Schwangerschaft führt zu signifikanten Änderungen der Fettsäurezusammensetzung von mütterlichem Gewebe. Lipid-Profile können über Gaschromatographie erhalten werden, damit die Identifizierung und Quantifizierung von Fettsäuren in den einzelnen Lipidklassen unter Ratten während der Schwangerschaft zugeführt verschiedenen Hoch-und fettarme Ernährung.
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Methodenartikel
Der Einsatz von Gas-Chromatographie zu Änderungen der Zusammensetzung der Fettsäuren in Rattenlebergewebe während der Schwangerschaft Analysieren
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Gaschromatographie (GC) ist ein auf Basis von Geweben, Zellen und Plasma / Serum zu identifizieren und die Fettsäuren der Lipide, wodurch Ergebnisse mit hoher Genauigkeit und hoher Reproduzierbarkeit hochempfindliche Methode. Im Stoffwechsel-und Ernährungsstudien ermöglicht GC Beurteilung von Änderungen der Fettsäure-Konzentrationen nach Eingriffen oder bei Veränderungen in physiologischen Zustand wie Schwangerschaft. Festphasenextraktion (SPE) mit Aminopropyl-Silicakartuschen ermöglicht die Trennung der Hauptlipidklassen, einschließlich Triglyceride, verschiedene Phospholipide, und Cholesterylester (CE). GC in Kombination mit SPE wurde verwendet, um die Änderungen in der Fettsäurezusammensetzung der CE-Fraktion in der Leber von Jungfrau und trächtige Ratten, die verschiedenen Hoch-und fettarme Ernährung zugeführt hatte zu analysieren. Es gibt signifikante Diät / Schwangerschaft Wechselwirkungen auf die Omega-3 und Omega-6-Fettsäuren von Leber CE, das anzeigt, dass schwangere Frauen eine unterschiedliche Reaktion auf Nahrungs MANIPULATIonen, als unter den jungfräulichen Weibchen gesehen.
Einleitung
Gaschromatographie (GC) ist eine gut etablierte Technik, die zur Nahrungsergänzung bei oder physiologischen Bedingungen, wie Fettsucht (und verwandten Krankheiten wie Diabetes) oder Schwangerschaft 3 in Lipidpools und Zellmembranen 1,2 Identifizierung und Quantifizierung des Einbaus von Fettsäuren - 5. Es ist auch für die Analyse der Art und Menge der Fette in Lebensmitteln. Dies ist nützlich bei der Charakterisierung von Versuchsdiäten, sowie die Gewährleistung, dass die Lebensmittelindustrie erfüllt die Norm. Zum Beispiel kann GC verwendet werden, um die Identität und Menge der Fettsäuren in einem Produkt, wie ein Nahrungsergänzungs....
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Protokoll
1. Tierverfahren
- Alle Tier Arbeiten sollten in Übereinstimmung mit den Home Office Tiere (Scientific Procedures) Act (1986) durchgeführt werden.
- Mate-Wistar-Ratten im Alter von 10 Wochen alt von monogamen Zucht, und bestätigen Schwangerschaft durch das Auftreten einer vaginalen Stecker. Nehmen Sie dies als ein Tag der Trächtigkeit und beginnen experimentelle Ernährung. Für jungfräulichen Weibchen, jedes Haus individuell Ratte, und beginnen experimentelle Ernährung.
- Nach Fütterung der Versuchsdiäten für 20 Tage einschläfern Ratten durch CO 2-Erstickung durch Genickbruch folgte.
- Verwenden Dissektion Pinzette und Scher....
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Ergebnisse
Der Erfolg dieser Methode hängt von genau nach dem Protokoll und auf die saubere Lösemittel und Reagenzien, um "Lärm" und Verunreinigungen, die auf einem Chromatogramm erscheinen können reduzieren. Kontaminierten Proben sind schwieriger zu analysieren, eine Senkung der Genauigkeit der Fläche unter der Kurve Berechnungen. Wenn das Protokoll erfolgreich ein Chromatogramm mit klaren symmetrischen, gut definierte Höhen und mit minimalem Hintergrundgeräusche gefolgt sollten erhalten werden, wie in Abbildung.......
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Diskussion
Gas-Chromatographie ist eine genaue Technik, um für die Fettsäureanalyse zu verwenden, und die hohe Reproduzierbarkeit hält diese Technik für die klinische Analysen. Falls GC-Säulen verwendet werden, um die Identifizierung der Fettsäuren von Interesse zu ermöglichen, die verfügbaren Spalten mit Variationen in der Polarität der stationären Phase, Säulenlänge und Innendurchmesser. Die Verwendung einer Quarzglas-Kapillarsäule in dieser Analysemethode eine gute thermische Stabilität und eine hohe Reproduzierbarkeit der Rete.......
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Offenlegungen
Die Autoren erklären, keine finanziellen Interessen konkurrieren.
Danksagungen
Die Autoren möchten den Beitrag von Meritxell Romeu-Nadal in die Studie an Ratten bestätigen.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Methanol | Fisher Scientific | M/4056/17'VORSICHT | ' Dämpfe - |
| HPLC Chloroform | Fisher Scientific | C/4966/17'VORSICHT | ' Dämpfe - HPLC Grade |
| BHT | Sigma- Aldrich | W218405'VORSICHT' Staubdämpfe - wasserfrei | |
| NaCl | Sigma- Aldrich | S9888 | wasserfreies |
| Hexan | Fisher Scientific | H/0406/17'VORSICHT | ' Dämpfe - HPLC-Qualität |
| Eisessig | Sigma- Aldrich | 695084'VORSICHT' Verbrennungen - 99,85 | |
| Schwefelsäure | Sigma- Aldrich | 339741'VORSICHT' Verbrennungen - 99,999 | |
| Kaliumcarbonat | Sigma- Aldrich | 209619 | 99% |
| ACS Kaliumbicarbonat | Sigma- Aldrich | 237205 | 99,7 % ACS |
| Ethylacetat | Fisher Scientific | 10204340'CAUTION' Rauchgase - 99+% GLC SpeciFied Toluol | |
| Fisher Scientific | T/2300/15'CAUTION | ' Rauch | |
| Diethylether | Sigma- Aldrich | 309966'CAUTION' Rauch | |
| (sauerstofffrei) Zylinder | BOC | 44-w | "VORSICHT" Druckgas - Explosionsgefahr |
| Aminopropylkieselkie SPE-Kartuschen | Agilent | 12102014 | Kartusche - Raupenmasse 100 mg |
| Kieselgel SPE-Kartuschen | Agilent | 14102010 | Kartusche - Perlmasse 100 mg |
| Molekulare Seives | Sigma- Aldrich | 334324 | Pellets, AW-300, 1,6 mm |
| Glaspasteurpipetten | Fisher Scientific | FB50251 |
Referenzen
- Browning, L. M., et al. Incorporation of eicosapentaenoic and docosahexaenoic acids into lipid pools when given as supplements providing doses equivalent to typical intakes of oily fish. Am. J. Clin. Nutr. 96 (4), 748-758 (2012).
- Cao, J., Schwichtenberg, K. A., Hanson, N. Q., Tsai, M. Y.
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Nachdrucke und Genehmigungen
