يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

مختبر تربية الذباب مستقرة وأخرى ديبتيرا موسكويد

8.7K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/57341

⸱

أغسطس 3, 2018

 ,  ,  , 

في هذه المقالة

ملخص

ويرد إجراء لتربية الذباب مستقرة (Stomoxys calcitrans). يستخدم الإجراء المواد المتاحة محلياً لمكونات النظام الغذائي، والمعدات واللوازم.

الملخص

مستقرة الذباب، Stomoxys calcitrans، آفات خطيرة من الماشية والبشر، رفيق الحيوانات والحياة البرية في جميع أنحاء العالم. خلال آخر 20 + السنوات، أدت التغييرات في الممارسات الزراعية في موجات خطيرة من الذباب مستقرة في العديد من البلدان. اندلاع هذه تعطل الإنتاج الحيواني والترفيه البشرية أدى إلى المطالب العامة لزيادة جهود البحث وإدارة لمكافحة هذه الآفات. ويرد إجراء بسيطة وغير مكلفة لتربية الذباب مستقرة للدراسات المختبرية. يستخدم الإجراء مكونات النظام الغذائي المتاحة محلياً، والمعدات واللوازم. الإجراء الذي يمكن تكييفها لتربية الذباب موسكويد الأخرى بما في ذلك الوجه يطير يطير (أوتومناليس الذبابة)، ذبابة القرن (irritans المانسونيه)، وبيت (مستأنسة الذبابة). الإجراء ينتج مستقرة بوباريا ذبابة المتوسط البيض 12.5 ملغ و ~ 35% للكبار البقاء على قيد الحياة. يتم إنتاج حوالي 3000 الذباب في كل عموم.

المقدمة

مستقرة الذباب، Stomoxys calcitrans (لام)، هي هيماتوفاجوس الذباب الذي لدغات مؤلمة تعطيل سلوك رعي الماشية، وتسبب الألم والمعاناة لرفيق الحيوانات وتعطيل الأنشطة الترفيهية البشرية في جميع أنحاء العالم. وضع الذباب مستقرة غير ناضجة في تخمير المسألة الخضري، غالباً ما تكون ملوثة بالنفايات الحيوانية. تغيير الممارسات الزراعية والمحاصيل قد أسفرت عن موجات خطيرة من الذباب مستقرة في مخلفات المحاصيل والخضروات في أستراليا1وقصب السكر في البرازيل2، والأناناس في كوستاريكا3. على الرغم من أن فقط 14 الذباب مستقرا للحيوان الواحد تعتبر العتبة الاقتصادية4، ملاحظات ذباب أكثر من 2,000 للحيوان الواحد قد بذلت خلال الآونة الأخيرة تفشي5. تقليل الإنتاجية المضيف القرب من الصفر مثل مستويات الإصابة ويمكن أن تتسبب في وفيات6. نتيجة لتفشي زراعياً المرتبطة بها، الذباب مستقرة تحظى باهتمام متجدد، وازداد الطلب على المستعمرات مختبر كبير.

أما بالنسبة لجميع هولوميتامورفيك الحشرات والذباب مستقرة الحصول على جميع العناصر الغذائية اللازمة للنمو خلال المرحلة غير ناضجة أو اليرقات. ولذلك، هو عنصرا هاما في نظام تربية اليرقات في النظام الغذائي أو الركازة. يرقات ذبابة مستقرة وقد لوحظت النامية في مجموعة واسعة من ركائز في الميدان7 وأنها تعتمد على المجتمع الميكروبي ل الركيزة8،9. ركائز اليرقات الطبيعية تتكون أساسا من المتحللة أو تخمر المواد النباتية التي غالباً ما تكون ملوثة بالنفايات النيتروجينية.

لمختبر تربية، ركائز اليرقات يطير مستقرة عادة ما تتألف من مواد النباتية ومصدر نيتروجين المضافة. وقد استخدمت مواد عديدة للحمية اليرقات يطير مستقرة. يحاكي ركائز الطبيعية حمية اليرقات الأولى وشملت تخمير الشوفان سترو والحصان أو البقرة السماد10،11. وتشمل مصادر الكربوهيدرات القمح نخالة12،،من1314، البرسيم الوجبة12،،من1314 ووضعت صيغة تجارية حسب "التخصصات الكيميائية" الشركات المصنعة للرابطة (كسما، 33% نخالة القمح، وجبة البرسيم 27 في المائة، وحبيبات الخميرة 40 ٪)13،14،15،16. وتشمل مصادر النيتروجين الخميرة تعليق12ومسحوق السمك وبيكربونات الأمونيوم17. غالباً ما يتم تضمين مواد خاملة يستكثر في الوجبات الغذائية، بما في ذلك الشوفان بدن12وتفل قصب السكر13، الفيرميكوليت16، ورقائق الخشب13،18 وقشر الفول السوداني الأعلاف14.

