Kutane Surgical Denervation: eine Methode zur Prüfung der Voraussetzung für die Nerven in Maus-Modellen der Haut-Krankheit

Shelby C. Peterson; Isaac Brownell; Sunny Y. Wong

doi:10.3791/54050

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Methodenartikel

Kutane Surgical Denervation: eine Methode zur Prüfung der Voraussetzung für die Nerven in Maus-Modellen der Haut-Krankheit

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DOI:

10.3791/54050

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26. Juni 2016

Shelby C. Peterson¹ , Isaac Brownell^*² , Sunny Y. Wong^*¹

¹Dermatology, Cell and Developmental Biology, University of Michigan, ²Dermatology Branch, National Cancer Institute, National Institutes of Health

^* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Dieser Artikel enthält detaillierte Protokolle für die genetische Markierung von Maushaut, chirurgische Denervierung, Hautbiopsie und Visualisierung markierter Epithelien durch Ganzbett-β-Galactosidase-Färbung. Mit diesen Methoden kann der Bedarf an Nerven in Mausmodellen normaler und pathologischer Haut getestet werden.

Zusammenfassung

kutane somatosensorische Nerven haben die Funktion, verschiedene Reize zu erkennen, die auf die Haut einwirken. Zusätzlich zu ihrer etablierten sensorischen Rolle deuten neuere Studien darauf hin, dass Nerven auch Hauterkrankungen wie atopische Dermatitis, Psoriasis und Krebs modulieren können. Hier beschreiben wir Protokolle zum Testen der Anforderung an Nerven bei der Aufrechterhaltung eines kutanen mechanosensorischen Organs, der Tastkuppel (TD). Insbesondere diskutieren wir Methoden zur genetischen Markierung, Ernte und Visualisierung von TDs durch Whole-Mount-Färbung und zur Durchführung einer einseitigen chirurgischen Denervierung an der dorsalen Rückenhaut von Mäusen. Zusammen können diese Ansätze verwendet werden, um die TD-Morphologie und die Genexpression in denervierter sowie scheinoperierter Haut desselben Tieres direkt zu vergleichen. Diese Methoden können auch leicht angepasst werden, um den Bedarf an Nerven in Mausmodellen der Hautpathologie zu untersuchen. Schließlich bietet die Möglichkeit, wiederholt Hautproben zu nehmen, die Möglichkeit, das Fortschreiten der Krankheit in verschiedenen Stadien und zu verschiedenen Zeitpunkten nach der Einleitung zu überwachen.

Einleitung

In den letzten Jahren hat sich die Wertschätzung für den Einfluss von Nerven auf Krankheiten, die typischerweise nicht als klassische Neuropathien^1-4 angesehen werden, erweitert. In der Haut deuten neuere experimentelle Beweise darauf hin, dass sensorische Nerven verschiedene Pathologien modulieren können, die von Psoriasis bis Krebs reichen^5-9. Dies wurde mit Techniken wie der chirurgischen Denervierung und der pharmakologischen Hemmung der neuronalen Funktion bei Nagetieren nachgewiesen. Im Fall von Psoriasis haben diese Studien einen mechanistischen Rahmen für das Verständnis geliefert, warum sich menschliche Psoriasis-Plaques nach Verlust de....