Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Неинвазивный мониторинг размера поражения в гетерологичных мыши модели эндометриоза

8.1K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/58358

⸱

26 февраля 2019 г.

 ,  ,  ,  , 
1Instituto de Investigación Sanitaria, 2Unidad de Animalario del Centro de Investigación Príncipe Felipe (CIPF), 3Departamento de Pediatría, Obstetricia y Ginecología, Universidad de Valencia, 4Servicio de Obstetricia y Ginecología, Hospital Clínico Universitario de Valencia

В этой статье

Краткое содержание

Здесь мы представляем протокол для жить изображений дневно обозначенные человека эндометрия фрагментов, привитые на мышах. Этот метод позволяет изучать последствия препаратами выбора размера endometriotic поражения посредством мониторинга и количественной оценки флуоресценции, испускаемых флуоресцентные репортер в реальном времени

Аннотация

Здесь мы описываем протокол для реализации гетерологичных мыши модели, в которой прогрессирования эндометриоз может оцениваться в реальном времени через неинвазивного мониторинга флуоресценции, испускаемых имплантированных внематочная эндометрия ткани человека. Для этой цели биопсии эндометрия человека получены от доноров женщин продолжающихся ооцитов. Человека эндометрия фрагменты культивированный присутствии аденовирусов спроектирован, чтобы выразить cDNA для репортера флуоресцентный белок mCherry. После визуализации помечены тканей с оптимальной скоростью флуоресценции после инфекции, впоследствии выбрали для имплантации в получателей мышей. Одну неделю до операции имплантации, oophorectomized получателей мышей, и эстрадиола гранулы находятся подкожно для поддержания выживания и роста поражений. В день операции мыши являются наркотизированных и брюшной полости, осуществляется через небольшой (1,5 см) разрез linea alba. Дневно обозначенные имплантатов являются tweezed, кратко пропитанной клеем и придает перитонеальных слоев. Зашиваются надрезы, и животных осталось вернуть на пару дней. Флуоресцирование, излучаемых endometriotic имплантаты обычно неинвазивным контролируется каждые 3 дня за 4 недели с системой визуализации в естественных условиях. Вариации в размере endometriotic имплантантов может быть оценена в реальном времени путем количественной оценки mCherry сигнал и нормализации против начальный момент времени, показаны максимальные флуоресценции интенсивности.

Традиционные грызунов доклинических моделей эндометриоз не позволяют Неинвазивный мониторинг поражения в режиме реального времени, но скорее позволяют производить оценку воздействия наркотиков assayed в конечной точке. Этот протокол позволяет отслеживать поражений в режиме реального времени и более полезным для изучения терапевтический потенциал наркотиков в доклинических моделях эндометриоза. Основным ограничением модели таким образом, что Неинвазивный мониторинг не возможно более длительных периодов времени из-за episomal выражение Ad-вируса.

Введение

Эндометриоз является хронические гинекологические расстройства, инициированных имплантации функциональных эндометрия вне полости матки. Эктопическая поражения растут и вызвать воспалительные процессы, ведущие к хронической тазовой боли и бесплодие1. Предполагается, что до 10 – 15% женщин репродуктивного возраста страдают от endometriosis2, и она присутствует в примерно 40 – 50% от бесплодных женщин3. Текущий фармакологического лечения эндометриоза удалось полностью искоренить поражения и не свободной от побочных эффектов4,5. Исследования для более эффективного лечения требует уточнения существующих животных моделей эндометриоза таким образом, что можно надлежащим образом имитировать человека поражений, и воздействие соединений на размер поражения среди прочего могут оцениваться тесно.

Предводитель модели были использованы для имитации эндометриоза, по разработке внематочная поражения гистологически идентичные и подобные сайты как люди6,,78; Однако этические проблемы и высокие экономические издержки связанные с эксперименты с приматов предел их использования9. Следовательно использование мелких животных, особенно грызунов, для реализации моделей-vivo эндометриоза продолжает отдавать предпочтение как позволяет исследования с большим количеством лиц10,11. Эндометриоз может быть наведено в этих животных путем пересадки куски грызунов маточные Рожки («гомологичных модели»)12,13 или эндометрия/endometriotic тканей человека внематочная сайты (гетерологичных модели)14 . В отличие от людей грызуны не сбрасывают их эндометрия ткани и тем самым эндометриоз может не быть разработаны спонтанно в этих видов. Таким образом гомологичных мышь, которую модели эндометриоза подверглись критике с тем, что имплантированных внематочная мыши маточных тканей не отражает характеристик человека endometriotic поражений15.

