실시간으로 개발을 시각화 하기 위해 다중 광자 시간 경과 영상: 마이그레이션 Zebrafish 태아 신경 크레스트 셀의 시각화

Antionette L. Williams; Brenda L. Bohnsack

doi:10.3791/56214

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방법 논문

실시간으로 개발을 시각화 하기 위해 다중 광자 시간 경과 영상: 마이그레이션 Zebrafish 태아 신경 크레스트 셀의 시각화

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DOI:

10.3791/56214

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2017년 8월 9일

Antionette L. Williams¹ , Brenda L. Bohnsack¹

¹Department of Ophthalmology and Visual Sciences, Kellogg Eye Center, University of Michigan

이 논문에서

요약

레이저 스캐닝 현미경 검사 법 긴 파장 다중 광자 형광 여기의 고급 광학 기술의 조합 안내 (sox10:EGFP)에 안내 (foxd3:GFP) zebrafish 태아 신경 크레스트 마이그레이션의 고해상도, 3 차원, 실시간 영상 캡처 구현 되었습니다.

초록

선 천 성 눈 craniofacial 변칙 중단 신경 크레스트, 몸 전체에 수많은 세포 유형을 철새 줄기 세포의 일시적인 인구에에서 반영 합니다. 신경 크레스트의 생물학 이해 제한, 공부 vivo에서 될 수 있는 유전자 세공 모델의 부족과 실시간으로 반영 되었습니다. Zebrafish는 신경 크레스트 등 철새 세포 인구를 공부에 대 한 특히 중요 한 개발 모델입니다. 개발 눈에 신경 크레스트 마이그레이션 검사, 레이저 스캔 현미경 긴 파장 다중 광자 형광 여기의 고급 광학 기술의 조합 같이 sox10 와 foxd3 가 되어 초기 신경 크레스트 차별화 규제 가능성이 신경 크레스트 셀에 대 한 마커를 대표 하는 수많은 동물 모델에서 유전자 변형 zebrafish 태아, 즉 Tg (sox10:EGFP) 및 안내 (foxd3:GFP)에 개발 눈의 고해상도, 3 차원, 실시간 동영상 캡처 구현 되었습니다. 다중 광자 시간 경과 영상 동작 및 초기 눈 개발에 기여 두 신경 크레스트 세포 인구의 철새 패턴 분별 하 사용 되었다. 이 프로토콜 예를 들어, zebrafish 신경 크레스트 마이그레이션 중 시간 경과 비디오를 생성 하기 위한 정보를 제공 하 고 많은 구조는 제 브라와 다른 모델 유기 체에서의 초기 개발을 시각화에 추가 적용할 수 있습니다.

서론

선 천 성 눈 질환 아동 실명을 일으킬 수 있으며 종종 두개골 신경 크레스트의 이상 때문. 신경 크레스트 세포는 신경 관에서 발생 하 고 몸 통하여 수많은 직물을 형성 하는 일시적인 줄기 세포. ¹ ^, ² ^, ³ ^, ⁴ ^, ⁵ 신경 크레스트 셀, prosencephalon 및 mesencephalon에서 파생 된 게 상승 뼈와 연골은 midface 정면 지역, 그리고 홍 채, 각 막, 배수 채널 및 sclera 눈의 앞쪽 세그먼트에서. ⁴ ^, ⁶ ^, ⁷ ^, Rhombencephalon 형태는 인 두 아치, 턱, 그리고 심장 유출 관에서 ⁸ 신경 크레스트 셀. ¹ ^, ³