다음 프로토콜은 마우스의 왼쪽 심방 볼륨 (LAV), 대동맥 (아오) 직경 및 폐 동맥 (PA) 직경을 얻기 위해 사용 심 초음파 이미지의 수집 및 분석을위한 방법을 설명합니다. 이 기술은 심폐 기능 평가를 할 수있는 비 침습적 비 단자 절차이다.
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이 논문에서
요약
초록
본 방법은 측정과 심 초음파를 통해 좌심실 이완기 혈압 만성 고도의 대리로 LAV를 사용뿐만 아니라 쥐의 대동맥 및 PA 직경의 측정 값을 얻을하는 방법을 조사 가르친다.
연령 10 세 이상 D 마우스는 본 기술을 이용하여 분석 될 수있다. 셋업, 영상 획득 및 이미지 분석 :이 기술은 3 가지 주요 단계로 구성된다. 셋업 단계는 1 % 이소 플루 란 마취 마우스를 가져 오는을 면도하고, 이미지 수집이 수행하는 가열 EKG 보드에 앙와위에서 테이핑으로 구성되어 있습니다. 이미지 획득 단계는 심장 구조를 식별하기 위해 학습 및 볼륨 및 직경을 계산할 수하기 위해 그 상대 프로브 축에 필요한 모든 이미지를 얻기로 구성되어 있습니다. 이미지 분석 단계는 컴퓨터 소프트웨어의 도움으로 미리 획득 한 이미지를 측정하는 구성.
서론
본 방법은 측정 및 이소 플루 란에서 마우스에 2 차원 심 초음파와 LAV, 대동맥 직경 PA 직경을 사용하는 방법을 연구자을 가르친다. 노인의 보존 구혈률 (HFpEF)와 심장 마비 그 팔십년에서 최대 10 %에 영향을 미치는 중요한 이환율과 사망률 1 이전 결과. 상당한 사망률은 폐 고혈압 (PH), 폐동맥 압력이 운동시 호흡 곤란, 진보적 인 오른쪽 심장 마비, 종종 죽음으로 이어질 상승하는 HFpEF과 유사한 증상으로 제시하는 교활한 질병 과정에서 발생한다. 이 HFpEF 및 PH 양의 증가 유병률은 비 침습이 아닌 단말 접근 정확한 평가 뮤린 모델에서 중재 모니터링 할 수있는 방법의 개발에 대한 필요성을 의미.
심실 기술의 변화를 통해 이완기 기능의 저하에 리드를 노화erial 보강, 혈관 장애, 염증 (3), 장애인 칼슘 규제 4, β 아드레날린 응답 성을 감소하고, 생산 물리적 deconditioning 활성 휴식을 둔화 및 수동 강성을 증가했다. 시간이 지남에 따라이 증가 LV 충전 압력과 LA의 보상 확대로 이어집니다. (....
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프로토콜
모든 동물은 의학의 베일러 대학의 실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 건강 가이드의 국립 연구소의 지침에 따라 마음에 든다고했다.
1. 셋업
- 심 초음파 시스템을 켭니다. 표시 드롭 다운 메뉴에서 "심장 측정"을 선택하여 소프트웨어를 시작하고 "초기화"를 클릭합니다.
- 화면 상단의 "새"버튼을 새로운 연구의 클릭을 시작하고 연구 마우스의 인구 통계 학적 정보를 입력합니다. 예를 들어, 마우스 ID, 성별, 생년월일뿐만 아니라 연구를하고 운영자의 이름.
- "온도 ON / OFF"버튼을 클릭하여 온도 조절 EKG 보드의 전원을 켭니다. 위쪽 및 아래쪽 화살표를 사용하여 39 ° C의 온도로 설정합니다.
- 마취 실을 설정하는 시작하려면 먼저 산소와 이소 플루 란 수준이 전달 시스템의 각각에 적합한 있는지 확인하십시오. 마취 챔버에 마우스를 대고 누운까지 이소 플루 란과 산소로 유도 한 후 마스크를 얼굴을 전송합니다. 마우스가 제대로 발을 곤란과 운동 부족으로 확인하여 마취되어 있는지 확인합니다. 양 발 철수 응답을 회피 가능한 가장 낮은 수준에서 이소 플루 란을 유지한다.
- 온도 제어 EKG 보드에 부정사 위치에 마우스를 놓고 보드의 대응 변환 ....
