يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

واسعة المجال المجهري نيون نيون قياس التدفق الخلوي والتصوير على الهاتف الخلوي

22.7K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/50451

⸱

أبريل 11, 2013

 , 

في هذه المقالة

ملخص

نستعرض نتائجنا الأخيرة على إدماج المجهر الفلورسنت وأدوات التصوير التدفق الخلوي على الهاتف الخلوي باستخدام المدمجة وفعالة من حيث التكلفة البصريات fluidic المرفقات. ويمكن لهذه الخلايا يعتمد الهاتف التحليل الجزئي الأجهزة تكون مفيدة لتحليل cytometric، مثل أداء المهام المختلفة عد الخلايا وكذلك لالفرز الفائق الإنتاجية من عينات المياه على سبيل المثال، في الأماكن ذات الموارد المحدودة.

الملخص

وتستخدم على نطاق واسع المجهر الفلورسنت والتدفق الخلوي الأدوات في البحوث الطبية الحيوية والتشخيص السريري. ولكن هذه الأجهزة هي في عامة ضخمة ومكلفة نسبيا، مما يجعلها أقل فعالية في إعدادات الموارد محدودة. يحتمل أن تكون لمعالجة هذه القيود، وقد أثبتنا في الآونة الأخيرة دمج واسعة المجال المجهري الفلورسنت وأدوات التصوير التدفق الخلوي على الهواتف المحمولة باستخدام، والتعاقد خفيفة الوزن، وفعالة من حيث التكلفة مرفقات البصريات fluidic. لدينا في تدفق تصميم الخلوي، يتم مسح الخلايا fluorescently المسمى من خلال قناة ميكروفلويديك أن يتم وضع فوق وحدة الكاميرا الموجودة على الهاتف الخلوي. بطارية تعمل بالطاقة الثنائيات الباعثة للضوء (المصابيح) هي بعقب جانب إلى جانب هذه الشريحة ميكروفلويديك، والذي يعمل بشكل فعال والدليل الموجي متعدد الأوضاع بلاطة، حيث يتم توجيه ضوء الإثارة لتثير موحدة الأهداف الفلورسنت. الكاميرا الهاتف الخلوي يسجل فيلم الفاصل الزمني للخلايا التي تتدفق من خلال الفلورسنتقناة ميكروفلويديك، حيث تتم معالجة الإطارات الرقمية من هذا الفيلم لحساب عدد الخلايا المسماة في حل الهدف من الفائدة. باستخدام مماثلة البصريات fluidic تصميم، يمكننا أيضا صورة هذه الخلايا fluorescently المسمى في وضع ثابت من الجزيئات مثل يقحم الفلورسنت بين الشرائح الزجاجية اثنين والتقاط الصور الخاصة بهم الفلورسنت باستخدام الكاميرا الهاتف الخلوي، والتي يمكن تحقيق حل المكاني للمثال ~ 10 ميكرومتر على مدى كبير جدا في الميدان نظرا ل-من عيار 81 ~ 2. هذا الهاتف الخلوي يقوم الفلورسنت التدفق الخلوي التصوير المجهري ومنهاج قد تكون مفيدة بشكل خاص في الأماكن ذات الموارد المحدودة، مثل العد من لCD4 + الخلايا التائية نحو رصد المرضى بفيروس نقص المناعة البشرية أو + للكشف عن الطفيليات المنقولة عن طريق المياه في مياه الشرب.

المقدمة

وتستخدم على نطاق واسع وتدفق الخلوي المجهر تقنيات 1-12 في البحوث الطبية الحيوية والعلمية وكذلك التشخيص السريري لفرز وتوصيف أنواع الخلايا المختلفة. ومع ذلك، المجاهر التقليدية والصكوك التدفق الخلوي معقدة نسبيا وباهظة الثمن، مما يحد من استخدامها للمختبرات راسخة أساسا المركزية. مؤخرا قمنا بتطوير مدمجة وخفيفة الوزن الخلوي التصوير المجهري الفلورسنت وجهاز متكامل على الهاتف الجوال، مما يدل على 13،14 وعد فعالية من حيث التكلفة ترجمة المجهر الفلورسنت، وتدفق الخلوي، وما يتصل بها من تقنيات التحليل الجزئي إلى البيئات ذات الموارد المحدودة لل تطبيقات الطب عن بعد المختلفة التي تؤثر الصحة العالمية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

في هذا القسم، ونحن نقدم البروتوكولات التجريبية لدينا الهاتف الخلوي المجهر واسعة المجال استنادا مضان 13 و البصريات fluidic منصة الخلوي التصوير 14. سوف نستخدم حبات الفلورسنت وfluorescently المسمى خلايا الدم البيضاء لاختبار هذه المنصات التصوير.

A. إعداد الهاتف الجوال استنادا اسعة المجال مجهر نيون وعلم البصريات fluidic قياس التدفق الخلوي التصوير

الهاتف الخلوي يقوم اسعة المجال المجهر الفلورسنت أو قياس التدفق الخلوي يتكون من جزأين أساسيين: كاميرا الهاتف المدمجة والبصريات fluidic ....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

مع fluidic-البصريات دينا ضخ / الإثارة مخطط (أرقام 1C و 1D)، يمكن خلايا fluorescently المسمى تسليمها باستمرار في قناة ميكروفلويديك باستخدام مضخة محقنة في حين أن الكاميرا الهاتف الخلوي يسجل الوقت الفاصل بين المجهري الفلورسنت الفيلم من الخلايا المتدفقة. ويمكن بعد هذه الأفلام يتم تحليلها بسرعة الفلورسنت باستخدام كفاف الكشف عن الخوارزميات وتتبع لتحديد تلقائيا 14،15 العدد المطلق وكثافة الخلايا التي تتدفق من خلال القنوات ميكروفلويديك، مع وظيفة.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

لقد قدمنا ​​نتائجنا الأخيرة على الهاتف الجوال يعتمد اسعة المجال المجهري الفلورسنت والبصريات fluidic التدفق الخلوي باستخدام التصوير خفيفة الوزن وصغيرة الحجم مرفقات البصريات fluidic لكاميرات الهاتف الخلوي. باستخدام هذه التكنولوجيا منصة تصوير الكائنات نحن الفلورسنت بما في ذلك الجزيئات المتناهية الصغر والمسماة خلايا الدم البيضاء في عينات الدم كله. ولذلك، وهذا قد الهاتف الخلوي على أساس التعاقد وفعالة من حيث التكلفة مجموعة أدوات التصوير الفلورسنت تكون مفيدة لنقطة من الرعاية والتشخيص، وخ.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

الدكتور أوزكان هو مؤسس شركة البدء التي تهدف إلى تسويق التصوير المجهري وأدوات حسابية.

شكر وتقدير

A. أوزكان بامتنان بدعم من جائزة رئاسية مبكرة شهادة للعلماء والمهندسين (PECASE)، الجيش بحوث مكتبية (ARO) جائزة الباحث الشاب، المؤسسة الوطنية للعلوم (NSF) جائزة الوظيفي، ومكتب البحوث البحرية (ONR) جائزة الباحث الشاب والمعاهد الوطنية للصحة (NIH) جائزة المدير الجديد المبتكر DP2OD006427 من مكتب المدير، المعاهد الوطنية للصحة.

....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
الهاتف الخليويسونيسوني إريكسون Aino
عدسة بلانو محدبةإدموند للبصريات# NT45-302
عدسة شبه كرويةThorlab# مرشح C230TME-A
Edmund Optics#NT54-46
Blue LEDDigikey# 365-1201-ND
BatteryDigikey#P032-ND
أنبوب البوليسترينفيشر العلمي# 05-408-129
عازلة تحلل خلايا الدم الحمراءSigma AldrichR7757
SYLGARD 184 مجموعة المطاط الصناعي المصنوعة من السيليكونداو كورنينج
حبات الفلورسنت الحمراء (10 & mu ؛ م)تقنياتالحياة#F8834
حبات الفلورسنت الخضراء (10 مو ؛ م)تقنيات الحياة#F8836
SYTO16 وضع العلامات الفلورية على الحمضLife Technologies# S7578
النووي

المراجع

  1. Sklar, L. A. Flow Cytometry for BioTechnology. , Oxford University Press Inc. (2005).
  2. Nunez, R. Flow cytometry for research scientists: principle and applications. , Horizon Press. Wymondham, UK. (2001).
  3. Mertz, J.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

المجهر الهاتفيملحق بصري-مائعيقناة مائعية دقيقةإثارة بمصباح LEDمجهر المجال الواسعحبيبات فلوريةخلايا الدم البيضاءنقطة الرعاية