Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Спектроскопия ЯМР как надежный инструмент для быстрой оценки липидного профиля рыбьего жира добавки

25.5K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/55547

⸱

1 мая 2017 г.

 , 

В этой статье

Краткое содержание

Здесь, с высокой разрешающей способностью 1 Н и 13 С ЯМР (ЯМР) был использован в качестве быстрого и надежного инструмента для количественного и качественного анализа инкапсулированных добавок рыбьего жира.

Аннотация

Западная диета бедна п -3 жирных кислот, поэтому потребление рыбьего жира рекомендуется увеличить потребление этих необходимых питательных веществ. Целью данной работы является демонстрация качественного и количественного анализа инкапсулированных добавок рыбьего жира с использованием высокой разрешающей способностью 1 Н и 13 С ЯМР - спектроскопии с использованием двух различных ЯМР инструментов; 500 МГц и инструмент 850 МГц. Оба протона (1 Н) и углерода (13 С) ЯМР - спектры могут быть использованы для количественного определения основных составляющих добавок рыбьего жира. Количественное липидов в добавок рыбьего жира достигается за счет интеграции соответствующих сигналов ЯМР в соответствующей 1D спектров. Результаты , полученные с помощью 1 Н и 13 С ЯМР находятся в хорошем согласии друг с другом, несмотря на разницу в разрешающей способности и чувствительности между двумя ядрами и двумя инструментами. 1 Н - ЯМР предложениеса более быстрый анализ по сравнению с 13 С - ЯМР, так как спектр может быть записан менее чем за 1 мин, в отличие от 13 С - ЯМР анализа, который длится от 10 мин до одного часа. Спектр ЯМР 13 С, однако, намного более информативным. Это может обеспечить количественные данные для большего числа индивидуальных жирных кислот и может быть использовано для определения позиционного распределения жирных кислот на цепи глицерина. Оба ядра могут обеспечить количественную информацию только в одном эксперименте без необходимости очистки или разделения шагов. Напряженность магнитного поля главным образом влияет на спектры ЯМР 1 Н в связи с его низким разрешением по отношению к 13 С - ЯМР, однако, даже более низкой стоимости ЯМР инструменты могут быть эффективно применены в качестве стандартного метода в пищевой промышленности и лабораторий по контролю качества.

Введение

Потребление п -3 жирных кислот в рационе, оказалось полезным против нескольких условий , таких как сердечные расстройства 1, 2, 3, 4 воспалительных заболеваний и диабета 5. Западная диета считается бедной в п -3 жирных кислот и , следовательно , потребление рыбьего жира рекомендуется для улучшения п -6 / п -3 баланс в питании 1 потребителя. Несмотря на недавнее увеличение потребления рыбы нефти дополнения, остаются вопросы о безопасности, достоверности и качестве некот....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

1. Подготовка образцов ЯМР

Примечание: Внимание, пожалуйста, обратитесь все соответствующие паспорта безопасности материала (MSDS) перед использованием. Дейтерированный хлороформ (CDCl 3) используется в приготовлении образца является токсичным. Пожалуйста, используйте все необходимые правила безопасности при проведении пробоподготовки, включая использование вытяжного шкафа и средств индивидуальной защиты (защитные очки, перчатки, лабораторный халат, полные штаны длины, закрытые носок обуви).

  1. Получение 1 Н и 13 С образцов
    1. Извлечение 120 мкл (~ 110 мг) рыбий жир из диетич....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

1 Н и 13 С ЯМР - спектры были собраны для коммерчески доступных добавок рыбьего жира с использованием двух инструментов ЯМР; 850 МГц и спектрометр 500 МГц. Эти спектры могут быть использованы для количественного определения компонентов рыбьего жира, такие как докозагексаеновая кислота (DHA) и эйкозапентаеновая кислота (EPA), а также другие соединения , таких как п -1 ацильных цепи и питателен важный показатель , таких как п -6 / п -3 соотн.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Модификации и стратегии по устранению неполадок

Спектральный качество. Ширина линии сигнала ЯМР и, таким образом, разрешение спектра ЯМР сильно зависит от подкладок, который представляет собой процесс для оптимизации однородности магнитного поля. Для рутинного анализа, 1D Шиммирование адекватно и 3D Шиммирование не требуется, при условии, что она выполняется персоналом ЯМРА на регулярной основе. Если это не тот случай, 3D прокладки должны быть выполнены перед проведением анализ.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы не имеют ничего раскрывать.

Благодарности

Эта работа была поддержана пищевыми продуктами для здоровья Discovery Темы в Университете штата Огайо и Департамент пищевой науки и технологии в Университете штата Огайо. Авторы хотели бы поблагодарить ЯМР-центр в Университете штата Огайо и ЯМР-центр в Университете штата Пенсильвания.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Avance III 850 ЯМР приборBruker
Avance III 500 ЯМР приборBruker
TCI 5 мм зондBrukerHelium охлаждаемый инверсный (протонный детектированный) ЯМР-зонд с тремя независимыми каналами (1H, 13C, 15N)
BBO prodigy 5 мм зондBrukerЗонд для наблюдения с азотным охлаждением (с обнаружением X-ядер) с двумя каналами; один для обнаружения 1H и 19Fи один для X-ядер (охватывающий от 15N до 31P)
Спиннер турбинBrukerизготовлен из полимерных материалов и имеет резиновое уплотнительное кольцо для надежного удержания трубки ЯМР на месте
Topspin 3.5Bruker
дейтерированный хлороформSigma-Aldrich  865-49-699,8 атом % D, содержит 0,03 TMS
2,6-Di-tert-бутил-4-метилфенолSigma-Aldrich  128-37-0чистота >99%
рыбьего жира
ЯМР пробиркиNew EraNE-RG5-75мм OD Routine " R” Пробирка для образцов ЯМР серии
BSMSBrukerСистема управления системами Bruker
ЯМР Образцы ; устройство системы управления

Ссылки

  1. Simopoulos, A. P. The importance of the ratio of omega-6/omega-3 essential fatty acids. Biomed. Pharmacother. 56 (8), 365-379 (2002).
  2. Goodnight, S. H. Jr, Harris, W. S., Connor, W. E. The effects of dietary omega 3 fatty ac....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Протонный ЯМРЯМР на ядрах углеродаанализ липидовколичественное определение жирных кислотпозиционное распределениенапряженность магнитного поляподготовка проб