منطقة سطح الرئة الداخلية (عيسى) هو معيار حاسم لتقييم مورفولوجيا الرئة وعلم وظائف الأعضاء في أمراض الرئة والتجدد السنخي الناجم عن الاصابة. نحن تصف هنا طريقة موحدة التي يمكن أن تقلل من التحيز قياس عيسى في كل من استئصال رئوي الرئوي ونماذج الفئران زرع الاصطناعية.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
طريقة موحدة لقياس المساحة الداخلية الرئة السطحية عن طريق استئصال رئوي الماوس وزرع الاصطناعية
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
تتغير التشكل الرئوي وعلم وظائف الأعضاء ووظائف الجهاز التنفسي في كل من الظروف الفسيولوجية والمرضية. تعد مساحة سطح الرئة الداخلية (ISA) ، التي تمثل قدرة تبادل الغازات في الرئة ، معيارا حاسما لتقييم وظيفة الجهاز التنفسي. ومع ذلك ، يمكن أن يؤثر تحيز المراقب بشكل كبير على القيم المقاسة للمعلمات المورفولوجية للرئة. يقلل البروتوكول الذي نصفه هنا من الاختلافات أثناء قياسات معلمتين مورفولوجيتين مستخدمتين لحساب ISA: حجم الرئة الداخلي (ILV) ومتوسط الاعتراض الخطي (MLI). باستخدام ISA كمعامل مورفومتري ووظيفي لتحديد نتيجة التجديد السنخي في كل من نماذج استئصال الالتهاب الرئوي (PNX) ونماذج الفئران المزروعة بالأطراف الاصطناعية ، وجدنا أن زيادة ISA بعد علاج PNX قد تم حظرها بشكل كبير عن طريق زرع طرف اصطناعي في التجويف الصدري < فئة sup = 'xref'>1. لا يتوقع فقط أن تؤدي القدرة على تحديد كمية ISA بدقة إلى تحسين موثوقية وقابلية تكرار دراسات وظائف الرئة في نماذج التجديد السنخية الناجمة عن الإصابة ، ولكن أيضا لتعزيز الاكتشافات الميكانيكية لأمراض الرئة المتعددة.
المقدمة
الوظيفة الأساسية للرئة هي تبادل الأكسجين وثاني أكسيد الكربون بين الأوعية الدموية والغلاف الجوي. أمراض الرئة مثل خلل التنسج القصبي الرئوي (بد)، مرض الانسداد الرئوي المزمن (كوبد)، والتهابات الجهاز التنفسي الحادة، ويؤدي إلى انخفاض عيسى 2 . وقد طور الباحثون الذين يدرسون أمراض الرئة العديد من الطرق الكمية لتقييم التغيرات المورفولوجية في الرئتين، بما في ذلك ملي، إلف، وعدد من وحدات تبادل الغاز، عيسى، والالتزام أنسجة الرئة 2 ، 3 . دراسات رائدة من قبل ويبل وآخرون. 4 و دوغويد إت آل. 5 معا أن....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
جميع الإجراءات المستخدمة في هذا البروتوكول نفذت وفقا للتوصيات الواردة في المبادئ التوجيهية لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية للمعهد الوطني للعلوم البيولوجية، بكين. تم إيواء الفئران الذكور من نوع سد-1 البالغ عمرها 8 أسابيع في منشأة خالية من مسببات الأمراض (سف) حتى أجريت التجارب. أجريت العمليات الجراحية باستخدام الفئران تخدير تماما ( أي دون أي ردود قرصة أخمص القدمين). بعد الجراحة، تم الاحتفاظ بالفئران في غرفة دافئة رطبة مع ما يكفي من الغذاء والمياه العذبة. تم التضحية الفئران باستخدام جرعة زائدة من مخدر تسليمها عن طريق الحقن داخل الصفاق.
1. ماوس ينكس جرا....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
أجرينا هنا تجربة مع مجموعة معالجة ينكس ومجموعة زرع الاصطناعية (الاصطناعية). هذه المجموعات هي نفس المجموعات المستخدمة في دراسة نشرت سابقا من مجموعتنا البحثية 14 .
