يصف لنا النقل المتعدد الوسائط غير الغازية التصوير النهج القائم على التصوير المقطعي الجزيئية الصغيرة-الأشعة المقطعية والأسفار لتقييم طولية من طراز تليف الرئة الماوس الناجم عن تقطير إعطاء مزدوجة من بليوميسين.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
متعدد الوسائط التصوير النهج استناداً إلى التصوير المقطعي الجزيئية الصغيرة-الأشعة المقطعية والأسفار لتقييم طولية لتليف الرئة الناجمة عن بليوميسين في الفئران
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
تليف رئوي مجهول السبب (IPF) هو مرض الرئة قاتلة تتميز بتدمير بنية الرئة، مما يسبب تدهورا كبيرا في وظائف الرئة والوفاة اللاحقة من فشل في الجهاز التنفسي تدريجيا ولا رجعة فيها.
وقد حملت الآلية المرضية للفريق الحكومي الدولي في نماذج حيوانية تجريبية بليوميسين الإدارة. في هذه الدراسة، ونحن التحقيق طراز ماوس مثل الفريق الحكومي الدولي الناجم عن تقطير بليوميسين إعطاء مزدوجة. تقييمات النسيجي القياسية المستخدمة لدراسة تليف الرئة إجراءات المحطة الغازية. والهدف من هذا العمل رصد تليف الرئة عن طريق موسع تقنيات التصوير مثل التصوير المقطعي الجزيئية الفلورسنت (FMT) والصغرى-قيراط يمكن أن تمثل هذه التقنيات اثنين التحقق من صحتها مع النتائج التي توصل إليها علم الأنسجة ثورية وظيفية لرصد الوقت الحقيقي غير الغازية من شدة المرض الحكومي والتقدم. الدمج بين نهج مختلفة تمثل خطوة أخرى لفهم هذا المرض الحكومي، حيث يمكن ملاحظة الأحداث الجزيئية التي تحدث في حالة مرضية مع معاهدة المواد الانشطارية، ويمكن رصد التغيرات التشريحية اللاحقة بالدقيقة-قيراط
المقدمة
تليف رئوي مجهول السبب (IPF) مرض الرئة المزمن مع الانخفاض التدريجي لوظائف الرئة التي للأسف غالباً ما تكون قاتلة في غضون أربع سنوات من تشخيص1. السمات الرئيسية لمقترحات ترسب المصفوفة خارج الخلية، وانتشار تنتجها الخلايا الليفية، ولكن الآلية المرضية غير مفهومة تماما حتى الآن. الفرضية الأكثر المعتمدة هو أن دورات متعددة لإصابات الرئة يسبب تدمير الخلايا الظهارية السنخية تؤدي إلى تغيير انتشار دورة الخلية الوسيطة، وتراكم مبالغ فيها الخلايا الليفية وميوفيبروبلاستس، و مصفوفة زيادة الإنتاج. الوسطاء المتورطين في هذه العمليات مثل مصفوفة ميتالوبروتيناسيس (يتولى) وقد تم العثور على dysregulated في التليف التنمية البشرية الحكومي أو في النماذج الحيوانية المستحثة ب....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
جميع التجارب على الحيوانات المبينة في هذا التقرير قد وافقت لجنة الرفق بالحيوان داخلية للتجارب الحيوانية فارماسيوتيسي كايسي وايراسموس مولودية تحت رقم البروتوكول: EMC 3349 (138-14-07) الامتثال "رق" 63/2010 التوجيه الأوروبي، أقر الإيطالية 26/2014 و "دليل لرعاية واستخدام لمختبر الحيوانات" المنقحة23.
ملاحظة: قبل الاستخدام، الإناث من الفئران C57Bl/6 (7-8 أسابيع من العمر) الفطرية كانت أقلمة لمدة 7 أيام على الأقل للظروف المحلية فيفاريوم (درجة حرارة الغرفة: 20-24 درجة مئوية؛ والرطوبة النسبية: 40-70%؛ ودورة الضوء الظلام 12-ح)، إمكانية الوصول مجاناً إلى تشو القوارض القياسية و خففت من ماء الصنبور.
1-إعط....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
ولاحظ القرار العفوي للآفات تليف الرئة بعد الإدارة بليوميسين واحدة والتغييرات الهيكلية المعتدلين تسليط الضوء على حدود هذا النموذج ثلاثة أسابيع. يمكن أن يقوم إلا العلاج الوقائي بسبب نافذة علاجية ضيقة تمثل الممارسة السريرية17.