هو هدف أساسي لتربية مختبر لإنتاج منتج شبيه الناحية الفسيولوجية "نوع البرية" ممكن بالتجارب المعملية سوف تسفر عن نتائج تعكس أولئك السكان الحقل. وهذا يتطلب أن التقليل في تربية والتحديد للحفاظ على الوراثية التنوع والموارد الغذائية، تكون مماثلة لتلك الموجودة في الميدان. الثانوي تهدف إلى تقليل العمل والنفقات. عنصرا رئيسيا للتقليل من النفقات هو استخدام مكونات النظام الغذائي المتاحة محلياً. ووضعت الطاير مستقرة تربية النظام قدم للوفاء بهذه الأهداف.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

1-البيض جمع (الشكل 1)

  1. إعداد كأس التحريض، ووضع نهاية واحدة من القماش في الكأس ~ 500 مل مليئة بالمياه الدافئة (~ 40 درجة مئوية). تتداخل مع الجانبين من الكأس وإصلاحها مع شريط المطاطي. أمثال نهاية فضفاض من القماش مرة أخرى عبر الجزء العلوي من الكأس.
  2. وسوف أوفيبوسيت مكان الذباب كأس التحريض في قفص من الذباب يوم 8 – 10 القديمة للإناث جرابيد ~ 2 حاء مستقرة على القماش.
  3. إزالة كأس التحريض من القفص وشطف البيض الخروج من القماش اجينج في مقلاة صغيرة مع الضغط زجاجة الغسيل.

2-إعداد عموم تربية اليرقات

  1. تعد المتوسطة (الكميات لعموم تربية 1)
    1. الجمع بين نخالة القمح (500 غرام)، ونجارة الخشب (200 غرام)، ومسحوق السمك (115 ز) في عموم الطبق البلاستيك ل 10 ومزيج جيد.
    2. إضافة بيكربونات الأمونيوم (50 غ) إلى الماء (~ 25 درجة مئوية، ومل 1600) وتخلط حتى يذوب.
    3. إضافة حل الماء إلى المكونات الجافة ومزيج للتأكد من لا مواد أونويتيد. من المستوى المتوسط في عموم ولكن لا ضغط.
  2. إضافة البيض يطير مستقرة
    1. تجعل ثلم ضحلة في المتوسط طول العموم.
    2. إيداع 1 مل بيض يطير مستقرة (~ 8,000 البيض) في ثلم مع البيض ماصة (الشكل 2).
      ملاحظة: مش ماصة البيض أدلى به قطع ماصة تخرج من بلاستيك في النقطة المطلوبة، إدراج 100 الشاشة وماصة الالتصاق معا مرة أخرى.
    3. تغطية البيض بطبقة رقيقة من المتوسطة لمنع جفاف.
    4. تغطي عموم مع قضية وسادة، أغلق مع الشريط المطاطي والتسمية. وضع الأحواض في غرفة اليرقات (23 ± 2 درجة مئوية، ورطوبة نسبية 30 – 50% و 12:12 [L:D] كبيرة h).
      ملاحظة: يتم تطوير اليرقات 10 – 14 يوما من وقت أوفيبوسيشن.

3-تجهيز الخوادر، اليرقات الانتقال إلى حافة المتوسط 7 – 9 أيام بعد أوفيبوسيشن وبوبارياتي بيوم 13 أو 14

  1. بابريا حلج القطن، تقع أساسا حول حواف المقلاة تحت القشرة تشكل على سطح المتوسط، بها ووضعها في وعاء نظيف.
  2. ملء عموم، مع بابريا، ½ إلى ¾ مليئة بالمياه. كسر كتل من بابريا والمتوسطة. مكونات البروتين ونخالة القمح المتوسطة غرقت بينما بوباريا > عوامة 1 يوم من العمر19.
  3. إزالة المواد العائمة وبابريا وبعض مكونات متوسطة مع مصفاة والمياه والصرف الصحي من خلال سلسلة من ثقب سيتا (#5، #7، #12، #20) لإزالة المتوسطة المتبقية. غربال #12 يجمع بابريا ويبقى #20 النفايات الصلبة من دخول استنزاف. أغسل بابريا بين ثقب سيتا مع بخاخ بالوعة.
  4. أشطف بوباريا، في غربال #12، في عموم نظيفة. ملء عموم ½ الكامل للمياه. صب بابريا العائمة في مصفاة والسماح لاستنزاف المياه الزائدة.
  5. نقل استنزفت بابريا لتجفيف الشاشة مع المروحة وترك حتى الجاف (الشكل 3).

