많은 치료 및 유전자 변이 성적 성숙과 다 산의 타이밍에 영향을. 이 프로토콜 pubertal 발병 쥐 및 쥐에 성적으로 성숙한 동물 불 임 연구를 설정 하는 이전에 평가 하는 비-침략 적 방법을 설명 합니다.
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이 논문에서
요약
초록
생식 능력의 평가 치료 또는 또한 불린 hypothalamic-뇌 하 수 체-gonadal 축 생식 축에 유전자 조작의 영향을 이해 하는 데 중요 하다. 생식 축 다 산 재생산에 유리한 조건에 적응 하는 환경 및 내부 입력의 주요 통합 이다. 쥐 및 쥐에 불 임 연구에 착수, 이전 성적 성숙 평가 제외 가능성 관찰된 생식 고기에 의해 발생 하는 지연 또는 pubertal 발병 결 석. 이 프로토콜 pubertal 발병 preputial 분리의 결정을 통해 남성 및 질 및 첫 발 정기를 통해 여성을 평가 하는 비-침략 적 접근 방식을 설명 합니다. 사춘기의 성적 성숙의 공적 및 확인 후 불 임 연구를 시작할 수 있습니다. 절차는 쥐와 쥐, 불 임 연구를 설정 하는 방법 및 어떤 매개 변수를 평가 하 고 치료 또는 유전자 삭제 다 산에의 영향을에 있는지 확인에 대 한 최적의 번 식 조건을 설명 합니다.
서론
사춘기를 통해 전환 성적 성숙 및 생식 능력을 달성 하기 위해 필요 합니다. Pubertal 전환 및 성인에서 비 옥의 정비 hypothalamic-뇌 하 수 체-gonadal 축 (그림 1) 불리는 생식 축에 의해 통제 된다. Pubertal 개시의 타이밍 및 비 옥의 정비 단단히 자손과 부모1,2의 생존의 기회를 높이기 위해 내부 뿐만 아니라 환경 요인에 의해 통제 된다. 이 프로토콜에는 생쥐와 쥐 생식 능력을 평가 하는 불 임 연구를 설정 하기 전에 성적 성숙 확인 pubertal 발병을 확인 하는 비-침략 적 접근 방식을 제공 합니다.
불 임 연구는 성적으로 성숙한 동물에서 수행 되 고 동물 사춘기를 통해 간 후에 시작 될 수 있다. Pubertal 발병 전에 생식 축, 이며 사춘기 (그림 1)를 시작에 부족 금액에 뇌 하 수 체에 성적인 성숙, 생식 샘 자극 호르몬-방출 호르몬 (GnRH)의의 핵심 드라이버 릴리스입니다. Pubertal 발병 증가 GnRH 릴리스 중간 예 하에서 발생 하는 복잡 한 프로세스입니다. GnRH ....
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프로토콜
여기에 설명 된 모든 메서드를 기관 동물 관리 및 사용 위원회의 미시간 주립 대학에 의해 승인 하 고 관리 및 실험 동물의 사용에 대 한 가이드에 따라 실시 되었습니다.
1. 확인할 Pubertal 발병
- 의류, 최소한 기관 지침에 따라, 그것은 깨끗 한 실험실 외 투 및 깨끗 한 장갑을 착용 하는 데 필요한. 항상 깨끗 한 장갑을 착용 하는 마우스를 처리 합니다.
- 테이블에 패드를 배치 하 여 작업 영역을 준비 합니다.
- 패드를 위쪽으로 향하게 하는 그리드와 깨끗 한 마우스 케이지 상단을 놓습니다.
- 작업 영역에서 규모를 설정 합니다. 규모와 자체에 깨끗 한 500-1000 mL 비 커를 배치 합니다.
- 기록의 몸 무게와 preputial 분리, 질 또는 첫 번째 발 정기 작업 영역 옆에 있는 시트를 놓습니다.
- 연구에 대 한 마우스를 식별 합니다. 사춘기에 도달할 때까지 pubertal 발병에 대 한 일상적인 검사를 수행 합니다. 연구를 통해 하루 중 같은 시간에 검사를 수행 합니다. 그러나 Pubertal 발병 빠르면 생 후 11-12 일19, 발생할 수 있습니다, 가장 실험적....