В гетерологичных модели эндометриоз, где свежий человека фрагменты эндометрия вживляются в иммунодефицитных животных можно имитировать соответствующий физиологии эндометриоза. В обычных гетерологичных модели терапевтическое воздействие соединений интерес обычно оцениваются в конечной точке оценки размера поражения с использованием суппорта16. Очевидным ограничением является, что, таким образом, конечной Животные модели не позволяют изучать динамику имплантации или endometriotic поражение развития с течением времени. Дополнительное ограничение, что использование суппорта не позволяет точные измерения размера поражения. Действительно стандартная ошибка, предоставляемый суппортами находится в том же диапазоне (то есть, миллиметров) размер повреждений, имплантированные в мышей, таким образом ограничивая потенциал этих инструментов для выявления фактического изменения в размер.

Для того, чтобы преодолеть такие ограничения, здесь, мы описываем поколения гетерологичных мышиной модели эндометриоза, в котором спроектирован имплантированных тканей человека выразить репортер m вишня флуоресцентный белок. Обнаружение флуоресцентного сигнала с системой соответствующего изображения позволяет Неинвазивный мониторинг состояния поражения с одновременным количественного определения его размера в режиме реального времени. Таким образом наша модель имеет явные преимущества по сравнению с обычными конечной модели, как он приносит возможность Неинвазивный мониторинг в режиме реального времени и возможность для выполнения более объективной и точной оценки вариации размеров поражения.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Использование образцов человеческой ткани был одобрен институциональных Наблюдательный Совет и Комитет по этике из больницы Университарио La Fe. Все пациенты условии письменного информированного согласия. Исследование с участием животных была одобрена Комитетом институционального ухода животных на Centro де инвестигасьон Принсипи Фелипе де Валенсия, и все процедуры были выполнены следующие руководящие принципы для ухода и использования млекопитающих из национальных институтов здравоохранения.

1. эндометрия ткани сбора и предварительной обработки

  1. Получите хорошее качество биопсии человеческой аспирата эндометрия с помощью канюли, подключенный к устройству всасывания. Залейте биопсии в колбу, содержащие 10 мл стерильным физиологическим и мыть с нежным ручной агитации.
    Примечание: Процедуры на как получить хорошее качество биопсии были ранее описанных17.
  2. Вымойте биопсии любых оставшихся крови или слизи. Повторите этот процесс, поливая ткань для фляги, содержащий свежие солевых столько пальцев при необходимости до тех пор, пока ткань наблюдается чистый.
  3. Перенос биопсии фрагментов с здоровый внешний вид в раствор, содержащий 10 мл завершить среднего среднего (DMEM) Дульбекко изменение орла с 10% плода Bovine сыворотки (ФБС) и 1% раствор антибиотика противогрибковое.
  4. Залить содержимое в 10 см Петри и приступить к нарезать3 штук 5-10 мм с парой скальпели ткани.

2. аденовирусных Transfection эндометрия фрагментов

Примечание: Все материалы, которые будут использоваться в процессе должен вводиться в капюшоне заранее. Взять все, что не будет использоваться в процессе и место колбу с хлоркой. Весь материал, который вступает в контакт с аденовирусных вектор должен быть вылечен с отбеливателем прежде чем выбросить его в контейнере биологической опасности.

