우리는 쥐의 이종성 복부 심장-폐 이식(HAHLT)에 대한 새로운 기술을 설명합니다. 이식 구성은 부분적으로 로드된 이식편 순환을 초래하여 직접적인 기능 평가를 가능하게 합니다. 이 모델은 이식된 이식편의 기능 및 면역학적 상태에 대한 급성 또는 만성 연구에 사용될 수 있습니다.
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이 논문에서
요약
초록
여기에서는 쥐의 이종성 복부 심장-폐 이식(HAHLT)을 위한 새로운 기술에 대해 설명합니다. 이식 이식편의 구성에는 수혜자 IVC에 대한 기증자 하대정맥(IVC)의 문합 및 수혜자 복부 Ao에 대한 기증자 상행 대동맥(Ao)의 문합이 포함됩니다. 오른쪽 상부 및 중간 폐엽은 보존되어 있으며 오른쪽 심장에서 왼쪽 심장으로 혈류를 공급하는 도관 역할을 합니다.
이 기술을 사용하면 몇 가지 이점이 있으며 광범위한 응용 프로그램에 적합합니다. 이식편은 dyamic volume-loading을 허용하는 구성으로 이식되기 때문에 심장 기능을 in vivo에서 직접 평가할 수 있습니다. 압력-부피 컨덕턴스 카테터를 사용하면 하중 의존 및 하중 독립적인 혈역학적 매개변수의 특성화를 수행할 수 있습니다. 이식편은 수혜자의 하부 간 IVC에 클램프를 적용하여 로드된 구성으로 변환될 수 있습니다. 우리는 기증자와 수혜자 수술 모두를 위한 수정된 수술 기술과 이상적인 심근 보호 전략을 설명합니다. 실험 목적에 따라 이 모델은 이식편 기능, 면역학적 상태 및 다양한 심실 부하 상태에 대한 급성 및 만성 연구 모두에 사용하도록 조정될 수 있습니다. 이식된 폐로 가는 전도기도가 보존되어 급성 폐 재환기가 가능합니다. 이것은 이식편에 관상 동맥 관류를 제공하는 혼합 정맥 및 동맥 혈액의 영향에 대한 분석을 용이하게 합니다.
이 모델의 한계는 기술적 복잡성입니다. 새로운 작업자에게는 상당한 학습 곡선이 있으며, 이상적으로는 이 기술에 대한 멘토링을 받아야 합니다. 수술 훈련 배경은 이 모델을 적용하고자 하는 사람들에게 유리합니다. 복잡성에도 불구하고 우리는 모델을 명확하고 쉽게 적용할 수 있는 형식으로 제시하는 것을 목표로 합니다. 이 모델이 정소성 이식과 생리학적으로 유사하고 연구 응용 분야가 광범위하기 때문에 이 기술을 배우는 데 투자한 노력은 가치가 있을 것입니다.
서론
이소성 복부 심장 이식(haht)의 첫 번째 설치류 모델은 1964년 Abbott와 동료들에 의해 설명되었습니다1. 이 기술과 후속 수정은 이식 이식 기능 및 면역학적 상태를 특성화하기 위해 널리 적용되었습니다. 설명된 대부분의 HAHT 기법은 부피가 적재되지 않은 심장을 포함합니다2,3. 체적 부하가 걸린 심실을 포함하는 HAHT의 모델이 설명되었지만, 하나 이상의 측면에서 제한되는 경우가 많습니다.
부피가 가해진 좌심실(LV)을 동반한 이소성 복부 심장-폐 이식(HAHLT)에 대해 이전에 설명했습니다. 첸(Chen)과 그의 동료4, 그리고 그 후 이브라힘(Ibrahim)과 동료5는 단일 대동맥-대동맥(기증자가 수혜자 복부 대동맥으로 상승) 문합을 동반한 HAHLT를 설명했다. 이 순환에서 심실에 가해지는 유일한 부피 부하(volume load)는 관상동맥 정맥 복귀(coronary venous return)입니다. Asfour와 동료들은 기증자 폐동맥(PA)을 기증자 좌심방(LA)에 문합하여 폐 회로를 제거하는 HAHT 기술에 대해 설명했습니다6. 이 순환에서 우심실(RV)로의 정맥 유입은 기증자 SVC를 통해 수혜자 IVC 문합으로 발생하고....
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프로토콜
모든 동물은 보관과 전국 및 관리 및 실험 동물의 사용을위한 제도적 지침에 따라 마음에 든다고했다. 이 프로토콜에 대한 윤리 승인은 브리티시 컬럼비아의 동물 관리위원회의 대학에 의해 수여되었다. 300 사이 계량 남성, 흰쥐 - 450 g을이 프로토콜에 사용 하였다.
1. 기부자 운영
- 3 방향 스톱 콕 장거리 정맥 내 (IV) 카테터 튜브에 연결된 원통형 플라스크에 심정지 (RT)의 약 100 mL의 유무. 중력에 의해 심정지 전달을 가능하게 약 80cm 수술 표면 위의 플라스크를 상승 스탠드를 사용합니다.
