Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Влияние печени засечки на внутрипеченочных опухолевого роста

9.5K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/53946

⸱

9 апреля 2016 г.

 ,  , 

В этой статье

Краткое содержание

Высокая частота рецидивов опухоли после резекции метастазов в печени остается нерешенной проблемой. Иллюстрированная мышиная модель может быть полезна для исследования причин таких рецидивов. Он впервые сочетает в себе модель резекции печени с внутрипеченочным введением опухолевых клеток.

Аннотация

Высокая частота рецидива опухоли после резекции метастатического поражения печени остается нерешенной проблемой. Малые опухолевых клеток отложения, которые не могут быть обнаружены с помощью обычной клинической визуализации, может быть стимулировано печеночных факторов регенерации после резекции печени. Это не совсем понятно, однако, какие факторы имеют решающее значение для рецидива опухоли.

Представленная модель мыши может оказаться полезным для изучения механизмов, которые играют определенную роль в развитии рецидивов злокачественных новообразований после резекции печени. Модель сочетает в себе простой в выполнять и воспроизводимые методы определенных количеств удаления ткани печени и индукции опухоли (путем инъекции) у мышей. Животных обрабатывали либо одной лапаротомии, 30% резекции печени, или 70% резекции печени. Все животные впоследствии получили инъекции опухолевых клеток в оставшейся ткани печени. После двух недель наблюдения, печень и опухоли оценивали по размеру и весу иисследовали с помощью иммуногистохимии.

После того, как 70% резекции печени, объем опухоли и вес были значительно увеличены по сравнению с одним лапаротомии (р <0,05). Кроме того, иммуногистохимии (Ki67) показали повышенную скорость пролиферации опухоли в группе иссечения (р <0,05).

Эти результаты демонстрируют влияние печеночных механизмов регенерации на рост внутрипеченочных опухоли. В сочетании с такими методами, как гистологического проработке или анализа РНК, описанная модель мыши могла бы служить основой для тщательного изучения различных факторов, участвующих в росте опухоли и рецидива метастатического заболевания в печени. Значительное число переменных, таких как продолжительность послеоперационного наблюдения, клеточная линия используется для инъекций или сроков инъекции и резекции печени предлагают несколько углов при изучении конкретного вопроса в контексте пост-ГЕПАТЭКТОМИИ метастазов. Ограничения этой процедуры являются а.е.thorization для выполнения процедуры на животных, доступ к соответствующему объекту испытаний на животных и приобретения определенного оборудования.

Введение

Колоректальный рак (CRC) составляет почти 9% от всех злокачественных опухолей. Это является третьим наиболее распространенным видом рака, как в США, так и во всем мире. Глобальные показатели смертности от диапазона CRC от 300000 до более чем 500000 в год 1. Двадцать процентов пациентов страдают от метастазов в печени при обнаружении их колоректального опухоли. Резектабельные метастазы обычно обрабатывают с помощью частичной резекции печени 2,3. Усовершенствованные хирургические методы, новые мультимодальные стратегии и новые определения резектабельными метастазов оказывают терапию частичной резекции печени возможно для все большего числа пациент....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Правительство Средней Франконии в Баварии, Германия, получила разрешение для процедур, описанных. Любые подобные эксперименты требуют предварительного разрешения соответствующих властей.

Примечание: Следующая Пособие может быть использовано для рассмотренных ранее групп А через C. Шаги, которые должны быть оставлены в группах А и В имеют соответствующую маркировку.

1. Подготовка

  1. Наденьте перчатки, поместите полистирола площадку под микроскопом, и сфокусировать объектив на область чуть выше площадку.
  2. Разделить стерильную простыню и место половину по сравнению с полистиролом площадку, а другая половина просто рядом с ним.
  3. ....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

В нашем конкретном эксперименте, мы включили 30 бестимусных голых-foxn1nu / ню мышей. Они получили срединную лапаротомию, опухолевых клеток инъекции 500000 МС38 опухолевых клеток (растворенных в 50 мкл физиологического раствора), а затем обрабатывали либо 70% резекции печени, 30% резекции печени, или вообще без дальнейшего вмешательства.

