Qui, descriviamo un dispositivo di laboratorio programmabile che può essere utilizzato per creare estratti di aerosol di sigaretta elettronica e fumo di sigaretta convenzionale. Questo metodo fornisce un utile strumento per effettuare confronti diretti tra sigarette convenzionali e sigarette elettroniche ed è un punto di ingresso accessibile in ricerca di sigaretta elettronica.
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Articolo metodologico
Un microcontrollore azionato il dispositivo per la generazione di estratti liquidi da Aerosol elettronico e fumo di sigaretta sigaretta convenzionale
In questo articolo
Sommario
Abstract
Sigarette elettroniche sono il prodotto più popolare di tabacco tra medie e liceali e sono il prodotto di tabacco alternativi più popolare tra gli adulti. Alta qualità, ricerca riproducibile sulle conseguenze dell'uso della sigaretta elettronica è essenziale per la comprensione emergenti preoccupazioni di sanità pubblica e la lavorazione di prova basato su politica di regolamentazione. Mentre un numero crescente di documenti discutere sigarette elettroniche, c'è poca coerenza nei metodi attraverso gruppi e molto poco consenso sui risultati. Qui, descriviamo un dispositivo di laboratorio programmabile che può essere utilizzato per creare estratti di aerosol di sigaretta elettronica e fumo di sigaretta convenzionale. Questo protocollo dettagli istruzioni per il montaggio e il funzionamento di detto dispositivo e viene illustrato l'utilizzo dell'Estratto generato in due applicazioni di esempio: un'analisi di attuabilità in vitro delle cellule e la gas-cromatografia spettrometria di massa. Questo metodo fornisce uno strumento per effettuare confronti diretti tra sigarette convenzionali e sigarette elettroniche ed è un punto di ingresso accessibile in ricerca di sigaretta elettronica.
Introduzione
Nonostante uno sforzo concentrato dalle organizzazioni di salute, l'uso del tabacco prodotto rimane la principale causa di morte prevenibile in tutto il mondo, con la maggior parte di questi decessi attribuiti a sigaretta fumatori1. Da quando è entrata sul mercato nel 2003, sigarette elettroniche stanno crescendo in popolarità tra gli utenti dei prodotti del tabacco. Attualmente, le sigarette elettroniche sono l'alternativa più popolare di sigarette convenzionali tra adulti americani (~ 5%)2 e il sistema di consegna di nicotina più popolare tra medio (~ 5,3%) e liceali (~ 16%)3. Se le tendenze att....
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Protocollo
1. montaggio del dispositivo
- Fissare un 100ml Buchner boccetta (Figura 1, #4) ad un anello in acciaio stand e creare una trappola vuoto riempiendolo con 50 g di cloruro di calcio per servire come diseccante. Tappare con un tappo di gomma attraverso-foro, avvolgere la giunzione di tappo con film di paraffina ed eseguire una pipetta attraverso il foro.
- Utilizzando la tubazione del vinile, collegare la pipetta che si estende dal tappo a un connettore del tubo flessibile di intersezione a t.
- Utilizzando la tubazione del vinile, collegare tra loro i due gorgogliatore (Figura 1, #2 e #....
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Risultati
Entro 24 ore dell'esposizione della vena ombelicale umana le cellule endoteliali a Estratto di fumo di sigaretta convenzionale (CSE) o aerosol sigaretta elettronica estrarre (EAE), vi è una significativa (controllo vs CSE P < 0,001; controllo vs EAE P < 0.01; n = 6) riduzione nell'attuabilità delle cellule (Figura 3A). Gli estratti sono stati generati con un profilo puffing di 2, 2 secondi, soffi di 55 mL al minuto e normalizzato basat.......
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Discussione
Elementi più critici del presente protocollo sono garantendo che il dispositivo è pulito all'inizio e fine di ogni estrazione, e garantendo che tutte le guarnizioni sono mantenute così che il flusso di aria rimane coerenza. Se il dispositivo non è adeguatamente pulito, c'è un rischio di carry over tra i campioni. Inoltre, se il dispositivo viene lasciato sporco per un lungo periodo di aerosol condensato tempo ed asciugato solvente può bloccare il sistema. Nota che è normale per lì per essere una caduta di pressione quand.......
