نموذج الرئة اللاخلوي والخلوية لدراسة ورم خبيث

ملخص

، نقدم هنا بروتوكولا السابقين فيفو الرئة سرطان نموذج يحاكي خطوات تطور الورم ويساعد على عزل ورم الابتدائي، تعميم خلايا الورم، وآفات المنتشر.

الملخص

من الصعب عزل الخلايا السرطانية في مراحل مختلفة من تطور الورم. قمنا بإنشاء نموذج الرئة السابقين فيفو يمكنه إظهار التفاعل بين الخلايا السرطانية مع مصفوفة الطبيعي والتدفق المستمر للمواد الغذائية، وكذلك نموذج يوضح التفاعل بين الخلايا السرطانية مع المكونات الخلوية العادية ومصفوفة طبيعية. يتم إنشاء نموذج الرئة اللاخلوي السابقين فيفو بعزل كتلة قلب والرئة في الفئران وإزالة كافة الخلايا باستخدام عملية ديسيلولاريزيشن. يتم ربط القصبات الرئيسية الحق قبالة وتوضع الخلايا السرطانية في القصبة الهوائية بحقنه. نقل الخلايا وملء الرئة اليسرى. ثم يتم وضع الرئة في مفاعل حيوي حيث يتلقى الشريان الرئوي إلى تدفق مستمر لوسائل الإعلام في دائرة مغلقة. الورم في الرئة اليسرى من الورم الرئيسي. ورم الخلايا التي يتم عزل في وسائط الإعلام يتناقل تنتشر الخلايا السرطانية والخلايا السرطانية في الرئة اليمنى آفات المنتشر. يتم إنشاء نموذج الرئة الخلوية السابقين فيفو بتخطي عملية ديسيلولاريزيشن. يمكن استخدام كل نموذج للإجابة على الأسئلة البحثية المختلفة.

المقدمة

سرطان خبيث هو السبب وراء معظم الوفيات الناجمة عن السرطان، ويشكل التحدي النهائي في الجهود المبذولة لمكافحة السرطان. والهدف العام لهذا الأسلوب هو تصميم بروتوكول لثقافة رباعية الأبعاد (4-د) خلية التي بعدا من التدفق، بالإضافة إلى نمو الخلية (ثلاثي الأبعاد) ثلاثية الأبعاد. وهي تمثل ثلاث مراحل متميزة لعملية ورم خبيث [أي، الورم الرئيسي، تعميم الخلايا السرطانية (ريادية)، وآفات المنتشر].

على مدى العقود الثلاثة الماضية، حقق العلماء في جميع أنحاء العالم ثروة لم يسبق لها مثيل من المعلومات فهم الآليات الكامنة وراء تطور المنتشر في مختلف أنواع السرطان التي تحسن إمكانية علاج أو البقاء خالية من التقدم. الإدارة السريرية لبعض أنواع السرطان، مثل سرطان....

البروتوكول

بروتوكولات للتجارب على الحيوانات كانت وافقت عليها لجنة الاستخدام في معهد بحوث الميثودية هيوستن ورعاية الحيوان المؤسسية ونفذت وفقا لجميع اللوائح والقوانين المعمول بها، والمبادئ التوجيهية والسياسات.

1-فأر الحصاد الرئة

1. تخدير الفئران سبراغ داولي ذكور 4-6 أسبوع بحقنه (الملكية الفكرية) داخل من الكيتامين (100 مغ/كغ) وإكسيلازيني (10 مغ/كغ) في الجناح به. ضمان التخدير بالتأكد من عدم وجود حركة عندما يكون مقروص تو أطرافهم هند بالملقط.
2. بعد 10 دقيقة، يحلق في الصدر والبطن ومسح الجلد بمسحه الكلورهيكسيدين.
3. إزالة الجلد بالتقاط أنه مع الملقط وإينسيسينج أنه مع مشرط المتاح. بعد فتح تجويف الصدر عن طريق إينسيسينج مع مشرط، أداء thorac....

النتائج

وتحتفظ الرئة حصادها من الفئران سليمة المفرج والحويصلات الهوائية¹¹ (الشكل 3 ألف و 3 باء). عند ديسيلولاريزيشن، يتم الاحتفاظ بعناصر المصفوفة خارج الخلية الرئة اللاخلوي، مثل الكولاجين، فيبرونيكتين، والايلاستين،¹¹ (الشكل 3و 3D، 3Eو 3F). ديسيلولاريزيشن يؤدي إلى إزالة كاملة من خلايا الفئران الأصلية موجودة في الرئتين، التي .......

