التعرض لteratogens قد يسبب تشوهات خلقية. الزرد مفيدة لتحديد إمكانية ماسخة للمواد الكيميائية. ونحن لشرح فائدة الزرد عن طريق تعريض الأجنة إلى مستويات مختلفة من النتريت وأيضا في أوقات مختلفة من التعرض. وتبين لنا أن النتريت يمكن أن تكون سامة وتسبب تشوهات تنموية حادة.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
الزرد نموذجا لتقييم إمكانات المسخية من النطرون
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
مستويات عالية من النيترات في البيئة يمكن أن يؤدي إلى عيوب خلقية أو حالات الإجهاض في البشر. ويفترض، ويرجع ذلك إلى تحويل النترات إلى نتريت بواسطة القناة الهضمية والبكتيريا اللعابية هذا. ومع ذلك، في دراسات الثدييات الأخرى، ومستويات عالية النتريت لا تسبب تشوهات خلقية، على الرغم من أنها يمكن أن تؤدي إلى نتائج الإنجابية الفقيرة. وهكذا، فإن إمكانية ماسخة من النتريت ليست واضحة. وسيكون من المفيد أن يكون هناك نظام نموذج الفقاريات لتقييم بسهولة تأثيرات ماسخة من النتريت أو أي مادة كيميائية أخرى ذات اهتمام. هنا، ونحن لشرح فائدة الزرد (دانيو rerio) لفحص المركبات السمية والعيوب الجنينية. يتم تخصيب الأجنة الزرد خارجيا ويكون التطور السريع، مما يجعلها نموذجا جيدا للدراسات ماسخة. وتبين لنا أن زيادة وقت التعرض للنترات يؤثر سلبا البقاء على قيد الحياة. زيادة تركيز النتريت أيضا يؤثر سلبا على البقاء على قيد الحياة، في حين نترات لا. لثا الأجنةر البقاء على قيد الحياة التعرض النتريت، يمكن أن تحدث تشوهات مختلفة، بما في ذلك التامور وصفار ذمة الكيس، والسباحة noninflation المثانة، وتشوه القحفي. وتشير النتائج التي توصلنا إليها الزرد هو نظام ملائم لدراسة إمكانية ماسخة من النتريت. يمكن بسهولة أن تتكيف هذا النهج لاختبار المواد الكيميائية الأخرى لآثارها على التنمية الفقارية المبكرة.
المقدمة
إمساخ هي العملية التي يعطل التطور الطبيعي للجنين أو الجنين عن طريق التسبب في تشوهات دائمة الهيكلية والوظيفية، وتأخر النمو، أو الإجهاض في الحالات الشديدة 1. ويمكن أن تسببها بعض العوامل الطبيعية (teratogens)، التي تتداخل مع التطور الجنيني بطرق متعددة 2. أثناء التطور الجنيني الإنسان، وقد تم الإبلاغ عن teratogens الشائعة مثل الإشعاع، والعوامل المعدية، المعادن السامة، والمواد الكيميائية العضوية أن يسبب تشوهات في طيات فوق المآقي (حظيرة الجلد في الجفن العلوي) وانحراف الأصابع (إصبع المنحني أو أخمص القدمين) من خلال أخطاء التخلق 1.
فهم ا....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
وتمت الموافقة على الإجراءات الموضحة في هذا البروتوكول من قبل لجنة رعاية واستخدام الحيوان المؤسسي في جامعة انديانا بنسلفانيا.
1. حصاد الأجنة
- الحفاظ على الزرد في 28.5 درجة مئوية، ودرجة الحموضة 7، والتوصيل بين 500-1،500 ميكرو ثانية، والخفيفة / دورة الظلام من 14 ساعة ضوء و 10 ساعة الظلام 24. استخدام النوع البري سلالات مثل تو، AB أو تو / AB الهجين. سلالات مختلفة قد يستجيبون بشكل مختلف للعلاج الكيميائي 25.
- ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
كان التعرض إلى 300 ملي الإيثانول لمدة 22 ساعة أي تأثير على البقاء على قيد الحياة (لا تظهر البيانات)، بما يتفق مع التقارير السابقة 5،23،26. ومن المتوقع، كما الإيثانول هو مشوه المعروفة وبمثابة مراقبة إيجابية. وتضمنت الظواهر الملحوظة ذمة التامور، السباحة noninflation المثانة (الشكل 1)، والعيوب القحفي، وتأخر في النمو (لا تظهر البيانات).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
الطريقة الموصوفة هنا يوضح فائدة الزرد في تقييم إمكانية ماسخة من النتريت والنترات. مقارنة الفقاريات الأخرى، الزرد لديها مزايا التي تشمل الخصوبة العالية، والإخصاب الخارجي، والشفافية البصرية، والتطور السريع. المسوخ المتاحة التي تفتقر تصبغ (مثل الزرد كاسبر 36) تساعد أيضا في تعزيز رؤية الأعضاء الداخلية. كما أنه من السهل لتوليد الزرد المعدلة وراثيا بجينات مراسل لتسهيل التحليل في الأسماك الحية 37. لأنه يتم حفظها الجينوم الزرد مع البشر، والمعلومات المكتسبة من دراستهم.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.
شكر وتقدير
تم تمويل
VK من خلال منح من قسم الأحياء في IUP وكلية الدراسات العليا والبحوث (التطوير المهني لطلاب الدراسات العليا). تم دعم CQD و TWS من قبل كلية IUP للدراسات العليا والبحوث (تكاليف نشر أعضاء هيئة التدريس / نفقات البحث العرضي). كما نشكر أعضاء مختبر Diep على صيانة مرفق أسماك الزرد.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| DREL / 2010 أداة | Hach | 26700-03 | |
| الإيثانول | سيجما-ألدريتش | E7023 | |
| KIMAX الزجاج بتري طبق | VWR | 89001-244 | |
| MS-222 | سيجما ألدريتش | E10521 | |
| NitraVer 5 كاشف نترات | Hach | 14034-46 | |
| NitriVer 3 كاشف النتريت | Hach | 14065-99 | |
| بارافيلم | فيشر Scientific | 3-374-10 | |
| Paraformaldehyde | Sigma-Aldrich | 158127 | |
| S6E مجهر مجسم | Leica | 10446294 | |
| نترات الصوديوم | فيشر Scientific | S343 | |
| مختبر نقل الماصات | مبيعات المنتجات | L320072 | |
| قوارير زجاجية | فيشر ساينتفيك | 03-338B |
المراجع
- Gilbert-Barness, E. Teratogenic causes of malformations. Ann Clin Lab Sci. 40 (2), 99-114 (2010).
- Brent, R. L. The cause and prevention of human birth defects: What have we learned in the past 50 years. Con Anom. 41 (1), 3-21 (2001).
- Lin, S., Zhao, Y.....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
