Method Article

דגם דג זברה של סוכרת וזכרון מטבולית

DOI:

10.3791/50232

⸱

February 28th, 2013

 ,  , 
1Dr. William M. Scholl College of Podiatric Medicine, Rosalind Franklin University of Medicine and Science, 2Chicago Medical School, Rosalind Franklin University of Medicine and Science

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

זכרון מטבולית הוא התופעה שמתרחשת סיבוכי סוכרת להתמיד ולהתקדם ללא הפרעה גם לאחר euglycemia מושגת pharmaceutically. כאן אנו מתארים מודל סוכרת דג זברה שהוא ייחודי בכך שהיא מאפשרת בדיקה של רכיבי epigenetic mitotically המסירים של זיכרון מטבולים In vivo.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הסוכרת משפיעה כיום 346,000,000 אנשים וזה צפוי להגדיל עד 400 מ'עד 2030. ראיות מהמעבדה והן בניסויים קליניים בקנה מידה גדולים גילו כי התקדמות סיבוכי סוכרת ללא הפרעה דרך התופעה של זיכרון מהטבולים גם כאשר שליטה הגליקמית מושגת pharmaceutically. ביטוי גנים יכול להשתנות ביציבות באמצעות שינויי epigenetic שלא רק מאפשרים לתאים ואורגניזמים כדי להגיב במהירות לשינויים בגירויים סביבתיים, אלא גם העניק לו את היכולת של התא כדי "לזכור" מפגשים אלו פעם הגירוי מוסר. ככזה, את התפקידים שמנגנונים אלה לשחק בתופעת הזיכרון מהטבולים כעת, נבדקים.

יש לנו דיווח לאחרונה הפיתוח של מודל דג זברה מסוג אני סוכרת ומאופיינת במודל זה כדי להראות שדג זברה הסוכרתי להציג את הסיבוכים מהשניים הידועים, כולל שינויים הקשורים לא רקעם רטינופתיה סוכרתית, נפרופתיה סוכרתית וריפוי פצעים לקוי אלא גם תערוכת התחדשות סנפיר זנב נפגע. מודל זה הוא ייחודי בכך שדג הזברה הוא מסוגל להתחדש הלבלב הפגוע שלה ולשקם את מדינת euglycemic דומה למה שניתן היה לצפות בחולים אנושיים שלאחר ההשתלה. יתר על כן, סבבים רבים של קטיעת סנפיר זנב לאפשר הפרדה ומחקר על השפעות epigenetic טהורות במערכת vivo ללא גורמי סיבוך פוטנציאליים מהמצב הסוכרתי הקודם. למרות euglycemia מושגת בעקבות התחדשות לבלב, הסיבוך מהשני של התחדשות הסוכרתית סנפיר וריפוי פצעי עור נמשך ללא הגבלה זמן. במקרה של התחדשות סנפיר לקויה, פתולוגיה זו נשמרה גם לאחר סבבים רבים של התחדשות סנפיר ברקמות הסנפיר בת. תצפיות אלו מצביעות על תהליך epigenetic בסיסי הקיים במדינת הזיכרון מהטבולים. כאן אנו מציגים את השיטות הדרושות להצלחת genקרוא את קבוצות זכרון סוכרת וחילוף חומרים של דגים ולדון ביתרונות של מודל זה.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

סוכרת (DM) היא בעיה בריאותית רצינית, וצמיחתו, שגורם לקיצור תוחלת חיים בשל כלי דם מחלה ספציפיים (רטינופתיה, נפרופתיה, נוירופתיה ריפוי, ליקוי פצע) וmacrovascular (מחלות לב ושבץ) סיבוכים 1. סיבוכי סוכרת, ברגע שיזמו ממשיכים להתקדם ללא הפרעה גם כאשר שליטה הגליקמית מושגת 2,3 ותופעה זו זכתה לכינוי זיכרון מטבולים או השפעת המורשת. נוכחותה של תופעה זו הוכרה קלינית בתחילת 1990 כ" לשלוט בסוכרת וסיבוכי המשפט (DCCT) "התקדם ומאז כבר נתמך על ידי ניסויים קליניים נוספים מרובים 4,5,6,7,8,9,10, 11,12,13,14. מודלים של בעלי חיים של DM היו קריטיים לתגליות הקשורים לפיזיולוגית פתים-של סיבוכי סוכרת וזיכרון מטבולים. למעשה....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל ההליכים מתבצעים בעקבות ההנחיות המתוארות ב" עקרונות טיפול בבעלי חי מעבדה "(המכונים הלאומיים לבריאות אין פרסום. 85-23, מתוקן 1985) והטיפוח אושר רוזלינד פרנקלין האוניברסיטה המוסדי בעלי החיים והשתמשו ועדת חית פרוטוקול 08-19.