  1. После биопсии были рубленые, принять новый Петри. Пипетка несколько 30 – 50 мкл DMEM капли распространения на протяжении всего блюдо. Оставьте достаточно места между капли, так что они не вступают в контакт.
  2. Помогал с иглой, прилагается к шприцу, место одного куска фрагмент внутри каждого из среднего капель.
    Примечание: Каждая капля должен содержать одну часть эндометрия.
  3. Приготовить рабочий раствор Ad-mCherry путем разбавления 1:20 от mCherry аденовирусных Стоковый раствор [1 x 1010 ОРП/мл]) в среде DMEM средних без антибиотиков (DMEM + 10% фильтруют FBS).
  4. Отказаться от 100 – 200 мкл Ad-mCherry раствора в скважину на 96-луночных плита, заполнение как многие скважины, как фрагменты доступны в чашке Петри капель (шаг 2.2). Кроме того заполните по крайней мере 3 скважины с аденовирус бесплатно DMEM среднего как отрицательный контроль.
  5. Помогал с иглой, прилагается к шприцу, передачи каждый из фрагментов в Петри (шаг 2.2) каждому из скважин, содержащий объявление mCherry решение в 96-луночных пластины.
  6. Место 96 хорошо плита, содержащие фрагменты эндометрия с Ad-mCherry раствор в инкубаторе при 37 ° C с 5% CO2 для 16 h.
  7. Промывают оставшиеся аденовирусов в среде путем передачи тканей в новую плиту 96-луночных заполнены с полным DMEM среднего (с антибиотиками противогрибковые, бесплатно аденовирус) и проинкубируйте 37 ° C с 5% CO2 за 24-48 ч.
    Примечание: Не забудьте покрытия с хлоркой, все хорошо пластины и советы, которые вступил в контакт с Ad вирус прежде чем выбросить в контейнер биологической опасности.
  8. Вынуть пластину из инкубатора и поместите его под микроскопом флуоресценции в 568 Нм (красный канал) для тестирования для оптимального маркировки.
  9. Выбрать самых блестящих осколков и поместить их в новую плиту 96-луночных с свежий полный DMEM среднего (с антибиотиками противогрибковые, бесплатно аденовирус).
  10. Уплотнение пластину с пластиковой парафин фильм и транспортировки его в зоне свободной от конкретного патогена животного для имплантации эндометрия фрагментов в получателей животных.

3. Создание модели мыши эндометриоза

Примечание: Использовать 6-8 недели-старый Атинические ню (или аналогичных ослабленным штаммы) самок мышей, в конкретных условиях, возбудитель – бесплатно, как получателей животных. Чтобы избежать гормонального цикла зависимых вариации и одновременно рост поражения топлива с эстрадиол, животные, ovariectomized и размещены с 60-дневной версии капсулы, содержащие 18 мг 17 βeta-эстрадиола (217β-E). Придатками и Пелле размещения должны выполняться по крайней мере за одну неделю до прививки эндометрия фрагменты в получателя животных.

