Мы опишем метод для создания надежной модели церебральной венозной гипертензии у взрослых мышей. Эта модель была широко описаны и испытаны на крысах. Этот новый коллега в мышей открывает возможность использования генетически модифицированных животных, и тем самым расширяет применение модели.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Взрослой мыши венозной гипертензии Модель: общие сонные артерии наружной яремной вены анастомоза.
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Понимание патофизиологии головного мозга артериовенозных мальформаций и артериовенозных свищей улучшилось благодаря животных моделях. Крыса модель создания искусственного свища между общей сонной артерии (ОСА) и наружной яремной вены (EJV) была широко описаны и доказал технически осуществимо. Эта конструкция вызывает последовательную мозговой венозной гипертензии (ХВГ), и, следовательно, помог изучения вклада венозной гипертензии в формирование, клинических симптомов и прогноза АВМ головного мозга и твердой мозговой оболочки АВФ. Эквивалентные модели мышей были только едва описано и показано проблемы со стенозом свища. Создан мышиной модели позволит изучение не только патофизиологии, но и потенциальные генетические методы лечения для этих цереброваскулярных заболеваний.
Мы представляем модель артериовенозной фистулы, который производит прочного внутричерепного венозной гипертензии у мышей. Микрохирургическая анастомоза оF мышиного CCA и EJV может быть затруднено из-за крошечного анатомии и часто приводит к непатентной свища. В этом протоколе шаг за шагом мы обращаемся все важные проблемы, возникшие в ходе этой процедуры. Как избежать чрезмерного втягивания вены во время экспозиции, используя 11-0 швов вместо 10-0, и делает тщательно спланированную анастомоз конец-в-бок некоторые из важных шагов. Хотя этот метод требует дополнительные микрохирургических навыков и более длительный процесс обучения, что эквивалентно у крыс, он может быть последовательно разработано.
Эта модель роман был разработан для интеграции трансгенных методов мышь с ранее хорошо зарекомендовавших экспериментальной системы, которая оказалась полезной для изучения АВМ головного мозга и дюралевые АВФ. При открытии возможности использования трансгенных мышей, более широкий спектр действующих моделей может быть достигнуто и генетические процедуры также может быть проверена. Экспериментальная конструкция также может быть дополнительно приспособлен к изучению OTее цереброваскулярные заболевания, связанные с венозной гипертензии, такие как мигрень, переходных глобальной амнезии, преходящей монокуляр слепоты и т.д.
Введение
Животные модели головного венозной гипертензии оказались основным инструментом в понимании патофизиологии головного мозга артериовенозных мальформаций и артериовенозных свищей 1-7. Наиболее широко используется крыса модель, созданная с помощью искусственного свища между общей сонной артерии (ОСА) и наружной яремной вены (EJV), что провоцирует постоянный мозговой венозной гипертензии (ХВГ) у крыс 1,8-10. Эквивалентные модели мышей, открывая возможность использования различных штаммов трансгенных мышей, позволит в дальнейшем изучении на не только патофизиологии, но и потенциальных генетических методов лечения этих цереброваскулярных заболеваний. К....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
1. Подготовка мыши
- Общей анестезии у мышей с изофлуран газа. Вводите 0,15 мл внутрибрюшинно brupenorphine для управления болью. Прежде чем продолжить, убедитесь, что уровень анестезии является удовлетворительным помощью укола лапы мыши.
- Положите мышь в спинной лежачее положение с четырех конечностей фиксированных скотчем. Удалить волосы на шее и верхней части груди с помощью ножниц. Via подкожной инъекции, управлять 0,2-0,4 мл 0,9% физиологического раствора, чтобы держать мышь увлажненной во время хирургической процедуры.
- Подготовка операционного поля после строгой стерильной метода. Площадь кожного разреза должна быть очищена с 90% -ны....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Успешный исход этой модели является патент артериовенозная фистула, что вызывает венозной гипертензии в мышиной мозга. Для проверки модели мы первоначально измерили внутричерепное венозное давление в сагиттальной пазухи мышей на 2, 3 и 4 недель после операции. 6 различных мышей присваивается каждой рабочей группы. Давление пазухи было 8,8 ± 1,2 мм рт.ст. в группе измеряют две недели после операции. В 6 мышей, измеренных через 3 недели после операции, давление синуса было 4,7 ± 1,4 мм рт. Наконец, 6 мышей измеряли 4 неде.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Устойчивый головного мозга венозная гипертензия была тесно связана с более тяжелыми клиническими проявлениями и плохим прогнозом у пациентов с твердой мозговой оболочки АВФ и головного мозга АВМ 3. Эти эффекты CVH были широко изучены в моделях крыс 1,2,8. Эквивалентная модель на мышах позволили бы использование генетически модифицированных животных, которые в конечном итоге позволит анализ молекулярных путей, участвующих в патогенезе венозной гипертензии и ее отношений с твердой мозговой АВФ и АВМ .......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Экспериментальные методики с лабораторными животными были одобрены уходу и использованию комитета Институциональная животных из Университета Калифорнии, Сан-Франциско (UCSF) на.
Авторы не имеют никаких потенциальных конфликтов интересов, связанных с наркотиками и материалов, используемых в этой процедуре.
Благодарности
Этот проект частично поддержана NIH T32 GM008440 к Эспен Уокер, R01 NS27713 Уильяму L.Young, P01 NS44155 Уильяму L.Young и Хуа Су, R21 NS070153 Хуа SU и американской ассоциации сердца AHA 10GRNT3130004 Хуа Су. Д-р Ана Родригес-Эрнандес поддерживается за счет гранта "Обра социального La Caixa"
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 10-0 Стерильный микрошовный материал | Arosurgical Ic. | ||
| 11-0 Стерильный микрошовный материал | Arosurgical Ic | VT4A00N07 | |
| ножницы DUROTIP | Aesculap | BC210R | |
| Микро-адсон Щипцы для тканей | Aesculap | BD510R | |
| Микроножницы | Aesculap | OC496R | |
| Микрощипцы #5 Jewelers | Aesculap | BD331R | |
| Угловой Ювелирные щипцы | Aesculap | BD329R | |
| Щипцы для микрошвов | Aesculap | BD338R | |
| DUROGRIP Иглодержатель | Aesculap | BM009R |
Ссылки
- Bederson, J. B., Wiestler, O. D., Brüstle, O., Roth, P., Frick, R., Yaşargil, M. G. Intracranial venous hypertension and the effects of venous outflow obstruction in a rat model of arteriovenous fistula. Neurosurgery. 29, 341-350 (1991).
- Gao, P., Zhu, Y., Ling, F., Shen, F., Lee, B., Gabriel, R. A., Hao, Q., Yang, G. Y., Su, H., Young, W. L.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
