מודל עכברי של ריפוי פצע עורי שניתן להשתמש כדי להעריך את התרכובות טיפוליות בהגדרות פיסיולוגיות וpathophysiological.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
במאמר זה
סיכום
תקציר
ריפוי פצע ותיקון הם התהליכים הביולוגיים המורכבים ביותר המתרחשים בחיי אדם. לאחר פציעה, מסלולים ביולוגיים רבים להיות מופעלים. ריפוי פצעים לקוי, אשר מתרחש בחולי סוכרת לדוגמה, יכול להוביל לתוצאות חמורות שליליות כגון קטיעה. יש, אם כן, תמריץ להגדיל לפתח סוכני רומן המקדמים תיקון פצע. הבדיקות אלה היו מוגבלות למודלים של בעלי חיים גדולים כמו חזירים, שהם לעתים קרובות לא מעשיים. עכברים מייצגים את המודל האידיאלי קליני, כפי שהם חסכוני ונוחים למניפולציה גנטית, המאפשרת לחקירת מכניסטית. עם זאת, ריפוי פצעים בעכבר הוא שונה בהמהות לזה של בני אדם כפי שהוא מתרחש בעיקר דרך הצמצום. המודל העכברי שלנו מתגבר על זה על ידי שילוב של קיבוע באזור הפצע. על ידי קיבוע הפצע, תהליך התיקון הוא לאחר מכן תלוי באפיתליזציה, התרבות תאים ואנגיוגנזה, אשר משקפות באופן הדוקתהליכים ביולוגיים של ריפוי פצע אדם. בעוד הדורש עקביות וטיפול, מודל עכברי זה אינו כרוך בטכניקות כירורגיות מסובכות ומאפשר בדיקות חזקות של חומר מבטיח שעשויים, למשל, לקדם או לעכב אנגיוגנזה דלקת. יתר על כן, כל עכבר פועל כשליטה שלה כמו שני פצעים מוכנים, מה שמאפשר את היישום של שניהם במתחם ומבחן השליטה ברכב באותו בעל חיים. לסיכום, אנו מדגימים מודל מעשי, קל ללמוד, וחזק של ריפוי הפצע, שהיא דומה לזו של בני אדם.
מבוא
ריפוי פצע לקוי אחראי לתחלואה ותמותה בעולם משמעותית, זה נכון במיוחד עבור הסובלים מסוכרת 1,2. בבני אדם, ריפוי פצע הוא רצף של תהליכים, שבו יש חפיפה משמעותית 3. מייד התהליכים דלקתיים, פציעה הבאות הם יזמו. תאים דלקתיים לשחרר גורמים המעודדים את התהליכים של תא התפשטות, הגירה ואנגיוגנזה. לאחר היווצרות רקמה חדשה epithelialization מחדש ויש שלב של שיפוץ שכרוך גם אפופטוזיס וארגון מחדש של חלבוני מטריצה כגון קולגן.
המורכבות של ריפוי פצע לא יכולות כרגע להיות משוכפלת במבחנה וזה מחייב שימוש במודלים של בעלי חיים. נכון להיום, לימודי ריפוי פצעים ה....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
1. הכנת סדים ותחבושות occlusive
- מדורג 10 מ"מ חוגים ביריעות סיליקון בעובי 0.5 מ"מ ומספריים שימוש או ביופסיה כדי ליצור דיסקי סיליקון.
- מרכז מ"מ ביופסיה 5 באמצע מעגל 10 מ"מ ולחץ בחוזקה כדי ליצור חור ליצירת "סופגנייה", כמו דיסק שישמש כסד.
- מדורג 10 מ"מ על עיגולים שקוף הלבשה אוטמת כגון Opsite ומספריים להשתמש כדי ליצור תחבושות מעגליות.
2. חיות ניסוי
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
עקומת סגירת פצע נקבעה על ידי חישוב הקוטר הממוצע של הפצע ולבטא את התוצאות באחוזים, כלומר 100 - (יום 0 קוטר / קוטר X יום). בניסוי זה מתחם טיפולי (או שליטה ברכב) יושם יומי לפצע. המתחם הטיפולי סגירת פצע מאוד מואצת (איור 3). חשוב לציין כי הסדים חייבים להישמר לתקופת הניסוי, כהסרת סדים תוביל להתכווצות פצע מהירה (איור 2 יח) ולסטות מהדפוס של ריפוי הפצע נצפה בבני אדם.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
זהו מודל עכברי ניסויי של ריפוי פצע עורי. תכונה משמעותית של מודל זה היא השימוש בסדי סיליקון כדי למנוע התכווצות פצע כך שהיווצרות הרקמה חדשה epithelialization מחדש ועלול להתרחש, מה שהופך אותו דומה לתהליך המתרחש בבני אדם. מודל זה הוא תכליתי וניתן להשתמש בו כדי להעריך את ריפוי פצע (למשל בסוכרת) הגדרות הן פיסיולוגיות וpathophysiological. המודל עשוי לשמש גם כדי להעריך את פוטנציאל ריפוי פצע או הרפוי אנגיוגנזה בהגדרה חסכונית. עם כל עכבר מתנהג כמו שליטה משלו, מספרי בעלי החיים הם מז.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
המחברים אין לחשוף.
תודות
המחברים מבקשים להודות לתמיכת מימון הבריאות הלאומית והמועצה למחקר רפואי (NHMRC) של אוסטרליה (פרויקט גרנט ID: 632,512). לואיז דאן נתמכה על ידי מלגת קריירה מוקדמת NHMRC וכריסטינה Bursill על ידי מלגת קריירה קרן לב לאומית לפיתוח.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| יריעות סיליקון לחץ לאיטום בעובי 0.5 מ"מ | Invitrogen | P18178 | חתוך ל"סופגניות "בקוטר חיצוני של 1 ס"מ חיצוני, קוטר פנימי 0.5 ס"מ |
| אגרוף ביופסיה 5 מ"מ | Steifel | BC-B1-0500 | כדי לתאר את אזור הפצע שיש לכרות |
| מספריים Vannas 8.5 ס"מ מעוקל | World Precision Instruments | 501232 | לחתך וכריתת פצע |
| Dumonte #7b מלקחיים, 11 ס"מ | World Precision Instruments | 501302 | לאחיזת העור בעת יצירת חתך וכריתת עור |
| מלקחיים של Graefe, משוננים 10 ס"מ | World Precision Instruments | 14142 | כדי לסייע בהצמדת סד סיליקון לעור |
| מחזיק מחט, לסתות חלקות, מעוקלות, 12.5 ס"מ | World Precision Instruments | 14132 | |
| מלקחיים של Malis, חלקים, ישרים, 12 ס"מ | Codman and Shurtleff, Inc (J& המגבר; J) | 80-1500 | לתפירת טבעות הסיליקון לעור |
| סרגל, הדרגה של 0.5 מ"מ | n/a | ||
| קליפרים 0.25 מ"מ הדרגתיות | דאקוורת' וקנט | 9-653 | למדידת שטח הפצע |
| מול סרט דבק שקוף FlexiFix. 10 ס"מ x 1 מ | 'סמית & אחיין | 66030570 | |
| רימדיל (קרפרופן) | פייזר | 462986 |
מקורות
- Sen, C. K., et al. Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy. Wound Repair. 17, 763-771 (2009).
- Sen, C. K. Wound healing essentials: let there be oxygen. Wound Repair Regen. 17, 1-18 (2009).
- ....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