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결과
발표 결과 녹음 방송 요인 복 부 앞쪽 homeobox 1 (Vax1) 여기 라고도 heterozygote 쥐 (HET)13또는 Vax1 1 개의 대립 유전자에 몸 전체에서 삭제 된 두 개의 서로 다른 유전자 변형 마우스 모델에서 조건에 따라 GnRH 신경 세포22, 여기 조건부 코 (cKO)를 되 나 이내 삭제 되었습니다. 불 임 연구를 설정 하기 전에 모든 쥐에 pubertal 발병을 확인 하는 것이 중요입니다.
첫째, 하루와 질 및 preputial 분리에 무게는 설치 되었다. HET 마우스 질 및 preputial 분리 동일한 나이 및 무게 컨트롤 마우스에서 발생 (그림 3A 와
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토론
쥐의 전반적인 복지21성공적인 불 임 분석 결과 대 한 중요 하다. 다 산 분석 결과 수행할 때 육체적으로 확인 하는 쥐에 매일이 스트레스를 일으킬 수로 중요 하다. 이들은 스트레스도 더 자주 케이지 변경을 하지 마십시오. 이상적으로 케이지 변화는 주당 1-2 회 더 이상 해질 것 이다. 어두운 단계 빛 노출 야행성 설치류에 번 식에 부정적인 영향을 미칩니다. 어두운 시간 동안 사육 방에 조명을 설정 하지 않습니다. 방에 항목 어두운 시간 동안 필요한 경우에, 희미 한 붉은 빛 조명을 사용 합니다. 또 다른 스트레스의 과도 한 냄새, 진동 또는 소음 연구의 일부 또는 전체에 대 한 물고기에 존재입니다. 스트레스를 완화 하 고 마우스 복지와 번 식을 개선 하기 위해, 소재 또는 다른 유형의 농축 중첩 마우스를 제공 합니다. 둥지 건물 마우스에서 중요 한 문제 이며 번 식 성공 증가. 둥지도 쥐를 숨기고 재생 장소를 수 있습니다. 잘 건강 하 고 잘 길 러 진 동물 품종, 따라서 그것은 높.......
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공개 사항
저자는 공개 상관이 있다.
감사의 글
이 게시의 기초는 초기 작업에 기여 하는 저자를 감사 합니다. Aitor 아구, 제네 비 브 중 라이언과 에리카 L. Schoeller 원고를 준비 하는 도움 원고와 기술 지원에 대 한 제시카 소라 리와 오스틴 턱에 감사. H.M.H. 유 니스 케네디 슈 라이버 국립 연구소의 아동 건강 및 보너스 번호 R00HD084759에서 건강의 국가 학회의 인간 발달에 의해 지원 되었다.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 멸균 면봉 | 피셔 | 22456885 | |
| 표면 보호기 | 피셔 | 1420637 | |
| 라이트 미터 | VWR | 21800-014 | |
| 메틸렌 블루 | Sigma-Aldrich | M9140 | |
| 현미경 슬라이드 | Genesee Scientific | 29-101 | |
| 옵티마우스 랙 케이지 포함 | AnimalCare 시스템 | C89100 | |
| 물병 바구니 | AnimalCare 시스템 | C61011 | |
| 필터 케이지 탑 | AnimalCare 시스템 | C78210 | |
| 옵티미스 표준 피더 | AnimalCare 시스템 | C40100SG | |
| 케이지 카드 홀더 | AnimalCare 시스템 | C43251 | |
| 케이지 카드 | AnimalCare 시스템 | M52010 | |
| 병 Assambley | AnimalCare 시스템 | ||
| 침대 R'Nest Nesting | The Andersons | BRN4WSR | |
| 1/8" 옥수수 코브 침구 | The Andersons | 8B | |
| 표준 마우스 차우 | Teklad | 7904 (7004) | |
| 스케일 | VWR | 10205-004 | |
| 폴리 프로필렌 비커 | 피셔 | 14-955-111F |
참고문헌
- Schneider, J. E. Energy balance and reproduction. Physiology and Behavior. 81 (2), 289-317 (2004).
- Walton, J. C., Weil, Z. M., Nelson, R. J. Influence of photoperiod on hormones, behavior, and immune function. Frontiers Neuroendocrinology. 32 (3), 303-319 (2....
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재인쇄 및 허가