4-الخوادر الجرف، طريقة بديلة لجمع بوباريا الجرف الخوادر18

ملاحظة: الجرف ومصنوع من قطعة من قطع البلاستيك من نهاية مقلاة الطبق 10 لتر (10.2 سم × 10.2 سم × سم 31.9 طويلة).

  1. تعد المتوسطة كما هو موضح في 2.1. تفتق المتوسطة في عموم ~2.5 سم عمق على واحدة من نهاية لسم ~7.5 عميق على الآخر.
  2. ضع الجرف في المتوسط في نهاية المطاف الضحلة عموم تربية والشريط لمنع اليرقات من الزحف إلى جانب الجرف (الشكل 4).
    1. تشبع الأسفنج (~14.5 x 9.0 x 4.5 سم3من السيليلوز المجددة) والانتهاء من ذلك في الماء ينقع القماش (30.5 x 42 سم2، والقطن) ووضع على الرف حوالي نصف بوصة من المتوسط.
  3. إضافة البيض كما هو موضح في 2.2 والمضي قدما كما كان من قبل.
    1. راجع مقالي يوميا لضمان بقاء الاسفنجة رطبة.
  4. عموم بابريا شطف من الجرف، والإسفنج والقماش في صحن نظيف وتصب في مصفاة مدة 14 يوما بعد أوفيبوسيشن.

5-مراقبة الجودة

  1. وزن كل من بوباريا المنتجة في عموم (الوزن الإجمالي).
  2. عزل بابريا 100 وتزن ووضعها في سم 9 طبق بيتري.
  3. عدد ونوع الجنس الكبار ~ 5 – 8 أيام في وقت لاحق لتحديد معدل ظهور ونسبة الجنس. تخزين أطباق بيتري مع البالغين ظهرت في ثلاجة لعد في وقت لاحق إذا لزم الأمر. يتم مسحه الذباب بشكل عيونهم وعرض لوحة فرونتو المداري20 أو الأعضاء التناسلية تحت تكبير منخفضة.
  4. سجل مجموع الوزن، وزن 100 بابريا، وعدد من الناشئة من الذكور والإناث.

6-إعداد الدم

  1. جمع الدم البقري الطازج من المسالخ محلية في دلاء ل 19 تحتوي على 70 غ من سترات الصوديوم ثنائي هيدرات تريباسيك في 500 مل الماء. إثارة الدم قوة لمدة 5 – 10 دقيقة وعادت إلى المختبر.
  2. ضغط الدم من خلال مصفاة لإزالة يتخثر وتقسيمه إلى حاويات ل 2، تسمية بالتاريخ لجمع وتخزين في ثلاجة (-20 درجة مئوية).
  3. إزالة حاوية من الثلاجة ومكان في الثلاجة اللازمة قبل يومين. يمكن استخدام الدم لأسابيع ~ 2 مرة مذاب وتخزينها في الثلاجة لمدة تصل إلى سنة واحدة.

7-صيانة الكبار

  1. إعداد الأقفاص، خط أسفل القفص مع ورقة جزار لتسهيل التنظيف.
  2. ضع 50 غ الخوادر يطير مستقرة الجافة (~ 3,500) في كل قفص. اكلس بضع ساعات إلى بضعة أيام بعد تجهيز الخوادر من الكبار.
  3. مكان دم الطازج غارقة منديل المؤنث على رأس كل قفص للتغذية. تبدأ التغذية خلال 24 ساعة اكلوسيون الكبار وكرر يوميا حتى يوم واحد قبل أوفيبوسيتيون (9-10 أيام بعد ظهور).
  4. بعد أوفيبوسيشن (القسم 1)، ضع القفص في الثلاجة ح 4 – 8 ونظيفة ثم إزالة الورق والشطف فراس من الجانبين والكلمة مع الماء الساخن وتنقية جميع الأسطح مع منظفات الغسيل والكلور. شطف أقفاص مع الماء الساخن والسماح لتجف.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

