Благодаря простоте операции и надежный поведенческий результат, хроническая сжатия седалищного нерва является одним из самых выдающихся животных моделях нейропатической боли. В течение 24 часов после операции, боль гиперчувствительности установлена и может быть количественно измерена с помощью фон Фрей aesthesiometer (механических испытаний) и подошвенные метр обезболивания (тепловых испытаний).
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Хронический Сужение седалищного нерва и боль Гиперчувствительность тестирования у крыс
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Хроническая нейропатическая боль, возникающая вследствие повреждения центральной или периферической нервной системы, представляет собой распространенное и изнурительное состояние, затрагивающее 7-18% населения1,2. Симптомы включают спонтанную боль (ощущение покалывания, жжения, ударов электрического тока), дизестезию, парестезию, аллодинию (боль в ответ на обычно безболезненные стимулы) и гипералгезию (повышенную реакцию на болезненные стимулы). Сенсорные симптомы сопровождаются поведенческими нарушениями, такими как бессонница и депрессия. Для изучения хронической нейропатической боли было разработано несколько моделей на животных, имитирующих повреждение периферических нервов; одной из наиболее широко используемых является модель одностороннего хронического сдавления седалищного нерва (CCI) по методу Беннетта и Се (1988)3 (Рисунок 1). В данной работе мы представляем метод проведения CCI и тестирования гиперчувствительности к боли.
CCI проводится под анестезией; седалищный нерв с одной стороны обнажают, сделав разрез кожи и рассекая соединительную ткань между поверхностной ягодичной и двуглавой мышцей бедра. Четыре лигатуры из хромированного кетгута накладывают вокруг седалищного нерва с интервалом 1 mm, затягивая их достаточно, чтобы ограничить, но не полностью прекратить кровоток в эпиневрии. Рану закрывают швами на мышцах и скобами на коже. Затем животному дают восстановиться после операции в течение 24 hrs перед началом тестирования на гиперчувствительность к боли.
Для поведенческого тестирования крыс помещают в тестирующее устройство, давая им привыкнуть к процедуре тестирования. Тестируемой областью является срединная подошвенная поверхность задней лапы (Рисунок 2), которая входит в зону иннервации седалищного нерва. Порог механического отдергивания оценивают путем механического воздействия на обе задние лапы (поврежденную и неповрежденную) с помощью электронного динамического подошвенного эстезиометра von Frey или ручных волокон von Frey4. Порогом механического отдергивания является максимальное приложенное давление (в граммах), вызывающее отдергивание лапы. Для измерения латентности термического отдергивания, впервые описанного Hargreaves et al (1988), заднюю лапу подвергают воздействию луча инфракрасного излучения через прозрачную стеклянную поверхность с помощью прибора для измерения подошвенной анальгезии5,6. Латентность отдергивания в ответ на тепловой стимул регистрируется как время отдергивания лапы как для поврежденной, так и для неповрежденной задней лапы. После CCI порог механического отдергивания, а также латентность термического отдергивания в поврежденной лапе значительно снижаются по сравнению с исходными показателями и неповрежденной лапой (Рисунок 3). Модель повреждения периферического нерва CCI в сочетании с тестами на гиперчувствительность к боли представляет собой модельную систему для исследования эффективности потенциальных терапевтических средств по модификации хронической нейропатической боли. В нашей лаборатории мы используем CCI совместно с оценкой термической и механической чувствительности задних лап для изучения роли нейроиммунных взаимодействий в патогенезе и лечении нейропатической боли.
Протокол
1. Седалищного нерва Хронический Сужение
Асептические методы должны быть использованы для хирургического вмешательства. Лечить хирургического рабочую поверхность на 70% этанола и заранее подготовить стерильные инструменты (например, штраф ножницы, щипцы, и втягивающим), сетки, скобы и тампоны в автоклаве. Для нескольких операций, очистки и resterilise инструментов с 70% этанола или сухой шарик стерилизатор между крысами. Хирургические маски, волосы капот и стерильные перчатки.
Для сжатия нерва, подготовка шва хромовой кишечника, сокращая его на мелкие кусочки около 3 см в длину погружения в стерильный физиологич....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Торгово-промышленная палата является широко используемой модели периферического нерва хронической нейропатической боли. Это относительно простая для выполнения, а также производит надежные и стабильные боль гиперчувствительности, по крайней мере одного месяца после травмы. После ТПП, крысы обладают ненормальное положение потерпевшего hindpaw (пальцы удерживаются вместе и согнуты подошвенные, и лапа выворачивается), а также повторные встряхивания, охраны и лизать потерпевшего hindpaw предположить наличие спонтанной боли .......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Эксперименты на животных были утверждены уход животных и Комитет по этике из Университета Нового Южного Уэльса, Австралия, и в соответствии с руководящими выданный Международной ассоциации по изучению боли.
Благодарности
Авторы хотели бы отметить оригинальное описание модели ТПП Беннетта и Се (1988).
Эта работа была частично поддержана грантами от национального здравоохранения и медицинских исследований Совета Австралии (ID # 568637) и Управлением по науке Нового Южного Уэльса и медицинских исследований по Гринвичу.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Название реагента / оборудование | Компания | Номер по каталогу | Комментарии |
| Хромовой кишки | Ethicon | G-211 | 4-0 толщиной |
| Изофлюран | Delvet Пти ООО, Seven Hills, NSW | н / д | |
| Mersilk | Ethicon | W-580 | 5-0 толщиной |
| Autoclip | Becton Dickinson | 427631 | 9 мм из нержавеющей стали |
| Riodine | Орион | R1000802F | 1% вес / объем йода |
| Тепловая подошвенной инструмент обезболивания | Ugo Basile | 37370 | |
| Динамический подошвенной aesthesiometer | Уго ВасилийE | 37400 |
Ссылки
- Bouhassira, D., Lanteri-Minet, M., Attal, N., Laurent, B., Touboul, C. Prevalence of chronic pain with neuropathic characteristics in the general population. Pain. 136, 380-387 (2008).
- Toth, C., Lander, J., Wiebe, S. The prevalence and impact of ....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
