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Methodenartikel

Titel der Verkapselung von Zellen durch Tröpfchen

8.4K Aufrufe

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DOI:

10.3791/316

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1. Oktober 2007

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In diesem Artikel

Protokoll

NIH3T3-Zellen der Zubereitung:

A. Zellen für Ejection

  1. Trypsinize Zellen, dann verdünnt 1:1 mit Zell-Medien und Übertragung von einem T75 Kolben in ein 15 ml Falcon-Röhrchen
  2. Spin down-Zellen zu einem Pellet durch Zentrifugation, Absaugen des Überstandes und waschen Sie die Zellen mit DPBS
  3. Spin down-Zellen zu einem Pellet erneut, und saugen Überstand
  4. Die Zellen in den Medien
  5. Bestimmen Sie die Zelldichte mit Zählkammer (~ 200 X 10 4 Zellen / ml pro Flasche T75)
  6. Zentrifugenzelle Lösung absaugen Überstand und resuspendieren in entsprechender Höhe von Medien für unterschiedlic....

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Offenlegungen

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
FluoreszenzmikroskopNikon InstrumentsEclipse TE-2000 U
Zellen-Auswurfvorrichtung mit MagnetventilBetriebsfrequenz: 1 kHz, 30 psi, 50 nl bis 0,5 µl. 12-V-Ventiltreiber: 2,5 A Ansteuerstrom
5-Gallonen-tragbarer LufttankColemanPowermate CT5Druckluft: 30 psi
DruckreglerMarsh Bellofram
PulsgeneratorHP8112AErzeugung der Ansteuerfrequenz: 50 MHz
XYZ-StageNewmark SystemsMit Schrittmotor: xy-Stage mit 6-Zoll-Verfahrweg (NLS4-6-25), z-Stage mit 2,5-Zoll-Verfahrweg (NLS4-2.5-25), 3-Achsen-Controller (NSC-G3), 0,1-µm-Auflösung
NIH 3T3ZelllinieFibroblasten
Trypsin0,05%-ige Lösung
NIH-3T3-Zellmedium
DPBSPuffer
T75Gewebekulturgefäße
Kunststoff-konische Röhrchen15 ml, für Gewebekultur

Nachdrucke und Genehmigungen

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