Method Article

المورفومترية التحليلات من أقسام الشبكية

DOI:

10.3791/3377

February 19th, 2012

In This Article

Erratum Notice

Important: There has been an erratum issued for this article. Read More ...

Erratum

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Formal Correction: Erratum: Morphometric Analyses of Retinal Sections
Posted by JoVE Editors on 1/01/1970. Citeable Link.

null

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

هذا الفيديو يشرح ثلاثة أنواع من التحليلات المورفومترية من شبكية العين، والتي تشمل قياس سماكة طبقة داخلية النووية، قياس عدد خلايا الشبكية العقدة (الأوقات تستخدم GMT) وقياس الأحجام من الأوقات تستخدم GMT. لا يمكن للتقنية يقدم منصة بسيطة ولكنها علمية لتحليل المورفومترية.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقد استخدمت تحليلات المورفومترية من أقسام الشبكية في دراسة أمراض شبكية العين. فعلى سبيل المثال، قد فقدت كثيرا الخلايا العصبية في طبقة الخلايا العقدية للشبكية (RGCL) في نماذج الفئران مع N-ميثيل مد اسبارتاتي (NMDA) التي يسببها excitotoxicity الشبكية الإسكيمية-ضخه الاصابة (2) والزرق 3. الحد من طبقة ضفيري INL والداخلي (IPL) سمك تم عكس العلاج citicoline في أعين الفئران تعرض لkainic excitotoxicity جلتاميت حامض بوساطة 4. ولوحظ تغيير في كثافة RGC والأحجام سوما مع العلاجات الدوائية المختلفة في عيون مع ارتفاع ضغط العين 3،5،6. لذلك، قد تواجه وسائل موضوعية لتحليل morphometries شبكية العين تكون ذات أهمية كبيرة في تقييم أمراض شبكية العين، ومدى فعالية الاستراتيجيات العلاجية.

بنية شبكية العين هي متعددة الطبقات وعدة أنواع مختلفة من الخلايا العصبية EXIش في شبكية العين. المعلمات المورفومترية من شبكية العين مثل عدد الخلايا، وحجم الخلية وسمك طبقات مختلفة هي أكثر تعقيدا من خلية نظام الثقافة. في وقت مبكر، ويمكن الكشف عن هذه المعلمات باستخدام برامج أخرى من التصوير التجاري. القيم هي عادة من القيمة النسبية، وتغيير لقيمة دقيق قد تحتاج حساب مزيد من الدقة. أيضا، قد تتبع من حجم الخلية والصرف لا تكون دقيقة وحساسة بما يكفي للتحليل الإحصائي، وخصوصا في نموذج الزرق المزمن. قدمت القياسات المستخدمة في هذا البروتوكول على نحو أكثر دقة وسهولة. ويمكن ذكرت وطول مطلقة من خط وحجم الخلية مباشرة وسهلة ليتم نسخها إلى ملفات أخرى. على سبيل المثال، تعود علينا هامش الأنوية الداخلية والخارجية الأكثر خطورة في INL وشكل خط ثم استخدام البرنامج لرسم زاوية 90 درجة لقياس سماكة. في حين من دون مساعدة من البرنامج، خط مائل ربما وتغيير سمك شبكية العين قدلا تكون قابلة للتكرار بين المراقبين الفردية. وبالإضافة إلى ذلك، يمكن أيضا أن عدد وكثافة الأوقات تستخدم GMT يكون كميا. هذا البروتوكول يقلل بنجاح التغير في ملامح quantitating من شبكية العين، ويزيد من حساسية في الكشف عن تغيرات طفيفة.

وهذا الفيديو شرح ثلاثة أنواع من التحليلات المورفومترية من المقاطع في شبكية العين. وهي تشمل قياس سماكة INL، قياس عدد من الأوقات تستخدم GMT وقياس الأحجام من الأوقات تستخدم GMT في القيمة المطلقة. وتجرى هذه التحليلات مع ثلاثة من أصل محقق ستيريو (MBF العلوم البيولوجية - MicroBrightField، وشركة). لا يمكن للتقنية يقدم منصة بسيطة ولكنها علمية لتحليل المورفومترية.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. أدوات

مجهر، نيكون

ستيريو محقق، MBF العلوم البيولوجية - MicroBrightField، وشركة

2. إعداد

  1. قبل ان يعمل على أي تحليل المورفومترية، كل عينة شبكية العين هو مقطوع في سماكة ميكرون (4) ويخضع لتلطيخ H & E.
  2. وينقسم هذا الباب إلى شبكية العين 4 مناطق - المنطقة المحيطية العليا، والمنطقة العليا الوسطى....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. كيفية الحصول على قياس سماكة أكثر دقة؟

يمكنك تكبير الصورة بالنقر على "تكبير" زر وتركت فوق في إطار البحث عن المفقودين. يمكن النظر إلى الحدود INL بوضوح. إذا غيض من خط ليست على الحدود الخارجية للINL، لا يمكننا ضبط خط تحت وضع التحرير. بعد حصوله على خط العلاقة، انقر على الحق في إطار البحث عن المفقودين واختيار "إدراج نقطة في محيط مختارة". يمكن إضافة نقطة على الحدود الخارجية في حين أن نقطة وأضاف يجب أن يكون على طول الخط .......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الكتاب ليس لديهم ما يكشف.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ويدعم العمل على الأبحاث العين في هذا المختبر من قبل مؤسسة الصحة الاميركية مساعد، الأزالية (1972) صندوق الهبات، وجامعة هونغ كونغ صندوق المشاريع الصغيرة (20097176185).

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
اسم كاشف نوع شركة فهرس العدد
ستيريو محقق MBF برامج تحليل العلوم البيولوجية MicroBright الميدانية
مجهر أوليمبوس BX51 شركة اوليمبوس BX51

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Lam, T. T., Abler, A. S., Tso, M. O. N-Methyl-D-Aspartate (NMDA)–Induced Apoptosis in Rat Retina. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 40, 2391-2397 (1999).
  2. Lam, T. T., Abler, A. S., Tso, M. O. Apopto....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Retinal MorphometryInner Nuclear Layer ThicknessRetinal Ganglion Cell CountRetinal Ganglion Cell SizeStereo Investigator SoftwareImage Analysis ProtocolBrightfield MicroscopyH E StainingRetinal Layer TracingCell Morphometry Measurement

Related Articles