עוף Windowing ביצים למחקרים התפתחותיים

Summary

קלות הנגישות של העובר אפשרה לניסויים למפות גורלות התא באמצעות גישות שונות, כולל חומוס שליו מפלצות וסימון צבע מוקד. במאמר זה אנו מדגים אחד הכנת ביצה שיטה כי כבר מותאם במיוחד פעמים הישרדות ארוכה.

Abstract

המחקר של פיתוח כבר סייעו במידה רבה על ידי שימוש בעובר האפרוח כמודל ניסיוני. קלות הנגישות של העובר אפשרה לניסויים למפות גורלות התא באמצעות גישות שונות, כולל חומוס שליו מפלצות וסימון צבע מוקד. בנוסף, היא מאפשרת הפרעות המולקולרי של מספר סוגים, כולל המיקום של חלבון מצופה חרוזים המבוא של ה-DNA פלסמיד משתמש electroporation אובו. ניסויים אלה הניבו מידע חשוב על התפתחות מערכת העצבים המרכזית ואת הפריפריה. עבור רבים של מחקרים אלה, יש צורך לפתוח את קליפת הביצה ואת reclose זה מביך ללא צמיחה של העובר. העובר ניתן לבדוק בכל שלבי ההתפתחות רצופים על ידי פתיחה מחדש את קליפת הביצה. אמנם יש כמה שיטות מצוין לפתיחת ביצי תרנגולת, במאמר זה אנו להדגים שיטה אחת, כי כבר מותאם במיוחד פעמים הישרדות ארוכה. בשיטה זו, הביצה מוטלת על צדו חלון קטן הוא חתך במעטפת. לאחר הליך הניסוי, הקליפה משמשת כדי לכסות את הביצה למשך הפיתוח שלה. סרט הפלסטיק השקוף שכיסה את קליפת הביצה מגנה על העובר ומסייעת לשמור על הלחות במהלך יתרת תקופת הדגירה. שיטה זו הייתה בשימוש החל שני ימי דגירה ו אפשרה הישרדות לדורותיה עובריים בוגרת.

Protocol

1. הסר ביצים אינקובטור

1. שמור על 37 ° C עם לחות יחסית להגדיר מעל 60%.
2. הסר את הביצים; להפוך ביצים 90 ° כך בסיס גדול טמון אופקי.

2. ביצים ספוגית לעקר

1. להרוות ערימה של גזה לא סטרילי עם אתנול 70%.
2. השתמש 2-3 חתיכות ספוגית עד 5 ביצים. בטל כאשר גזה הוא מלוכלך.

Discussion

שיטה זו מאפשרת פעמים הישרדות ארוכה בעקבות מניפולציות ניסיוני. לדוגמה, צבען תיוג מחקרים מותר הישרדות E10 או במאוחר במחקר גורל מיפוי (1). בנוסף, הוא שימש במשך במחקרים electroporation אובו המספקים שינוי של רמות ביטוי הגנים והפיתוח הנדרשים כדי להמשיך בשלבי ההתפתחות מאוחר יותר (2-6). טכניקה זו חלונאית ניתן להשתמש בשילוב עם הליך הדורש ההישרדות לאחר מניפולציות לעובר.

....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
חממה		Profi		Maintain ב-37° מעלות עם לחות יחסית מוגדרת מעל 60%
70%
3M סרט
מזרק 10 סמ"ק 1				/ביצה
18 גרם מחטים				1& # 189; מחט אינץ ', 1 / מזרק
מספריים				להבים ישרים חדים בגודל 4 אינץ'
ביצים