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방법 논문

대퇴골 절골술의 표준화 된 고정을위한 골수 내 잠금 네일은 마우스에 정상 및 결함 뼈 치유를 분석하기

13.7K 조회수

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DOI:

10.3791/54472

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2016년 11월 13일

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이 논문에서

요약

이 프로토콜은 대퇴골 절골술의 표준화된 고정을 위해 골수내 잠금 못을 사용하는 골유합 기술을 설명하며, 이는 마우스의 정상 및 결함 있는 뼈 치유를 분석하는 데 사용할 수 있습니다.

초록

뼈 치유 모델 임상 골절 치료를위한 새로운 치료 전략의 개발에 필수적이다. 또한, 마우스 모델은 외상 연구에 사용 된 더 일반적으로되고있다. 이들은 뼈 치유의 차별화 프로세스 뒤에 분자 기전의 해석 변이주 항체의 다수를 제공한다. 생체 역학적 환경을 제어하기 위해 표준화 된 잘 특성화 골 유합술 기술은 마우스에서 필수입니다. 여기, 우리는 생쥐에서 열린 대퇴골 절골술을 안정화하기 위해 디자인과 골수 손톱의 사용에보고한다. 의료용 스테인레스 스틸로 만든 못, 높은 축 방향 및 회전 강성을 제공합니다. 또한 임플란트 정의, 상수 절골술 갭의 창조는 0.00 mm에서 2.00 mm로 크기를 할 수 있습니다. 0.00 mm 및 0.25 mm의 갭 크기의 대퇴골 절골술의 손톱 안정화 잠금 골수은 연골 및 intramembranous ossificat을 통해 적절한 뼈 치유 결과이온. 위축성 비 노조에서 2.00 mm 결과의 간격 크기 대퇴골 절골술의 안정화. 따라서, 골수 내 고정 못 치유 비 치유 모델에서 사용될 수있다. 다른 오픈 뼈 치유 모델에 비해 손발톱의 사용의 또 다른 이점은 충분히 골 통합 과정을 연구하기 위해 뼈 대체 물질 및 지지체를 고정 할 수있는 가능성이다. 골수 손발톱의 사용의 단점은 폐 모델에 비해 모든 오픈 절차에 고유 침습적 수술이다. 다른 단점은 골수 외 안정화 방법에 비해 모든 골수 안정화 기술에 내재 된 골수 공동에 손상이 유도 될 수있다.

서론

뼈 치유 생물학 및 세포 배양 타원체를 사용하여 시험 관내에서 조사 될 수 있고,뿐만 아니라 동물 실험 접근법을 사용하여 생체 내에서 필요하다. 대형 동물 실험은 여전히 임상 시험에 중요한 역할을하지만, 제품 또는 가설 초기 시험은 지난 10 년 동안 변경되어 현재에는 종종 작은 동물 모델 (1)에 수행된다. 이 스위치는 여러 가지 이유로 하였다. 생산 및 마우스 및 쥐의 유지 보수가 저렴 돼지와 양에 비교된다. 또한, 작은 동물 만성 실험 큰 시리즈의 성능을 용이하게 둘 짧은 재생 시간 및 정상 짧은 치료 기간을 갖는다. 마지막으로, 유전자 타겟팅 동물과 특이 적 항체의 가용성 뼈 치유 분자 기전의 분석을 허용한다. 앞에서 큰 동물 모델에서 골 접합 기술을 사용하면서 그러나 최소한 variat로 번역 될 수있다 인간 또는 동물 임상 환자 치료, 소형 쥐와 생쥐의 개발 ​​및 골 유합술 기술의 응용 프로그램에서 사용되는 유사한 절차에서 이온 도전으로 밝혀졌다.

잘 역학적 환경이 현저하게 공정이 골 치유에 영향을 미치는 것으로 알려져있다. 인간의 골절 치료에서 알 수있는 바와 같이, micromovements 덜 견고한 고정 후 견고한 고정....

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프로토콜

모든 절차 IACUC가 승인했다 제도적 지침 (Landesamt 대 Verbraucherschutz, Zentralstelle Amtstierärztlicher DIENST, 자르브뤼켄, 독일) 하였다. 통증 및 감염 예방 실험이 수행 될 수있는 국가 및 기관의 각각의 가이드 라인에 일치해야한다.