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Dichiarazioni
Il programma di tabacco prodotto normativo Science Research Fellowship amministrato dalla Tulane University è finanziato da Altria Client Services Regulatory Affairs.
Ringraziamenti
Gli autori riconoscono l'assistenza del Dr. Robert Dotson della Tulane University Dipartimento di cellula e biologia molecolare per la sua assistenza nella redazione del manoscritto e Dr. James Bollinger Tulane University Dipartimento di chimica per la sua assistenza con il progetto di protocollo di spettrometria di massa. Gli autori inoltre riconoscono la Tulane University Dipartimento di cellula e biologia molecolare e il dipartimento di chimica dell'Università di Tulane per il supporto e l'uso dello spazio e attrezzature. Questo lavoro è stato supportato da un tabacco prodotto normativo Science Research Fellowship a C. Anderson dalla Tulane University School of Sci....
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Adattatore per montaggio a parete 12 V c.a./c.c. | Resistori Digi-Key | T1099-P5P-ND | |
| 2,2 Ohm | Digi-Key | A105635-ND | Utilizzato in tandem per generare la resistenza da 4,4 Ohm nella Figura 2A |
| Resistori da 330 Ohm | Digi-Key | 330QBK-ND | |
| 510 Base filettata | NJoy | N/A | Recuperato smontando una sigaretta |
| elettronica NJoy di seconda generazioneAcido acetico, acetone glaciale | Sigma-Aldritch | A6283 | |
| (grado cromatografico) | Sigma-Aldritch | 34850 | |
| Scheda di progetto per timbri di base | Digi-Key | 27112-ND | Questa scheda contiene il microcontrollore BS1, l'adattatore seriale, l'interruttore di alimentazione e un connettore pin cilindrico per l'adattatore per montaggio a parete CA/CC |
| Adattatore da USB a seriale di base | Digi-Key | 28030-ND | Un componente opzionale per consentire all'adattatore seriale BS1 di comunicare tramite USB |
| Buchner Flask (Vacuum Flask) 250 mL | VWR | 10545-854 | |
| Nastro trasparente | 3M | S-9783 | |
| Tubo in vinile trasparente, 3/8" | ID Watt | 443064 | |
| EGM-2 Terreno per colture cellulari endoteliali | Lonza | CC-3162 | |
| Etanolo | Pharmco-Aaper | ||
| flusso | Dwyer | VFA-23-BV | |
| Gascromatografo | Siringa Varian | 450-GC | |
| vetro, 10 mL | Sigma-Aldritch | Z314552 | |
| Siringa in vetro, 10 &; L | Hamilton | 80300 | |
| Grasso siliconico ad alto vuoto | Dow Corning | 146355D | |
| Fascetta stringitubo | di precisione Marca | 35125 | |
| Cellule endoteliali della vena ombelicale umana | ATCC | PCS-100-013 | |
| Spettrometro di massa | Varian | 300-MS | |
| Midget Impinger | Chemglass | CG-1820-01 | |
| Rosso neutro | Sigma-Aldritch | N4638 | |
| Film di paraffina | 3M | PM-992 | |
| Rullo di tenuta per piastre | BioRad | MSR0001 | |
| Guarnizione per piastre; Lamina | Thermo 276014 | ||
| Ring Stand 20" | American Educational Products | 7-G15-A | |
| Elettrovalvola (normalmente aperta) | US Solid | USS2-00081 | |
| Relè a stato solido | Digi-Key | CLA279-ND | |
| Morsetto per supporto | Eisco | CH0688 | |
| Filtro per siringa, PES, 0,22 um | Millipore | SLGP033RS | |
| Siringa, 10 mL | Siringa BD | 309604 | |
| tappo a foro passante, misura 6 | VWR | 59581-287 | |
| Pompa a vuoto | KNF Neuberger | N86KTP |
Riferimenti
- World Health Organization. WHO Report on the Global Tobacco Epidemic, 2011. , Italy. (2011).
- Weaver, S. R., Majeed, B. A., Pechacek, T. F., Nyman, A. L., Gregory, K. R., Eriksen, M. P. Use of electronic nicotine delivery systems and other tobacco products among USA adults, 2014: r....
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Ristampe e permessi