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결과
심 초음파와 LA 볼륨과 PA 직경의 평가는 폐 동맥과 왼쪽 심방 확대가에 높은 충전 압력의 결과 모두 어디 그에서 LAV의 변화에 따라 증가 PA 직경에 폐동맥 저항의 결과를 증가 모델 사이의 차별을 할 수 있습니다 심장의 왼쪽. 두 pathophysiologies의 차이를 표시하는 이미지는 그림 4에 표시됩니다. 라와 PA의 이미지는 젊은, 저산소증에 의한 폐 고혈압과 연령 관련 좌심실 이완기 기능 장애에서이다. 폐동맥 고혈압 모델은 4 주 동안 좌심방 용적 변화없이 PA 직경의 증가를 개발한다. 이에 비해, 기존 동물은 폐 동맥 직경 구동이 그룹 PA 직경의 증가를 압력의 역방향 전파 제안 좌심방 부피 모두의 증가를 개발한다.
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토론
성공적으로 LAV, 대동맥 및 PA 직경을 측정하는 세 가지 중요한 단계가 있습니다. 셋업 동안 완전히 가슴의 털을 제거하는 것이 중요하다; 이렇게하는 실패는 이미지 품질과의 간섭 발생합니다. 즉, 25 MHz 및 심장 필터 LAV의 평가 및 30 MHz 및 평가를위한 복부 필터입니다 : 이미지 중 취득 초당 프레임이 프로브 프로브 다를대로 해당 프로브와 필터를 각각의 이미지를 획득하는 것이 중요 단계 대동맥 및 PA 직경. 마우스가 지방의 큰 금액을 가지고 또는 리브하게되면 어려운 좋은 창을 얻을 경우 연구원은 가난한 이미지 수집에 의해 때때로 제한 될 수 있습니다. 이미지 분석 동안은 대표 결과 섹션에 기술 된 바와 같이 최대 용량에서 공동을 측정하는 중요한 단계. 지도로 심전도를 사용합니다.
심장 초음파 검사는 운영자 의존하는 것으로 알려져있다. 이 기술은 필요뿐만 아니라 최상의 이미지 수집을위한 심장 해부학 및 심 초음파 창문 익숙해은 연구의 시간을 줄일 수 있습니다........
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공개 사항
저자는 공개할 것이 없습니다.
감사의 글
이 연구는 Baylor College of Medicine, Geriatrics의 Huffington Center on Aging, Houston Methodist Hospital의 CVS DeBakey Heart Center 및 BCM, NIH RO-1 HL 13870 to ML Entman의 지원을 받았으며 미국 재향 군인회(LMP), Biomedical Laboratory Research and Development Program의 Career Development Award # IK2BX002410 받았습니다.
지혜를 공유하고 이 작업을 지원해 준 Mark Entman M.D.에게 대단히 감사합니다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Vevo 770 고해상도 생체 내 마이크로 이미징 시스템 | Visual Sonics | Vevo 770-120 | 초음파 심전도 장비 |
| 707B RMV (실시간 마이크로 시각화) 30 MHz 스캔헤드와 캡슐화된 트랜스듀서 | Visual Sonics | 707B-256 | 실시간 마이크로시각화 스캔헤드 |
| 710B RMV (실시간 마이크로시각화) 25 MHz 스캔헤드와 캡슐화된 트랜스듀서 | Visual Sonics | 710B-159 | 실시간 마이크로시각화 스캔헤드 |
| Vevo 통합 레일 시스템, 생리학적 모니터링 유닛 포함 | 비주얼 소닉 | ||
| 흡입 마취 시스템 | VetEquip | VE2627 | 마취 시스템 |
| 이소플루오란 | 헨리 샤인 | 50033 | |
| 전기 면도기 | Wahl | 일반 공급 | |
| 제모 크림 | Nair | 일반 공급 | |
| 트랜스덕터 크림 | 파커 | ||
| 트랜스덕터 젤 | 파커 | ||
| 표준 거즈 패드 | McKeeson | 일반 공급 | |
| 테이프 | Durapore | 일반 공급 | |
| 노즈 콘 | 마취 전달용 | ||
| 물 | |||
| 수의사 눈 연고 | Puralube | 일반 공급 | 건조를 방지하기 위해 |
| 면 팁 애플리케이터 | 일반 공급 USB | ||
| 플래시 드라이브 | 일반 공급 |
참고문헌
- Upadhya, B., Taffet, G. E., Ping, C., Kitzman, D. W. Heart failure with preserved ejection fraction in the elderly: scope of the problem. Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 83, 73-87 (2015).
- Mclaughlin, V. V., Archer, S. L., et al.
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재인쇄 및 허가