هنا، نحن تبين أن لدينا بروتوكول لتقطير إعطاء بليوميسين مزدوجة قادرة على تطوير طويلة الأمد تليف الرئة في الفئران18. ويبين الشكل 1
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
وعلى الرغم من العديد من المجموعات البحثية مع التركيز على تطوير أدوية جديدة لعلاج الحكومي، في هذه اللحظة اثنين فقط المتاحة للمرضى. هناك حاجة طبية عاجلة لإيجاد علاجات أكثر فعالية7 نظراً لأن فقط الرئة ترانسبلانتاتيونيس قادرة على إطالة البقاء على قيد الحياة من 4-5 سنوات26. هو الشرط الأساسي للطب متعدية الجنسيات واستحداث أدوية جديدة توفر نموذج الحيوان الذي يحاكي الميزات للفريق الحكومي الدولي، وفي الدراسات التدخلية التي هي تنبؤية للنجاح في العيادة. ومع ذلك، هو فائدة النماذج الحيوا.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب يعلن أن لديهم لا تضارب في المصالح.
شكر وتقدير
الكتاب يود أن يشكر الدكتور دانييلا بومبيليو وروبرتا سيكسيمارا للحصول على مساعدة تقنية.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| FMT 2500 نظام التصوير المقطعي الفلوري | Perkin Elmer Inc. | المنشئ | |
| MMPsense 680 | Perkin Elmer Inc. | NEV10126 | الحماية من الضوء ، قم بتخزين المسبار عند 4 درجات ؛ برنامج C |
| TrueQuant | Perkin Elmer Inc. | ||
| أنثى فطرية C57BL / 6 | San Pietro NatisoneHorst ، هولندا (UD) ، ؛ | قبل الاستخدام ، تم تأقلم لمدة 5 أيام على الأقل مع ظروف الvivarium | |
| المحلية Isoflurane | ESTEVE spa | 571329.8 | لا تستنشق |
| عداد الخلايا الآلي | Dasit XT 1800J | محلول | |
| ، 0.9٪ كلوريد الصوديوم (كلوريد الصوديوم) | Eurospital | 15A2807 | |
| Quantum FX Micro-CT ماسح ضوئي ؛ | شركة بيركين إلمر | ||
| كبريتات البليومايسين من Streptomyces Verticillus | سيجما | B2434 | |
| معالج الأنسجة الأوتوماتيكي | مختبرات ATP700 Histo-Line | ATP700 ؛ | |
| نظام التضمين | EG 1160 Leica Biosystems | EG 1160 | |
| Rotary microtome | Slee Cut 6062 | ||
| الماسح الضوئي الرقمي للشرائح | NanoZoomer S60 ، Hamamatsu Photonics | ||
| NIS-AR برنامج تحليل الصور ؛ | نيكون | ||
| ماسون s ثلاثي الألوان تلطيخ | مختبرات | ||
| 10٪ فورمالين محايد | مخزن Sigma | HT5012-1CS | |
| Penn-century DP-4M Inflatlator الطاقة الجافة | Penn-Century | DPM-EXT | |
| PE190 أنابيب طبية صغيرة | 2 أدوات بيولوجية snc | BB31695-PE / 8 | |
| حقنة بدون إبرة 5 مل | Terumo | SS * 05SE1 | قطع لوحات المكبس بواسطة مقص |
| هاميلتون 0.10 مل (موديل 1710) | Gastight | 81022 | |
| Discofix 3-way Stopcock | Braun | 4095111 | |
| حقنة مع إبرة 1 مل | حل الموافقة المسبقة عن علم | 3،071،260،300،320 | استخدم بدون إبرة |
| أنابيب التغذية البلاستيكية 18 ga x 50 مم | 2 الأدوات البيولوجية snc | FTP-18-50 | قطع بشكل غير مباشر الحافة ؛ |
المراجع
- Wynn, T. A. Integrating mechanisms of pulmonary fibrosis. J. Exp. Med. 208 (7), 1339-1350 (2011).
- Wynn, T. A., Ramalingam, T. R. Mechanisms of fibrosis: therapeutic translation for fibrotic disease. Nat. Med. 18 (7), 1028-1040 (2012).
- Moore, B. B.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
