Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Перенакопления Ileectomy индуцированной желчи в кишечнике мыши

9.1K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/55728

⸱

21 августа 2017 г.

 ,  ,  , 

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Тонкой кишки зависимых желчные кислоты реабсорбции и обратной связи торможение синтеза печени желчных кислот имеет важное значение для системного гомеостаза и здравоохранения. В этом исследовании мы описываем модель мыши для подвздошной резекции для оценки ileectomy индуцированной желчь мальабсорбции, перенакопления и токсичности в кишечнике мыши.

Аннотация

Кишечные резекции является общий терапевтический подход для человека заболеваний, как ожирение, воспалительные заболевания кишечника, болезнь Крона и рака толстой кишки, что часто приводит к тяжелой короткого кишечника синдром как неблагоприятные последствия, включая диарею желчных кислот, обезвоживание, помехи электролита и всасывания питательных веществ. Здесь мы представляем модель мышиных ИЛЕАЛ резекции, называют ileectomy, оценить ткани коммуникации и поддержания системных гомеостаза. После ИЛЕАЛ резекции циркулирующей крови лишена постоянно фактор роста фибробластов подвздошной кишки конкретных эндокринных гормонов 15 (FGF15), который выпускает его эндокринными ингибиция синтеза желчных кислот в печени. В сочетании с ростом производства и отменено реабсорбции после удаления подвздошной кишки желчных кислот мышей, которые перенес операцию страдают от перенакопления соли желчи в кишечнике и связанных понос, заболеваемости и смертности. Роман использование модели хирургии, введенной в этом исследовании может обеспечить механистическим и функциональных понимание ИЛЕАЛ контроль системных метаболических регулирования в физиологии и патологии.

Введение

В современных биомедицинских исследований генетически модифицированных животных модели широко используются подбирать понимание заболеваний человека. В частности для изучения молекулярных регулирования, а также индуцированной биологические эффекты были использованы ткани или клетки конкретные выгоды и потери функции генов. Несмотря на успехи в манипулировании целевых генов в естественных условияхявляются сохраняющиеся ограничения. Первый, многие клетки или ткани конкретные изъятия будет влиять на несколько органов. Например эпителиальные гена удаления устранит выражение в эпителия нескольких тканей. Кроме того даже если исключить ограничивается конкретной ткан....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

животных протокол был рассмотрен и одобрен институциональный уход животных и использования Комитетом на случай Western Reserve University School of Medicine и был проведен в соответствии с руководством национальных институтов здравоохранения (НИЗ) для Уход и использование лабораторных животных (8-е издание, 2011). Мышей были умерщвлены методами, совместимый с американской ветеринарной медицинской ассоциации (AVMA) руководящие принципы для эвтаназии животных (издание 2013). Мужчина, 8-16 неделя старый мышей C57Bl/6J, были использованы в настоящем Протоколе. Мышей были размещены в среде темно/свет цикла 12 ч.

1. Предварительная Оперативная по....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Процедуры для ileectomy показано на рисунке 1. Первый этап включает в себя подготовку мыши брюшной кожи, делая разрез брюшной и полностью разоблачить кишечника (рис. 1A-C) с помощью ретракторы. Далее, слепой кишки мыши был расположен (рис. 1D); Учитывая, что ее размер и форма делают его легко узнаваемый ориентир. Слепой кишки, подвздошной кишки и частью дистальной то.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Для выполнения успешной ileectomy, превосходной верхней брыжеечной артерии должны быть лигируют заранее блокировать приток крови к resecting сегмента. Ишемические сегмент подвздошной станет темно-фиолетовый после перевязки. Необходимо затем полностью резецируется ИЛЕАЛ сегмента. Нормальное кровоснабжение должна обеспечиваться на Нераспределенная заканчивается. Это важно для предотвращения кровотечения и неправильного удаления, который можно легко причиной хирургического сбой ишемического некроза после сшивания. Во время .......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы не имеют ничего сообщать.

Благодарности

Это исследование поддерживается Фондом тома Петерсона и низ предоставляют R01-HL119780 (Джайн, MK).

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Диссекционный микроскопOlympusSZ61для хирургии 
Регулятор температуры животныхPhysitemp Instruments, Inc.TCAT-2LVДля контроля температуры тела
Изофлуран анестетик вапорайзерVetEquip  911104Для анестезии
Рассекционные щипцы  Fine Science Tools, Inc.11274-20Для хирургии 
Ножницы  Fine Science Tools, Inc.14084-08Для хирургии 
Иглодержатель  Робоз Хирургический Инструмент Ко.RS-7882Для хирургии 
Микро ножи-игольчатое лезвиеFisher Scientific10318-14Для хирургии 
6-0 монофиламентный шовный материалEthicon1698GДля закрытия кожи живота
7-0 шелковый шовEthicon766GДля лигирования
8-0 монофиламентный шовный материалEthicon1714GДля анастомоза
Хирургические губкиDynarex Corp.3333Для хирургии 
Маленькие аппликаторы с ватными наконечниками Fisher Scientific23-400-118Для хирургии 
ИзофлуранPiramal Healthcare Limited66794-013-25Для анестезии
Бупренорфина гидрохлоридReckitt-Benckiser Pharmaceuticals12496-0757-1Для обезболивания
0,9% натрия хлорид для инъекцийB. Braun Medical Inc.0264-7800-10Для мытья/инъекций
раствор для приготовления йода повидонаDynarex Corp.1413Для подготовки кожи
Ветеринарная мазь PuralubeDechra Veterinary Products17033-211-38Для защиты глаз
Лосьон для снятия волосChurch & Дуайт Ко., Инк.Для подготовки кожи
Отделение интенсивной терапииThermoCareFW-1Для послеоперационного восстановления
DietGel recoveryClearH2O72-06-5022Для послеоперационного восстановления
Aurum набор для общей РНК жировой и волокнистой тканиBio-Rad7326830Для выделения РНК
iScript супермикс обратной транскрипции для ОТ-кПЦРBio-Rad1708841Для анализ обратной транскрипции
TaqMan fast advanced master mixApplied Biosystems/Life Technologies4444965Для анализа QPCR
Набор для анализа общей желчной кислотыGenzyme DiagnosticDZ042A-K01Для анализа желчных кислот
C57BL/6J Лаборатория Джексона

Ссылки

  1. McLeod, R. S. Surgery for inflammatory bowel diseases. Dig Dis. 21, 168-179 (2003).
  2. Hancock, L., Windsor, A. C., Mortensen, N. J. Inflammatory bowel disease: the view of the surgeon. Colorectal Dis. 8, 10-14 (2006).
  3. Polle, S. W., Bemelman, W. A.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Избыточное накопление желчных кислотрезекция кишечникамодель на мышахгормон FGF15анализ содержания желчных кислоткишечный анастомозанализ желудочно-кишечного трактаколичественная ПЦРтоксичность желчных солей