יש 2 קיצורים חשובים המשמשים בכתב היד הזה. 1) DM: מתייחס לדגים שנמצאים באקוטית (300 מ"ג / ד"ל) מדינת hyperglycemic והיו לפחות 3 שבועות. 2) MM: מתייחס לדגים שהיו 21 יום (ראה פרוטוקול) דגי DM ואפשרו לשחזר שליטה הגליקמית באמצעות התחדשות לבלב. זו מושגת בתוך (14) ימים של הסרת תרופה. הדגים נחשבים דגי MM מנקודה זו ואילך. כמו כן, חשוב לציין כי דגים ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הקלד דג זברה סוכרתי לא רק להציג את הסיבוכים משניים הידועים של רטינופתיה ונפרופתיה, אלא גם, מפגין סיבוך נוסף: התחדשות סנפיר זנב לקויה. סיבוך מאוחר יותר זה נמשך בשל זיכרון מטבולים בדגים ששוחזרו בקרת סוכר נורמלית לאחר תקופת hyperglycemic. באיור 2 א (שליטה) והתרשים 2B (זיכרון מטבולים) תמונות מייצגות של סנפירים מתחדשים שנלכדו בפוסט קטיעת 72 שעות מוצגים. הגירעון ניתן לכמת וכפי שמוצג באיור 2C DM וMM דג הזברה מציג גירעון של כ 40% ב 72 שעו.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

סוכרת היא מחלה של חוסר ויסות חילוף חומרים, אובחנה בתחילה כיפרגליקמיה, שסופו של דבר גורמת לניזק כלי דם שמוביל לסיבוכים רבים שנמשכים גם לאחר כל euglycemia המושגת למרות התערבות תרופות. התמדה זה של סיבוכים המכונית זיכרון מטבולים וכמה מחקרים שנערכו לאחרונה בחנו את התפקיד שמנגנוני epigenetic לשחק בתופעה זו. כאן יש לנו מפורט בפרוטוקול המאפשר לדור של שתי סוכרתיים חריפים ודג זברת זיכרון מטבולים (גלוקוז שליטה שוחזרה). אנחנו עוד תארנו את המתודולוגיה שיכולה להיות מועסקות על מנת להפריד בין תרו.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אין ניגודי האינטרסים הכריזו.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עבודה זו נתמכה על ידי מענק מחקר של קרן משפחת איאקוקה, רוזלינד פרנקלין האוניברסיטה הזנק כספים, והמכונים הלאומיים לבריאות גרנט DK092721 הלאומי (לRVI). המחברים מבקשים להודות לניקי Intine לסיוע בהכנת כתב יד.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
שם המגיב חברה מספר קטלוגים תגובות (אופציונלי)
Streptozocin סיגמה אולדריץ S0130
2 phenoxyethanol סיגמה אולדריץ P1126
אזמל (גודל 10) הפישר סיינטיפיק 089275A
צלחות פטרי הפישר סיינטיפיק 08-757-13
½ מזרק סמ"ק, עם מחט מד 27 1/2 הפישר סיינטיפיק 305620
QuantiChrome glucערכת בדיקת OSE. מערכות מבדק DIGL-100
כלוריד הנתרן סיגמה אולדריץ S3014
ביתור מיקרוסקופ ניקון TMZ-1500 כל מיקרוסקופ לנתח הוא בסדר גמור.
מצלמה להדמיה ניקון Q הדמיה כל המצלמה מתאימה.
תמונת J תוכנה המכונים הלאומיים לבריאות NIH תמונה
אלמנטי ש"ח ניקון כל תוכנת ההדמיה מתאימה.

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Brownlee, M. The pathobiology of diabetic complications: a unifying mechanism. Diabetes. 54, 1615-1625 (2005).
  2. Ihnat, M. A., Thorpe, J. E., et al. Reactive oxygen species mediate a cellular 'memory' of high glucose stress signalling. Diabetologia

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Zebrafish Diabetes ModelMetabolic MemorySTZ InjectionFasting Blood GlucoseCaudal Fin AmputationFin Regeneration AssayPancreas RegenerationHyperglycemia InductionEpigenetic ModificationsDiabetic Complications

Related Articles