임플란트 및 수술 도구 1. 준비

  1. 미세 수술 도구 상자에서 메스 블레이드 (사이즈 15), 작은 준비 가위, 미세 집게, 드레싱 포셉, 작은 집게, 24 게이지 (G) 27 G 바늘, 비 흡수성 5-0 봉합하고, 바늘 홀더를 선택 .
  2. 골수 손톱, 연동 핀, 특별한 목표 장치는 질리가 본의 질리에 대한 템플릿을보고, 센터링 드릴 비트 (1 mm 직경), 드릴 비트 (0.3 mm 직경) 및 핸드 드릴의 압축을 풉니 다 (그림 2) 재료의 목록을 참조하십시오.
    참고 : intramedullary 네일 (0.8 mm 직경 15.7 mm 길이)가 대퇴골에 역행 주입을위한 의료용 스테인리스 골수 내 고정 못하다. 손발톱은 근위 실 (4 mm 길이) 및 축 방향 및 회전 안정성을 달성하기 위해 인터 로킹 핀의 삽입 (0.3 mm 직경)에 대한 두 개의 구멍 (도 1....

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결과

수술에 대한 전체 시간은 폐쇄 상처 약 30 분 피부 절개에서였다. 제공된 외과 용 임플란트를 사용하여 외과 스테레오 현미경없이 수행 될 수있다. 수술 후, 동물을 매일 관찰 하였다. 동물의 것도이 기간 후 통증 (발성, 불안, 이동성의 부족, 신랑 실패, 비정상적인 자세, 또는 주변에 정상적인 관심의 부족)의 증거를 보여 주었다 없기 때문에 수술 후 진통제 3 일 후에 종료되었습니다. 동물은 수술 후 이일 내에 정상 체중 부하를 보였다. 창상 감염 이차 골절 전 관찰 기간 동안 관찰되지 않았다.

발생할 수있는 가장 중요한 합병증 무릎 관절 (도 3 A)의 과두와 네일 레벨의 돌기, 로킹 손발톱의 잘못된 주입된다. 이것은 주로 발생때문에 조준 장치의 잘못된 처리 또는 때문에 특히 20g 이하 체중와 마우스에 너무 작은 대퇴골과 동.......

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토론

수술 기법의 가장 중요한 단계는 손톱 조준 장치, 및 핀의 정확한 위치 결정된다. 손발톱은 과두의 수준에서 무릎 관절에 손발톱의 돌출부 무릎 (도 3 A)의 움직임을 제한 할 수 있기 때문에, 손발톱의 선단에서 현저한 들여 완전히 삽입되어야한다. 따라서, 대퇴의 크기는, 따라서, 동물의 체중을 고려하여야한다. 의사는 또한 손톱의 어댑터 플랜지를 부착 조준 장치의 최종 위치에 특별한주의를 기울여야한다. 이 절골술은 동일한 간부 위치에 항상 보장합니다. 마지막으로, 연동 핀은 관찰 기간 (도 3 B) 동안 핀의 이탈을 방지하는 완전히 bicortically 삽입되어야한다. 따라서, 핀의 회전 운동과 연속 축 방향 하중을 이용하여 대퇴골 내에 삽입되어야한다. 핀 구동축 위즉시 상기 연동 토크가 달성 될 때 오프. 동물이 연구 프로토콜에 포함되기 전에 못과 핀의 최종 위치는 방사선 촬영을 통해 확인해야합니다.

실험의 끝에,.......

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공개 사항

Romano Matthys는 임플란트 및 임플란트 전용 기구를 생산하는 스위스 다보스에 있는 RISystem AG의 직원입니다. 다른 저자에게는 이해 상충이 없습니다.

감사의 글

이 작품은 RISystem AG, 스위스 다 보스에 의해 지원되었다.

....

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
MouseNailRISystem AG221,122
MouseNail 조준 장치RISystem AG221,201
MouseNail 연동 핀RISystem AG221,121
센터링 비트RISystem AG592,205
드릴 비트RISystem AG590,200
Gigli 와이어 톱RISystem AG590,100
봉합사 (5-0 프롤렌)Ethicon8614H
집게Braun Aesculap AG & 코KG BD520R
드레싱 핀셋Braun Aesculap AG & 코KG BJ009R
가위Braun Aesculap AG & 코KG BC100R
니들 홀더Braun Aesculap AG & 코KG BM024R
24G 바늘BD Mircolance 3304100
27G 바늘Braun Melsungen AG9186182
메스 블레이드 크기 15Braun Aesculap AG & 코KG 
집게Knipex7932125
열 라디에이터Sanitas605.25
제모 크림Asid bonz GmbHNDXZ10
눈 윤활제Bayer Vital GmbH2182442
XylazineBayer Vital GmbH1320422
케타민Serumwerke Bernburg
트라마돌Grü nenthal GmbH2256241
소독 용액 (SoftaseptN)Braun Melsungen AG8505018
CD-1 마우스Charles River22
166005257005294

참고문헌

  1. Histing, T., et al. Small animal bone healing models: standards, tips, and pitfalls results of a consensus meeting. Bone. 49 (4), 591-599 (2011).
  2. Claes, L., Augat, P., Suger, G., Wilke, H. J. Influence of size and stability of th....

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