اليرقات بوبارياتي 10 – 14 يوما والبالغين تظهر بعد أوفيبوسيشن أيام 14 – 16. الوقت جيل، البيض للبيض، ~ 24 يوما. تعرض بيانات تربية لأيار/مايو 2013 إلى كانون الثاني/يناير عام 2017 مع ثلاثة من عملاء يستكثر مختلفة والمستعمرات اثنين في الشكل 5. الأشجار تعطي أفضل عائد، 3867 ±1442 (figure-results-1 ± الانحراف المعياري) الخوادر تزن 12.5 ملغ ±1.6 مع ±19 74% اكلوسيون إنتاج 2,872 ±1294 الذباب الكبار لمختبر أنشئت المستعمرة. ا...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

يمكن العثور على وضع في مجموعة متنوعة واسعة من ركائز في طبيعة الذباب مستقرة ويمكن تربيتها في العديد من أنواع الوسائط في المختبر. وقد استخدمنا نجارة الخشب والفيرميكوليت يستكثر وكلاء. الفيرميكوليت عملت بشكل جيد، ولكن فصل بابريا من تربية متوسطة الصعوبة وكانت باهظة الثمن (~$0.60/pan). ربما بسبب صرامة المضافة لفصل بابريا من المتوسط، اكلوسيون كان أيضا أقل مع الفيرميكوليت، 57% مقابل 75% لنجارة الخشب. كانت ملامح الأشجار قابلة للمقارنة إلى الفيرميكوليت، ولكن في بعض الأوقات الصعبة لشراء. يبدو أن أهم مكونات المواد السليلوزية أو الخض...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

شكر وتقدير

نود أن نشكر أنتوني وينهولد والعديد من الطلاب الذين عملوا معنا على مر السنين للدعم التقني، فضلا عن اقتراحات لتحسين أعمالنا الحشرات تربية الإجراءات.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
DiamaltPremier Malt Products، Inc. ، Saddle Brook ، NJ2540
CSMA Fly mediaPurina Animal Nutrition ، Arden Hills ، MN5S6Z
Thin Maxi PadThe Tranzonic Co. ، كليفلاند ، أوهايو ، الولايات المتحدة الأمريكية5001M
عجل MannaMannaPro ، تشيسترفيلد ، ميزوري ، الولايات المتحدة الأمريكيةManna Pro
بيكربونات الأمونيومالطيف الكيميائي شركة التصنيع ، جاردينا ، كاليفورنياA1125
نخالة القمح ،شركة طحن سيمر الخشنة ، توتوبوليس ، شركة توريد
IL ، برينتوود ، تينيسي502770699
مستلزمات المستهلك لمسحوق السمك ، شمال سيوكس سيتي ، SDF1550
أقفاص الكبارجميع شركة نافذة الألومنيوم ، لينكولن ، نيمخصص45 & مرات 45 & مرات 45 سم ، 18 مرة ؛ شاشة ألومنيوم شبكية 16 ، وصول إلى stockinette
9 & مرات 28 سم قماش قطني أسودأقمشة روبرت كوفمان ، لوس أنجلوس ، كاليفورنياK040-114قماش Egging
10 لتر أحواض أطباق بلاستيكيةRubbermaid ، ساراتوجا سبرينغز ، نيويوركFG2951ARWHTأحواض اليرقات
Stockinette ، قطن ، لفة 12 بوصة × 25 ياردةشركة Tex-Care Medical Company ، برلنغتون ، نورث كارولاينا91311-225
جرار نشارة الخشب توزيع

