Summary
Холестаза клинического состояния обычно сталкиваются обе хирургов и гастроэнтерологов. Создание модели обратимого крысы холестатическая может оказаться непростой задачей ввиду меньших размеров и уникального гепатопанкреатобилиарной анатомии у крыс. Это видео статья демонстрирует создание модели обратимого холестатический.
Abstract
Холестаза клинического состояния обычно сталкиваются обе хирургов и гастроэнтерологов. Холестаз может вызывать различные физиологические изменения, и повлиять на состояние питания и хирургические результаты. Изучение патофизиологических изменений, происходящих в печени и других органов имеет важное значение. Различные исследования были проведены в холестатическая модели крысы.
Мы использовали модели обратимого крысы холестатическая в нашем недавнем исследовании, глядя на роль метилпреднизолона в травме реперфузия ишемии. Различные методы для создания модели обратимого холестатическая были описаны. Создание модели обратимого крысы холестатическая может оказаться непростой задачей ввиду меньших размеров и уникального гепатопанкреатобилиарной анатомии у крыс. Это видео статья демонстрирует создание модели обратимого холестатический.
Эта модель может быть использована в различных исследованиях, таких как, глядя на изменения в питании, физиологические, патологические, гистологические и иммунологические изменения в желудочно-кишечном тракте. Эта модель также может быть использован, чтобы увидеть последствия холестаза и различных терапевтических вмешательств на крупных операций печени.
Protocol
1. Крыса желчных анатомии
Средний желчных протоков диаметром и длиной 1 мм и 29 мм соответственно. Среднее расстояние между привратника и сосочка двенадцатиперстной кишки была 28 мм. Существуют две основные протоки поджелудочной железы, которые открываются в желчный проток - передняя проток открывается на левый бок и задняя проток открывается на правой стороне. В дополнение к этим основным протоков, ряд мелких протоков, которые истощают все три части поджелудочной железы открыты непосредственно в желчный проток 6.
2. Техника
Все животные были проведены эксперименты по согласованию с Национальным институтом здоровья руководящие принципы по этическим исследования и были одобрены исследований учреждения комитета и Комитета уходу за животными. Мужской Sprague-Dawley крыс в возрасте 8 недель, были использованы для этой демонстрации. Крыс были получены из лаборатории Charles River в городе Уилмингтон, штат Массачусетс, и все было более 300 граммов. Крысы имели доступ к стандартной диете лабораторных и были размещены вместе в стандартных лабораторных условиях.
Крысы были первоначально анестезировали isofluorane и держали под наркозом во время операции с isofluorane через маску. Срединный разрез на 2 см было сделано, начиная от мечевидного отростка. После фасции был открыт, печени долей убирались краниально с втягивающим Сена и двенадцатиперстной кишки был втянут каудально использованием Q-подсказки. Желчных протоков была идентифицирована как трубчатая структура ввода двенадцатиперстной кишки. Желчных протоков была помещена под напряжение и частично разрезать. Стерильный 5 см длинной трубки полиэтилена с внутренним диаметром 0,6 мм и наружным диаметром 0,9 мм были использованы. Один конец этой трубки было тепло запечатаны, а другой конец был слегка скошенный. Скошенный конец был затем перешла в желчных протоках. Это было закреплено на месте с помощью 8-0 швов нейлон и проксимальных и дистальных к открытию в желчных протоках. Остальные трубки вместе с запечатанный конец был помещен в брюшную полость. Оперативное сайт орошаемых с физиологическим раствором. Животе была закрыта в 2 слоя, с 4-0 шва полиглактин. Белой линии был закрыт с непрерывным швов и прервал кожные швы были размещены. Кожа клей наносится на кожу. Крысах было позволено восстановить в стандартных лабораторных условиях с ежедневный мониторинг массы тела для обеспечения надлежащей гидратации.
Для операции обращения холестаз, крыс наркозом использованием isofluorane как описано выше. Живот был открыт по сравнению с предыдущим сайт разрез. Трубка была выявлена и вывезли из брюшной полости. Сальниковой спайки вокруг трубки освобождается с помощью тупой и острый рассечение. Сайт в двенадцатиперстной кишке тогда определили для комфортного расположения дуоденостомия трубки. Кисетный шов, 2-3 мм в диаметре, был помещен использованием 8-0 нейлона. Двенадцатиперстной кишки был открыт внутри этого шва строку кошелек. Запечатанный конец трубки был затем разрезается на необходимую длину. Свободный поток желчи была обеспечена. Это конец трубки был помещен в двенадцатиперстную кишку и кисетный шов затянулся. Живот был орошаемых и закрылся в слоях.
В предыдущем исследовании, в котором choledochoduodenostomy проводили с использованием другой техники, крысы выжили в течение 12 недель и крыс были здоровы в течение этого периода. Кроме того, это исследование подтвердило изменение биохимических и гистологических изменений после choledochoduodenostomy у крыс подвергали обструкции желчных протоков в течение 2 недель. 7
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Холестаз приводит к несметным числом изменений в желудочно-кишечном тракте. Исследования были проведены ищет изменения в иммунной системе и состояние питания. 1-3 холестаза могут повлиять на результаты печеночной хирургии. Исследования были выполнены, чтобы улучшить результаты печеночной хирургии при наличии холестаза. 4-5 Благодаря усовершенствованиям в области медицины и научных исследований, дальнейшие исследования будет сделано на холестаз. Следовательно, необходимо иметь хорошую модель холестатический. Крысы предпочитают в качестве подопытных животных, потому что это легко доступны, легко обрабатывается, недорогое и надежное модель для изучения гепатопанкреатобилиарной системы. 6 С помощью этого видео статье мы продемонстрируем создание модели обратимого холестатическая которые могут быть использованы в будущих исследованиях.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Нет конфликта интересов объявлены.
References
- Gouma, D. J., Roughneen, P. T., Kumar, S., Moody, F. G., Rowlands, B. J. Changes in nutritional status associated with obstructive jaundice and biliary drainage in rats. Am J Clin Nutr. 44, 362-369 (1986).
- Ohtsuka, M., Miyazaki, M., Kondo, Y., Nakajima, N. Neutrophil-mediated sinusoidal endothelial cell injury after extensive hepatectomy in cholestatic rats. Hepatology. 25, 636-641 (1997).
- Abe, T. Kupffer cell-derived interleukin 10 is responsible for impaired bacterial clearance in bile duct-ligated mice. Hepatology. 40, 414-423 (2004).
- Saiki, S. Preoperative internal biliary drainage is superior to external biliary drainage in liver regeneration and function after hepatectomy in obstructive jaundiced rats. Ann Surg. 230, 655-662 (1999).
- Subhas, G. Protective effect of methylprednisolone on warm ischemia-reperfusion injury in a cholestatic rat liver. Am J Surg. 199, 377-380 (2010).
- Kara, M. E. The anatomical study on the rat pancreas and its ducts with emphasis on the surgical approach. Ann Anat. 187, 105-112 (2005).
- Ryan, C. J., Than, T., Blumgart, L. H. Choledochoduodenostomy in the rat with obstructive jaundice. J Surg Res. 23, 321-331 (1977).