- 적절하게 구조를 시각화하기 위해, 수술 돋보기 한 쌍 또는 해부 현미경 중 하나를 사용하십시오.
참고 : 우리는 현재 3.4 쌍안경 운영 현미경을 사용 - 21.3X 배율. - 마취 실에서 기증자를 놓고 4 마취 유도 - 5 %의 이소 플루 란을.
- 운영 플랫폼에 쥐를 전송하고 1 코 콘에 의해 마취 유지 - 2 % 이소 플루 란을. 건조를 방지하기 위해 동물의 눈에 수의사 연고를 적용합니다. 25 G 바늘과 미다 졸람 (2 ㎎ / ㎏) 내 복강을 관리합니다.
- 수술 가위를 사용하여, 하악에 조류 늑골의 검상 돌기에서 기증자를 면도. (이....
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결과
위에서 설명한 HAHLT 기술은 고도의 기술과 세부 사항입니다. 표에 세심한주의를 필요로 한 하이라이트 실패 절차 대 성공과 관련된 중요한 요소의 일부, 그리고 기술적 인 문제를 해결하기위한 가이드로 사용할 수 있습니다.
받는 사람 대동맥이 클램핑 해제 한 후, 이식 관상 동맥은 산소가 혈액으로 채우기 위해 볼 수 있어야합니다. 따라서, 심근는 핑크와 잘 관류가 될 것이다. 기술적으로 성공적인 실험에서 심장 이식 재관류 직후 이길 시작합니다. 기능 회복을 허용하기 위해 30 분 - 그래프트는 적어도 20의 기간 (IVC 수신자는 클램프로) 무부하 상태로 남아있을 것이다. 그 후, 그래프트의 하중 조건은 실험 목적에 맞게 변경 될 수있다. 원하는 그래프트 기능 (및 성공적인 결과)의 정량적 인 측정이 사용될 수있다. 프로토콜에서 언급 한 바와 같이, 생체 내 시험 관내 .......
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토론
여기에 설명 된 기술과 성공은 여러 가지 요인에 입각한다. 그 중 주요 균일 이식 냉각 완전한 심정지 체포, 총 허혈 시간을 최소화을 보장, 안전하고 최소한의 혈액 손실과 관련된 세심한 수술 기법을 채택, 모두 기증자와받는 사람 동물의 안정성을 보장하고, 적절하게 탈 방송 이식을 할 것이다. 위의 인정으로, 기술의 기술적 인 복잡성은 최고 제한 사항입니다.
우리는 여러 가지면에서 이전 HAHLT 기술을 전진했다. 도너와 수신자 동작에서 설명한 변형을 제어하고 효율적인 방식으로 필요한 수술 단계들을 수행하기위한 수단을 제공한다. 설명한 심근 보호 프로토콜 허혈 기간 동안 손상을 최소화하는 최적의 방법이다. 최종 결과는 형상이 최적화되어있는 HAHLT 그래프트이며, 부상이 최소화되었고, 극한 그래프트 기능 사전왔다가능한 최대한으로 봉사했다.
위에서 설명한 기술은 역동적이고 잠재적으로 거의 생리적 심실 로딩 조건 HAHLT 이식을.......
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공개 사항
저자가 공개하는 게 없다.
감사의 글
마크 제이 컨즈는 (의사 및 캐나다의 왕립 외과 대학을 통해 수여) UBC 임상 탐정 프로그램 및 UBC 4YF 박사 원정대의 지원을받습니다.
존 H. 보이드는 건강 연구 학술위한 국가 Sanitorium 협회와 마이클 스미스 재단이다. CIHR을 통해 자금. 저자는 설치 및 관류 장비의 유지 보수와 그들의 도움 박사 엠 알라 리처드 Wamboldt을 감사드립니다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Celsior Cardioplegic Soution | Genzyme | 용액은 시술 내내 얼음에 보관됩니다. 우리는 약간의 수정을 가하여 자체 솔루션을 준비합니다. | |
| 설치류 인공호흡기 | Harvard Apparatus | 모델 683 | |
| 바이탈 사인 모니터 | Nonin | 모델 9847V | SpO2 및 심박수를 표시합니다. |
| IV 캐뉼라 | Jelco | 3063 | 24 - 26 G x 3/4" 캐뉼라. |
| IV 튜빙 | CareFusion | MP9259-C | 짧은 길이 커넥터 튜빙(18cm). |
| 수술 클립 | Teleflex Medical | 001204 | Horizon 티타늄 결찰 클립. |
| 봉합사 | Ethicon, Sharpoint | LA54G, AK-0107 | 3-0 실크 릴 및 9-0 프롤렌 봉합사(단일 암, DR5 바늘). |
| 수술 기구 | 해당 없음 | 해당 | 사용된 기구는 일반적이며 모든 수술 용품 회사에서 구입할 수 있습니다. |
참고문헌
- Abbott, C. P., Lindsey, E. S. A technique for heart transplantation in the rat. Arch Surg. 89 (1964), 649-652 (1964).
- Ma, Y., Wang, G. Comparison of 2 heterotopic heart transplant techniques in rats: cervical and abdominal heart. Exp Clin Transplant.
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재인쇄 및 허가