يظهر الماوس وينكس وإجراءات زرع الاصطناعية في الشكل 2 . وتستخدم الفئران الذكور سد-1 من العمر 8 سنوات للعمليات الجراحية وللتقدير ا.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
في هذا البروتوكول، ونحن نقدم أوصاف مفصلة عن قياس المعلمات الرئوية بعد الماوس اليسار الرئة ينكس وزرع الاصطناعية. ويعتبر عيسى الآن مقياسا رئيسيا لتقييم وظيفة الجهاز التنفسي في العديد من الأمراض الرئوية وفي تجديد السنخية الناجم عن الإصابة. ومع ذلك، على الرغم من أن مجتمع البحث الرئوي في اتفاق حول فائدة عيسى كمقياس مفيد، حتى الآن، كان هناك القليل من الاعتبار لتوحيد قياس إلف و ملي، وهما البارامترات المستخدمة لحساب عيسى. من الواضح، كما هو الحال مع أي قياس، من المهم محاولة الحصول على البي.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب ليس لديهم ما يكشف.
شكر وتقدير
ويود المؤلفون أن يعترفوا بالمعهد الوطني للعلوم البيولوجية، بيجين، على المساعدة. وأيد هذا العمل من قبل مؤسسة العلوم الطبيعية لبلدية بكين (رقم Z17110200040000).
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| طقم كي منخفض التكلفة | أدوات العلوم الدقيقة | 18010-00 | |
| مقص نويز | أدوات العلوم الدقيقة | 15012-12 | |
| ملقط نمط | قياسي أدوات العلوم الدقيقة | 11000-12 | |
| Castroviejo حاملات الإبر الدقيقة | أدوات العلوم | الدقيقة 12060-01 | |
| مقاطع السفينة | أدوات العلوم الدقيقة | 18374-44 | |
| I. V. Cannula-20 قياس | Jinhuan Medical Product Co.، LTD. | 29P0601 | |
| خياطة جراحية | Jinhuan المنتجات الطبية المحدودة. | F602 | |
| منصة التنبيب الماوس | Penn-Century، Inc | نموذج MIP | |
| منظار الحنجرة الحيواني الصغير | Penn-Century، Inc | نموذج LS-2-M | |
| TOPO جهاز التنفس الصناعي للحيوانات الصغيرة | كينت Scientific | RSP1006-05L | |
| وسادة حرارية | معدات ستيوارت | SBH130D | |
| ملح الصوديوم Pentobarbital | Sigma | P3761 | |
| ملح الصوديوم الهيبارين | Sigma | H3393 | |
| الهيماتوكسيلين | Sigma | GHS132 | |
| محلول Eosin Y ، الكحولي | Sigma | HT110116 | |
| 10 مل ماصة | حرارية | 170356 | |
| بارافورمالديهايد | سيجما | P6148 | |
| OCT الأنسجة المركبة | - Tek | 4583 | |
| آلة التقطيع بالتبريد | Leica | CM1950 | |
| قوالب قاعدة يمكن التخلص | منها فيشر هيلث كير | 22-363-553 | |
| 18 إبرة قياس | بيكتون ديكنسون | 305199 | |
| بوفيدون اليود | فيشر Scientific | 19-027132 | |
| 70٪ إيثانول | مجموعات ضخ فيشر العلمي | BP82011 | |
| لفردي استخدام | Weigao | SFDA 2012 3661704 | |
| الفوسفات المخزنة المالحة | Gibco | 10010023 | |
| الأشرطة | 3M سكوتش | 8915 | |
| وسادة القطن | Vinda | Dr.P | |
| سيليكون بدلة | حسب الطلب | ||
| مجهر برايتفيلد | أوليمبوس | VS120 | |
| أداة المسطرة | أدوبي فوتوشوب |
المراجع
- Liu, Z., et al. MAPK-Mediated YAP Activation Controls Mechanical-Tension-Induced Pulmonary Alveolar Regeneration. Cell Rep. 16 (7), 1810-1819 (2016).
- Thurlbeck, W. M. Internal surface area and other measurements in emphysema. Thorax. 22
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
