Method Article

בינוני אוויר עצם: הכנה ומבדק

DOI:

10.3791/52707

⸱

July 8th, 2015

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Oral Surgery and Stomatology, School of Dental Medicine, University of Bern, 2Laboratory of Oral Cell Biology, School of Dental Medicine, University of Bern, 3Department of Oral and Maxillofacial Surgery, School of Dental Medicine, Universitat Internacional de Catalunya, 4Robert K. Schenk Laboratory of Oral Histology, School of Dental Medicine, University of Bern, 5Department of Cranio Maxillofacial Surgery, Inselspital, University of Bern, 6Department of Implant Dentistry, School of Dentistry, Universidade Federal de Santa Catarina

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אנו מתארים כאן כיצד להכין מדיום מיזוג עצם (BCM) ולבדוק את פעילותו במבחנה.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

שתלי עצם אוטולוגית נמצאים בשימוש נרחב בניתוח, אורתופדיה, וtraumatology פה והלסתות. שתלי עצם אוטולוגית לא רק להחליף עצם חסר, הם גם תומכים בתהליך המורכב של התחדשות עצם. התנהגות חיובית זו של autografts מיוחסת לשלושה מאפיינים: osteoconductivity, osteogenicity, וosteoinductivity. עם זאת, יש היבט נוסף: העצם שתל לשחרר מספר עצום של מולקולות, כולל גורמי גדילה, אשר יכול למקד תאי mesenchymal המעורבים בהתחדשות עצם. המאפיינים אוטוקריני של שתלי עצם ניתן ללמוד במבחנה על ידי השימוש במדיום מיזוג עצם (BCM). כאן אנו מציגים פרוטוקול על איך להכין מדיום מיזוג עצם מעצם קליפת המוח חזיר ילידים, ועצם שעבר תהליך עיבוד או איבוד מינרלים תרמיים. תאים יכולים להיות חשופים ישירות לBCM או זורעים על ביו-חומרים, כגון ממברנות קולגן, ספוג בעבר עם BCM. אנחנו נותנים דוגמאות במבחנת bioassaי"ש עם תאי mesenchymal בביטוי של גנים מוסדרים TGF-β. הפרוטוקולים שהוצגו לעודד לחשוף עוד יותר את ההשפעות אוטוקריני של שתלי עצם במהלך התחדשות עצם ולפתוח נתיב למחקר translational בתחום הרחב של ניתוח שחזור.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עצם אוטולוגית נעשה שימוש נרחב לגשר פגמים שנפלו כתוצאה ממום, ניתוח resective, ניתוח שחזור טראומה, ולפני מיקום שתל 1,2. הבנת העקרונות הביולוגיים של כמה תלי עצם לתמוך בתהליך של איחוד שתל היא לא מפתח היחיד להבין מדוע autografts נחשב סטנדרטי בניתוח שחזור הזהב, הוא גם יונית לעיצוב המשופר של תחליפי עצם 3. ובכל זאת, איחוד שתל הוא מהיר יותר עם ​​עצם אוטולוגית לעומת עצם תחליפי 4,5. לפיכך, הוא הכרחי כדי לחשוף את המנגנונים המולקולריים ותאיים שגורמים עצם אוטולוגית כל כך יעיל לתמיכה בהתחדשות עצם.

ישנם שלושה מאפייני ספר לימוד של autografts שנ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. הכנת BCM

  1. להשיג לסתות חזיר מהקצב המקומי הטרי ככל האפשר. מניחים את הלסתות על משטח יציב ולשחרר דש בעובי מלא תשומת לב מיוחדת שלא להשאיר את כל רקמה רכה או periosteum מצורף לעצם. לעבוד בסביבה נקייה ללא הצורך לעבוד תחת מכסה המנוע הזרימה.
  2. ברגע שדש בעובי מלא הוא שוחרר, להשתמש מגרד עצם לקצור את שבבי עצם מהצד הלחי. שים לב שמגרד העצם צריך להיות חד. ידית בחוזקה מגרד העצם ועם תנועות ארוכות לאסוף את העצם. בטל שבבי עצם קטנים יותר 1 מ"מ ש.

    Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

    Results

    $$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

    בינוני אוויר עצם מוכן משבבי עצם חזירי טריים. סקירה כללית של התהליך להכנת BCM ולהשתמש בביו-חומרים בשילוב עם BCM מוצגת באיור 1 ואיור 2 בהתאמה. במהלך הכנת BCM, חשוב להשיג שבבי עצם גדולים עם תנועות ארוכות כתנועות קצרות או שבבי עצם קטנים מאוד יכול להשפיע על האיכות של BCM הסופי. איכות של BCM יכולה להיות נשלטה על ידי ניתוח ביטוי גנים של גני מטרת BCM: ADM, PTX3, IL11, IL33, NOX4 וPRG4 (איור 3). ADM וPTX3 מוסדרים מטה-מטה ל -0.4 פי וIL11, IL33, NOX4 וPRG4 י.......

    Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

    Discussion

    $$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

    בינוני-מותנה עצם משקף את הפעילות המסחרית של שתלי עצם בשלבים המוקדמים של התחדשות עצם השלבים. הפרוטוקול המתואר כאן ניתן להתאים ללמוד את תגובת סוגים שונים של תאים מעורבים בהתחדשות עצם של. יתר על כן, הפרוטוקול יכול לשמש כדי להכין מדיום מותנה ממילוי עצם או עצם מעובד. השיטות קלים לביצוע ומסתמך על רעיון פשוט: הגורמים שוחררו מעצם ילידי מעובד ושונים. ההבנה כיצד BCM משפיעה על תאי mesenchymal יכולים לעזור כדי ללמוד עוד על איחוד שתל ומאפיינים של autografts עצם. בהתבסס על תפיסה זו שצברנו ידע ע.......

    Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

    Disclosures

    $$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

    יש המחברים אין לחשוף. ג'ורדי Caballé-סראנו קיבל מלגה מטעם הקרן למחקר לרפואת שיניים וחינוך, באזל, שווייץ.

    Acknowledgements

    $$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

    המחברים רוצים להודות לקתרין סוליוז על עזרתה המיומנת.

    ....

    Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

    Materials

    List of materials used in this article
    NameCompanyCatalog NumberComments
    לסת תחתונהחזיר מגרד
    PPBUSE2/36
    אנטיביוטיקה & AntimicoticsAll Life Technologies15240-062
    ממברנות קולגן (Bio-Gide)Geistlich
    סרום עגל עובריInvitrogen Corporation16030074
    DMEMInvitrogen Corporation21885-025

    ערכת בידוד RNA טהורה גבוהה    		Roche11828665001
    Transcriptor First ערכת סינתזה של Strand cDNA
    Roche Microsynth
    SYBR Green (עבור Q-RT-PCR)Roche4673484001
    PBSRoche11666789001
    עצמות מקומי Hu-Friedy פריימרים 4379012001

    References

    $$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
    1. Buser, D. Long-term Stability of Early Implant Placement with Contour Augmentation. Journal of dental research. , (2013).
    2. Chiapasco, M., Casentini, P., Bone Zaniboni, M. augmentation procedures in implant dentistry. The International jour....

    Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

    Reprints and Permissions

    Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

    Request Permission

    Tags

    Bone Conditioned MediumBone GraftsMesenchymal CellsGene Expression AnalysisQuantitative Real time PCRCollagen MembranesTGF beta SignalingBone RegenerationIn Vitro BioassayParacrine Effects

    Related Articles