المناقشة

الرئة 4-د السابقين فيفو يوفر فرصة لدراسة نمو الورم والانبثاث في إنشاء مختبر. مصفوفة الرئة أصلي هو نظام معقد التي تقدم الدعم لانسجة طبيعية ويحافظ على التفاعلات خلية خلية، والخلية-مصفوفة التفاعلات، والتمايز الخلوي وتنظيم الأنسجة. أنه يوفر فرصة لإضافة أي مكونات ورم المكروية لدراسة آثارها على نمو الورم والتفاعل مع خلايا أخرى.

الحصاد الرئة هو الخطوة الحاسمة لنموذج الرئة 4-د السابقين فيفو . قد يؤدي إلى تأخير في إدارة حقن الهيبارين بعد فتح الصدر تجلط الدم في الرئتين، مما قد يؤثر على.......

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
سبراج داولي الفئران	هارلان	206M	ذكر
مسحة الكلورهيكسيدين	Prevantics ، نيويورك ، الولايات المتحدة الأمريكية	NDC 10819-1080-1
Heparin	Sagent Pharmaceuticals ، Schaumburg ، IL ، الولايات المتحدة الأمريكية	NDC 25021-400-10
إبرة قياس 18	ماكماستر كار ، الولايات المتحدة الأمريكية	75165A249
2-0 ربطة عنق حريرية	Ethicon ، سان أنجيلو ، تكساس ، الولايات المتحدة الأمريكية	A305H
مضخة Masterflex L / S	Cole-Parmer ، فيرنون هيلز ، إلينوي ، الولايات المتحدة الأمريكية	EW-07554-80
Masterflex L / S رأس المضخة	كول بارمر ، فيرنون هيلز ، إلينوي ، الولايات المتحدة الأمريكية	EW-07519-05
خرطوشة مضخة Masterflex L / S	Cole-Parmer ، فيرنون هيلز ، إلينوي ، الولايات المتحدة الأمريكية	EW-07519-70
Tygon Tube	Cole-Parmer ، فيرنون هيلز ، إلينوي ، الولايات المتحدة الأمريكية	14171211
أنبوب مضخة MasterFlex	كول بارمر ، فيرنون هيلز ، إلينوي ، الولايات المتحدة الأمريكية	06598-16
موصلات قفل لور أنثى	كول بارمر ، فيرنون هيلز ، إلينوي ، الولايات المتحدة الأمريكية	45508-34	75165A249
موصلات قفل اللور الذكور	كول بارمر ، فيرنون هيلز ، إلينوي ، الولايات المتحدة الأمريكية	45513-04
خاتم النايلون الأسود	كول بارمر ، فيرنون هيلز ، إلينوي ، الولايات المتحدة الأمريكية	EW-45509-04
مجموعة الوريد	CareFusion	41134E
كبريتات دوديسيل الصوديوم (SDS)	فيشر ساينتفيك	CAS151-21-3
تريتون X-100	سيجما ألدريتش	X100-1L
المضادات الحيوية	جيبكو	15240-062
أكسجين السيليكون	كول بارمر ، فيرنون هيلز ، إلينوي ، الولايات المتحدة الأمريكية	ABW00011	سانت جوبين
واير	1164610105	لويز	نيويورك سلك
أنثى لور العروة نمط TEE	كول بارمر ، فيرنون هيلز ، إلينوي ، الولايات المتحدة الأمريكية	45508-56
ذكر لور حلقة قفل متكاملة إلى 200series بارب	كول بارمر ، فيرنون هيلز ، إلينوي ، الولايات المتحدة الأمريكية	45518-08
أنثى لوير نمط الخيط مقرنة	كول بارمر ، فيرنون هيلز ، إلينوي ، الولايات المتحدة الأمريكية	45508-22
موصل كلاف	العناية المركزة الطبية	11956
مرحبا فلو & 4-way Stopcock ث / قطب ذكر luer lock	smith الطبية	MX9341L
MasterFlex مضخة أنبوب	كول بارمر ، فيرنون هيلز ، إلينوي ، الولايات المتحدة الأمريكية	06598-13	للقنية

شبكة وحدة