Через 14 дней, почти полное восстановление оставшейся печени следующие 30% или 70% резекци.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Предыдущие эксперименты, выполняющих операции у грызунов были в состоянии определить некоторые переменные, которые могли бы служить в качестве источников для смещения. Для того чтобы получить надежные и достоверные результаты, рассмотрим следующие меры предосторожности.

Рутинное до операции пост может привести к стеатоз печени 12, который может ингибировать регенерацию печени 13,14. Поэтому не рекомендуется. Самая высокая митотическую активность гепатоцитов изменяется в.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

Особая благодарность д-ру Бенджамину Motsch за его помощь в технических вопросах. Авторы также хотели бы отметить доктор Маркус Forschner и Бирк Мюллер за их поддержку мультимедиа, Erica Magelky за ее редакционной экспертизы и Лиза Хорнанг, доктор Роланд Jurgons и профессор Стефан фон Хорстен (все от Франца-Penzoldt-Центр, Университет Эрланген) за их профессионализм в обращении и ухода за животными. Мы благодарим профессора Майкла Neumaier в Институте клинической химии, медицинский факультет Мангейм университета Гейдельберг, Германия для обеспечения опухолевых клеток МС38.

Настоящая работа была выполнена в выполнении требований для получе....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
<сильно>Оборудование
Работающий микроскопZeissOPMI-1 FC S21
Индукционная клетка (коробка из оргстекла)UNO BV, Нидерланды180000132
Расходомер + Соединительный комплектUNO BV, Нидерланды180000008
Испаритель UNO Sigma DeltaUNO BV, Нидерланды180000002
Ключевой наполнитель для анестетикаUNO BV, Нидерланды180000010
Адсорбер фильтра с активированным углемUNO BV, Нидерланды180000140
Газоотводная установкаUNO BV, Нидерланды180000118
Маска для лица для мышиUNO BV, Нидерланды180000065
Подставка для испарителяUNO BV, Нидерланды180000006
Тепловая лампаPhysitemp InstrumentsHL-1
Пенополистирольная прокладкаRAYHER30074000 
Инструмент для третьих рукTOOLCRAFT ZD-10F
Прецизионные весыKernEW 220-3NM
Весы KernEMB 500-1
Скользящий суппортMIB MIB82026100
Щипцы для микродиссекцииBraun/AesculapBD195R
Ножницы для микродиссекцииBraun/AesculapFD100R
Иглодержатель для микродиссекцииBraun/AesculapBM563R
РетракторFine Science Tools (F.S.T.)No 17001-0Тип: Зажим Bowmann
Braun/AesculapBJ002R
Название<strong>CompanyНомер в каталогеКомментарии
Расходные материалы
(ПРИМЕЧАНИЕ: Количество указано для каждого животного и процедуры)
Стерильная чехол Foliodrape (45 см x 75 см)Hartmann
(2 шт)Стерильная жидкость Hartmann4700151Peha
(0,9% NaCl)Braun3570310PZN=04454809
(Softasept - 250 мл)Braun3887138PZN=0762008808505018
2 шприца по 1 мл (Injekt-F)Braun9166017V
26 г канюли (Стерикан) - для инъекций карпрофенаBraun4665457
30 г канюли (Стерикан)  - для инъекций опухолиBraun4656300
Капрофен (=Римадил)PfizerQM01AE91
Метамизол (= Новаминсульфон)Ratiopharm16543.00.00
4-0 Викрил шовный материалEthiconJ835G
5-0 Проленовый шовный материалEthicon8618G
SafeLock Flex-Tube 1,5 млEppendorf 
4 x 4 марлевая губкаKendall/Covidien БЗК: 728795135355 ASIN: B005BFQTWM 
Большая скрепкаACCOA7072510G
NameCompanyКаталожный номер>Комментарии
Animals
Female athymic nude-foxn1nu/nuHarlan Laboratories B.V.Код 069
Стерильные ватные палочки 2775001 Дезинфицирующее средство 22363778

Ссылки

  1. Haggar, F. A., Boushey, R. P. Colorectal cancer epidemiology: incidence, mortality, survival, and risk factors. Clin. Colon Rectal Surg. 22, 191-197 (2009).
  2. Fong, Y., et al. Liver resection for colorectal metastases. J. Clin. Oncol. 15,....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Регенерация печенимодель на мышахиммуногистохимияпролиферация опухолиобъем опухоливес опухолигипертрофия печенипослеоперационное наблюдение