протоки поджелудочной железы, которые открываются в желчный проток - передняя проток открывается на левый бок и задняя проток открывается на правой стороне. В дополнение к этим основным протоков, ряд мелких протоков, которые истощают все три части поджелудочной железы открыты непосредственно в желчный проток 6.

2. Техника

Все животные были проведены эксперименты по согласованию с Национальным институтом здоровья руководящие принципы по этическим исследования и были одобрены исследований учреждения комитета и Комитета уходу за животными. Мужской Sprague-Dawley крыс в возрасте 8 недель, были использованы для этой демонстрации. Крыс были получены из лаборатории Charles River в городе Уилмингтон, штат Массачусетс, и все было более 300 граммов. Крысы имели доступ к стандартной диете лабораторных и были размещены вместе в стандартных лабораторных условиях.

Крысы были первоначально анестезировали isofluorane и держали под наркозом во время операции с isofluorane через маску. Срединный разрез на 2 см было сделано, начиная от мечевидного отростка. После фасции был открыт, печени долей убирались краниально с втягивающим Сена и двенадцатиперстной кишки был втянут каудально использованием Q-подсказки. Желчных протоков была идентифицирована как трубчатая структура ввода двенадцатиперстной кишки. Желчных протоков была помещена под напряжение и частично разрезать. Стерильный 5 см длинной трубки полиэтилена с внутренним диаметром 0,6 мм и наружным диаметром 0,9 мм были использованы. Один конец этой трубки было тепло запечатаны, а другой конец был слегка скошенный. Скошенный конец был затем перешла в желчных протоках. Это было закреплено на месте с помощью 8-0 швов нейлон и проксимальных и дистальных к открытию в желчных протоках. Остальные трубки вместе с запечатанный конец был помещен в брюшную полость. Оперативное сайт орошаемых с физиологическим раствором. Животе была закрыта в 2 слоя, с 4-0 шва полиглактин. Белой линии был закрыт с непрерывным швов и прервал кожные швы были размещены. Кожа клей наносится на кожу. Крысах было позволено восстановить в стандартных лабораторных условиях с ежедневный мониторинг массы тела для обеспечения надлежащей гидратации.

Для операции обращения холестаз, крыс наркозом использованием isofluorane как описано выше. Живот был открыт по сравнению с предыдущим сайт разрез. Трубка была выявлена ​​и вывезли из брюшной полости. Сальниковой спайки вокруг трубки освобождается с помощью тупой и острый рассечение. Сайт в двенадцатиперстной кишке тогда определили для комфортного расположения дуоденостомия трубки. Кисетный шов, 2-3 мм в диаметре, был помещен использованием 8-0 нейлона. Двенадцатиперстной кишки был открыт внутри этого шва строку кошелек. Запечатанный конец трубки был затем разрезается на необходимую длину. Свободный поток желчи была обеспечена. Это конец трубки был помещен в двенадцатиперстную кишку и кисетный шов затянулся. Живот был орошаемых и закрылся в слоях.

В предыдущем исследовании, в котором choledochoduodenostomy проводили с использованием другой техники, крысы выжили в течение 12 недель и крыс были здоровы в течение этого периода. Кроме того, это исследование подтвердило изменение биохимических и гистологических изменений после choledochoduodenostomy у крыс подвергали обструкции желчных протоков в течение 2 недель. 7

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Холестаз приводит к несметным числом изменений в желудочно-кишечном тракте. Исследования были проведены ищет изменения в иммунной системе и состояние питания. 1-3 холестаза могут повлиять на результаты печеночной хирургии. Исследования были выполнены, чтобы улучшить результаты печеночной хирургии при наличии холестаза. 4-5 Благодаря усовершенствованиям в области медицины и научных исследований, дальнейшие исследования будет сделано на холестаз. Следовательно, необходимо иметь хорошую модель холестатический. Крысы предпочитают в качестве подопытных животных, потому что это легко доступны, легко обрабатывается, недорогое и надежное модель для изучения гепатопанкреатобилиарной системы. 6 С помощью этого видео статье мы продемонстрируем создание модели обратимого холестатическая которые могут быть использованы в будущих исследованиях.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Нет конфликта интересов объявлены.

References

  1. Gouma, D. J., Roughneen, P. T., Kumar, S., Moody, F. G., Rowlands, B. J. Changes in nutritional status associated with obstructive jaundice and biliary drainage in rats. Am J Clin Nutr. 44, 362-369 (1986).
  2. Ohtsuka, M., Miyazaki, M., Kondo, Y., Nakajima, N. Neutrophil-mediated sinusoidal endothelial cell injury after extensive hepatectomy in cholestatic rats. Hepatology. 25, 636-641 (1997).
  3. Abe, T. Kupffer cell-derived interleukin 10 is responsible for impaired bacterial clearance in bile duct-ligated mice. Hepatology. 40, 414-423 (2004).
  4. Saiki, S. Preoperative internal biliary drainage is superior to external biliary drainage in liver regeneration and function after hepatectomy in obstructive jaundiced rats. Ann Surg. 230, 655-662 (1999).
  5. Subhas, G. Protective effect of methylprednisolone on warm ischemia-reperfusion injury in a cholestatic rat liver. Am J Surg. 199, 377-380 (2010).
  6. Kara, M. E. The anatomical study on the rat pancreas and its ducts with emphasis on the surgical approach. Ann Anat. 187, 105-112 (2005).
  7. Ryan, C. J., Than, T., Blumgart, L. H. Choledochoduodenostomy in the rat with obstructive jaundice. J Surg Res. 23, 321-331 (1977).

Tags

Медицина выпуск 51 холестаз Крыса модель Реверсивные холестаз Choledochoduodenostomy непроходимость желчных путей холестаз
Создание Реверсивные холестатическая Модель Крыса
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Subhas, G., Bhullar, J., Mittal, V.More

Subhas, G., Bhullar, J., Mittal, V. K., Jacobs, M. J. Creation of Reversible Cholestatic Rat Model. J. Vis. Exp. (51), e2692, doi:10.3791/2692 (2011).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter