אנו מתארים שיטה ליצירת מודל אמין של יתר לחץ דם ורידים במוח בעכבר הבוגר. מודל זה תואר בהרחבה ונבדק בחולדה. עמית החדש בעכברים פותח את האפשרות של שימוש בבעלי חיים מהונדסים גנטיים ובכך מרחיב את היישומים של המודל.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
למבוגרים עכבר ורידי יתר לחץ דם דגם: עורק תרדמה משותף לחיצוני הצוואר וריד השקה.
במאמר זה
סיכום
תקציר
ההבנה של הפתופיזיולוגיה של מומים arteriovenous מוח וfistulas arteriovenous השתפרה הודות למודלים של בעלי חיים. מודל חולדה יצירת פיסטולה מלאכותית בין עורק התרדמה המשותפת (CCA) ווריד הצוואר החיצוני (EJV) תואר בהרחבה והוכיח אפשרי מבחינה טכנית. מבנה זה מעורר יתר לחץ דם עולה בקנה אחד מוחין ורידים (CVH), ולכן סייע לומד את תרומתם של יתר לחץ דם ורידים להיווצרות, תסמינים קליניים, והפרוגנוזה של AVMs המוח וAVFs dural. מודלים בעכברים מקבילים תוארו רק בקושי והראו בעיות עם היצרות של פיסטולה. מודל עכברי הוקם יאפשר המחקר של הפתופיזיולוגיה לא רק, אלא גם טיפולים גנטיים למחלות כלי דם במוח פוטנציאליים אלה.
אנו מציגים מודל של פיסטולה arteriovenous שמייצר יתר לחץ דם ורידים תוך גולגולתי עמידה בעכבר. o השקה מייקרוf העכברית CCA וEJV יכולים להיות קשה בשל האנטומיה זעירה ולעתים קרובות לגרום לפיסטולה אינו פטנט. בפרוטוקול צעד-אחר-צעד זה אנו מטפלים בכל האתגרים החשובים נתקלו במהלך הליך זה. הימנעות הכחשה מופרזת של הווריד במהלך החשיפה, באמצעות 11-0 תפרים במקום 10-0, ומה שהופך את השקה קצה לצד מתוכננת בקפידה כמה שלבים הקריטיים. למרות ששיטה זו דורשת מיומנות מייקרו מתקדמת ועקומה למידה ארוכה יותר ששווה הערך בחולדה, זה יכול להיות מפותח באופן עקבי.
מודל חדשני זה תוכנן לשלב טכניקות עכבר מהונדסים עם מערכת ניסיונית בעבר ומבוסס שהוכיחה שימושי ללמוד AVMs המוח וAVFs dural. על ידי פתיחת האפשרות של שימוש בעכברים הטרנסגניים, ספקטרום רחב יותר של דגמים תקפים ניתן להשיג והוא יכול להיות גם נבדקו טיפולים גנטיים. המבנה הניסיוני גם יכול להיות מותאם בהמשך למחקר של otמחלות כלי דם במוח הקשורים עם יתר לחץ דם ורידים כגון מיגרנה, אמנזיה הגלובלית חולפת, עיוורון משקפת חולף, וכו '
מבוא
מודלים של בעלי החיים של יתר לחץ דם ורידי המוח הוכיחו להיות כלי מרכזי בהבנת הפתופיזיולוגיה של מומים arteriovenous מוח וfistulas arteriovenous 1-7. שימוש נרחב ביותר הוא מודל העכברים שנוצר באמצעות פיסטולה מלאכותית בין עורק התרדמה המשותפת (CCA) ווריד הצוואר החיצוני (EJV), אשר מעורר יתר לחץ דם ורידים במוח עולה בקנה אחד (CVH) בחולדה 1,8-10. מודלים בעכברים שווי ערך, על ידי פתיחת האפשרות לשימוש בזני עכברים הטרנסגניים שונים, יאפשר מחקר נוסף על הפתופיזיולוגיה לא רק, אלא גם טיפולים גנטיים למחלות כלי דם במוח פוטנציאליים אלה. יתר על כן, המבנה הניסיוני יכול גם להיות מותאם בהמשך למחקר של מחלות כלי דם במוח אחרות הקשורים ע....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
1. הכנת העכבר
- לגרום להרדמה כללית בעכבר עם גז isoflurane. להזריק 0.15 מיליליטר של brupenorphine intraperitoneal לניהול כאב. לפני שימשיך, לבדוק אם רמת ההרדמה היא משביעה רצון על ידי לדקור כפות של העכבר.
- שים את העכבר שכיבה על גב עם ארבעה הגפיים קבועים על ידי דבק. להסיר את השיער של הצוואר וחזה העליון עם מספריים. באמצעות הזרקה תת עורית, לנהל .2-0.4 מיליליטר של תמיסת מלח 0.9% כדי לשמור על עכבר התייבשות במהלך ההליך הכירורגי.
- הכן את שדה הניתוח הבא ש....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
תוצאה מוצלחת של המודל היא פיסטולה arteriovenous פטנט שגורמת יתר לחץ דם ורידים במוח העכברי. כדי לאמת את המודל שנמדדנו לראשונה הלחץ תוך גולגולתי בורידי סינוס sagital של העכברים ב 2, 3 ו -4 שבועות לאחר ניתוח. 6 עכברים אחרים מונו לכל קבוצת זמן. לחץ סינוס היה 8.8 ± 1.2 מ"מ כספית בקבוצה נמדד שבועיים לאחר הניתוח. בעכברים 6 נמדדו 3 שבועות לאחר הניתוח, לחץ סינוס היה 4.7 ± 1.4 מ"מ כספית. לבסוף, 6 העכברים נמדדו 4 שבועות לאחר הניתוח היה לחץ הסינוס של 3.9 ± 0.6 מ"מ כספית
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
יתר לחץ דם ורידים במוח שנגרם כבר קשור באופן הדוק עם ביטויים קליניים חמורים יותר ופרוגנוזה גרועה בחולים עם AVFs dural וAVMs המוח 3. תופעות אלה של CVH נחקרו בהרחבה במודלים של עכברים 1,2,8. מודל מקביל בעכבר יאפשר את השימוש בבעלי החיים מהונדסים גנטי שסופו של דבר יאפשר הניתוח של מסלולים מולקולריים המעורבים בפתוגנזה של יתר לחץ דם ורידים ומערכת היחסים שלה עם AVF dural וAVM המוח.
כאן, אנו מדווחים על.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
הפרוצדורות עם חיות מעבדה אושרו על ידי הוועדה המוסדית הטיפול בבעלי חיים ושימוש באוניברסיטה קליפורניה, סן פרנסיסקו (UCSF).
אי לנו פוטנציאל לניגודי עניינים הנוגעים לתרופות וחומרים המשמשים בהליך זה.
תודות
פרויקט זה נתמך בחלקו על ידי NIH T32 GM008440 לאספן ווקר, R01 NS27713 לוויליאם L.Young, NS44155 P01 לוויליאם L.Young והואה סו, R21 NS070153 להואה SU ועל ידי איגוד לב האמריקאי AHA 10GRNT3130004 להואה סו. ד"ר אנה רודריגז-הרננדז נתמך על ידי מענק מ" Obra החברתי La Caixa "
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| 10-0 מיקרו-תפר סטרילי Arosurgical | IC. | ||
| VT5A010Q10 11-0 מיקרו-תפר סטרילי | ארוכירורגי IC | VT4A00N07 | |
| DUROTIP מספריים | Aesculap | BC210R | |
| מיקרו-אדסון רקמות מלקחיים | Aesculap | BD510R | |
| מיקרו מספריים | Aesculap | OC496R | |
| מיקרו מלקחיים #5 תכשיטנים | Aesculap | BD331R | |
| זוויתי תכשיטנים מלקחיים | Aesculap | BD329R | |
| מלקחיים מיקרו תפרים | Aesculap | BD338R | |
| מחזיק מחט DUROGRIP | Aesculap | BM009R |
מקורות
- Bederson, J. B., Wiestler, O. D., Brüstle, O., Roth, P., Frick, R., Yaşargil, M. G. Intracranial venous hypertension and the effects of venous outflow obstruction in a rat model of arteriovenous fistula. Neurosurgery. 29, 341-350 (1991).
- Gao, P., Zhu, Y., Ling, F., Shen, F., Lee, B., Gabriel, R. A., Hao, Q., Yang, G. Y., Su, H., Young, W. L.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