المراجع

  1. Cook, D. F., Dadour, I. R., Keals, N. J. Stable fly, house fly (Diptera: Muscidae), and other nuisance fly development in poultry litter associated with horticultural crop production. J. Econ. Entomol. 92 (6), 1352-1357 (1999).
  2. Dominghetti, T. F., de Barros, A. T., Soares, C. O., Cançado, P. H. Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) outbreaks: current situation and future outlook with emphasis on Brazil. Rev. Bras. Parasitol. Vet. 24 (4), 387-395 (2015).
  3. Solórzano, J. -A., Guilles, J., Bravo, O., Vargas, C., Gomez-Bonilla, Y., Bingham, G., Taylor, D. B. Biology and trapping of stable flies (Diptera: Muscidae) developing in pineapple residues (Ananas comosus) in Costa Rica. J. Insect Sci. 15 (1), 145(2015).
  4. Berry, I. L., Stage, D. A., Campbell, J. B. Populations and economic impacts of stable flies on cattle. Trans. Am. Soc. Agric. Eng. 26, 873-877 (1983).
  5. Taylor, D. B. Area-wide management of stable flies. Area-wide management of insect pests. Vreysen, J., Hendrichs, R., Cardoso Pereira, R. , in press (2017).
  6. Bishopp, F. C. The stable fly (Stomoxys calcitrans L.), an important live stock pest. J.Econ. Entomol. 6 (1), 112-126 (1913).
  7. Hogsette, J. A., Ruff, J. P., Jones, C. J. Stable fly biology and control in northwest Florida. J. Agric. Entomol. 4 (1), 1-11 (1987).
  8. Lysyk, T., Kalischuk-Tymensen, L., Selinger, L., Lancaster, R., Wever, L., Cheng, K. Rearing stable fly larvae (Diptera: Muscidae) on an egg yolk medium. J. Med. Entomol. 38, 382-388 (1999).
  9. Romero, A., Broce, A., Zurek, L. Role of bacteria in the oviposition behaviour and larval development of stable flies. Med. Vet. Entomol. 20, 115-121 (2006).
  10. Glaser, R. W. Rearing flies for experimental purposes with biological notes. J. Econ. Entomol. 17 (4), 486-496 (1924).
  11. Melvin, R. Physiological studies on the effect of flies and fly sprays on cattle. J. Econ. Entomol. 25 (6), 1151-1164 (1932).
  12. Doty, A. E. Convenient method of rearing the stable fly. J. Econ. Entomol. 30 (2), 367-369 (1937).
  13. Bridges, A. C., Spates, G. E. Larval medium for the stable fly Stomoxys calcitrans (L.). Southwest. Entomol. 8 (1), 6-10 (1983).
  14. Hogsette, J. A. New diets for production of house flies and stable flies (Diptera: Muscidae) in the laboratory. J. Econ. Entomol. 85 (6), 2291-2294 (1992).
  15. McGregor, W. S., Dreiss, J. M. Rearing stable flies in the laboratory. J. Econ. Entomol. 48 (3), 327-328 (1955).
  16. Goodhue, L. D., Cantrel, K. E. The use of vermiculite in medium for stable fly larvae. J. Econ. Entomol. 51 (2), 250(1958).
  17. Friesen, K., Berkebile, D. R., Zhu, J. J., Taylor, D. B. Augmenting laboratory rearing of stable fly (Diptera: Muscidae) larvae with ammoniacal salts. J. Insect Sci. 17 (1), 1-6 (2017).
  18. Berkebile, D. R., Weinhold, A. P., Taylor, D. B. A new method for collecting clean stable fly (Diptera:Muscidae) pupae of known age. Southwest. Entomol. 34 (4), 469-476 (2009).
  19. Champlain, R. A., Fisk, F. W., Dowdy, A. C. Some improvements in rearing stable flies. J. Econ. Entomol. 47 (5), 940-941 (1954).
  20. Zumpt, F. The stomoxyine biting flies of the world. , Gustav Fischer Verlag. Stuttgart. (1973).
  21. Wienhold, B. J., Taylor, D. B. Substrate properties of stable fly (Diptera: Muscidae) developmental sites associated with round bale hay feeding sites in eastern Nebraska. Environ. Entomol. 41 (2), 213-221 (2012).
  22. Friesen, K., Berkebile, D. R., Wienhold, B. J., Durso, L., Zhu, J., Taylor, D. B. Environmental parameters associated with stable fly (Diptera: Muscidae) development at hay feeding sites. Environ. Entomol. 45 (3), 570-576 (2016).
  23. Albuquerque, T. A., Zurek, L. Temporal changes in the bacterial community of animal feces and their correlation with stable fly oviposition, larval development, and adult fitness. Front. Microbiol. 5 (590), 1-9 (2014).
  24. Bailey, D. L., Whitfield, T. L., LaBrecque, G. C. Laboratory biology and techniques for mass producing the stable fly, Stomoxys calcitrans (L.) (Diptera: Muscidae). J. Med. Entomol. 12 (2), 189-193 (1975).
  25. Smith, J. P., Hall, R. D., Thomas, G. D. Field studies on mortality of the immature stages of the stable fly (Diptera: Muscidae). Environ. Entomol. 14 (6), 881-890 (1985).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

تربية الذباب المستقر*Stomoxys calcitrans*طريقة جمع البيضالتطور اليرقيعزل الخادراتتحضير وسط تربية الذباببروتوكول التغذية بالدممراقبة صحة المستعمرةتكييف ذباب الموسكيدعلم الحشرات المختبري