  1. Овариэктомия
    Примечание: Подготовьте хирургической стерилизации материал в капюшоне. Подготовьте оборудование для анестезии и послеоперационного восстановления зоны готовы в той же комнате.
    1. Выполните подкожной инъекции морфина производной в дозе 5 мг/кг в мышь. Пусть отдых 30 мин после инъекции, так как анальгетиков может проявляться эффекты препарата мышей.
    2. Подключите ингаляционной анестезии оборудование и пусть кислорода и изофлюрановая (2% мг/кг) поток на несколько минут в запечатанном анестезии камеру.
    3. Ввести животное в зале изофлюрановая анестезии. Подождите 3-5 мин и проверьте, что животные полностью находятся под наркозом, нажав одну из его лапы. Передача животное в области хирургии и поддержания анестезии, поставив маска с непрерывным потоком газа изофлюрановая, охватывающих дыхательных путей.
    4. После дезинфекции области с chlorohexidine, выполнить поперечной 0,5 см реберного разрез приблизительно на высоте бедра с острыми ножницами.
    5. Отделите кожу от мышцы, чтобы получить доступ к брюшной полости, выявления белой жировой ткани, которая окружает завязи и убрать яичника с щипцами рассечение.
    6. Завязывайте узел вокруг маточных труб с рассасывающиеся шовные и затяните его обеспечить соответствующие гемостаз до иссечения яичника.
    7. Закройте мышечный слой с рассасывающиеся шовные 6-0, а затем закройте кожи с 6-0 не рассасывающиеся шовные. Чистота области снова с антисептическим раствором.
    8. Повторите эту процедуру для удаления яичника боковое contra.
  2. Эстрадиол Пелле имплантат
    Примечание: Позаботьтесь, что животное под наркозом во время операции овариэктомия поставить окатышей на тот момент.
    1. Сразу же после завершения процедуры овариэктомия Очистите кожу с антисептическим раствором, вокруг шеи и сделать разрез поперечной подкожной малых (0,5 см) с острыми ножницами в затылке.
    2. Используйте ножницы, чтобы вскрыть кожу от мышц, делая кармане достаточно большой, чтобы позволить размещение гранулы.
    3. Вставьте гранулы, содержащие 18 мг 17β-E2 и шовные кожи с не рассасывающиеся шовные 6-0. Чистота области снова с антисептическим раствором.
    4. Поместите животное в зоне восстановления и администрировать оптимальную дозу долговечные обезболивания для облегчения восстановительного периода.
  3. Эндометрия имплантации
    Примечание: Позвольте по крайней мере в течение семи дней карантина позволяет полного восстановления животных после овариэктомии перед началом операции имплантации эндометрия фрагмент. Для оптимальной синхронизации с маркировки ткани Соберите биопсии 2 – 3 дня до операции имплантации с тем, чтобы избежать долгосрочных культуры эксплантов.
    1. Получите хирургические комнаты в свободной зоне конкретного возбудителя готовы заранее. Также подготовьте капот с все необходимые хирургические материалы, оборудование для анестезии и послеоперационного восстановления зоны.
    2. Принесите животных в комнату, выполните подкожной инъекции морфина производной в дозе 5 мг/кг () в каждой мыши. Дайте отдохнуть в течение 30 мин после инъекции так обезболивающие эффекты препарата может проявляться мышей.
    3. Подключите ингаляционной анестезии оборудование и пусть кислорода и изофлюрановая (2% мг/кг) поток на несколько минут в запечатанном анестезии камеру.
    4. Перед началом операции, двигаться пластину, содержащие дневно надписью фрагменты (из шага 2.10) в капот, распечатать его и налить в чашку Петри для обработки проще фрагменты.
    5. Ввести животное в зале изофлюрановая анестезии. Подождите 3-5 мин и проверьте, что животные полностью находятся под наркозом, нажав одну из его лапы. Передача животное в области хирургии и поддержания анестезии, поставив маска с непрерывным потоком газа изофлюрановая, охватывающих дыхательных путей.
    6. Место наркотизированных животного лицом вверх. Продезинфицируйте брюшной области. Выполните продольной 1,5 см разрез в брюшной полости с острыми ножницами и отделить кожу от мышц. Затем выполните разрез продольной 1,5 см в мышцы для доступа к брюшной полости.
    7. Удерживайте левый край мышечной стенки живота мини-пинцетом и сложите его пытаются подвергать внутренней поверхности брюшины снаружи.
    8. Возьмите имплантат эндометрия с помощью пинцета, Мини, кратко вымочить в n бутил Эстер Цианакрилатный клей и поместить его в брюшине, где он будет привязываться. Дайте ему высохнуть в течение нескольких секунд. Повторите шаги 3.3.6 и 3.3.7 поставить имплант на контралатеральную сторону брюшины.
    9. Закройте мышечный слой с швом рассасывающиеся 6-0, а затем закройте кожи с не рассасывающиеся шовные 6-0. Чистота области снова с антисептическим раствором.
    10. Поместите животное в зоне восстановления и администрировать оптимальную дозу долговечные анальгезии.

4. в Vivo флуоресцентных изображений с в Vivo, изображений системы

  1. Включите в естественных условиях устройство обработки изображений системы, инициализировать программу и разрешить CCD камеры остыть в течение нескольких минут.
  2. Подготовка оборудования ингаляционной анестезии. Откройте изофлюрановая потока на 2% на пару мин для заполнения обезболивающий камеры. Подготовьте зоны восстановления после анестезии.
  3. После начала программы и ПЗС-камеры остыли, щелкните инструмент Визуализации мастера : учебник начинается с серии последовательных windows отображается, каждый из которых соответствует параметру интерес с несколькими вариантов могут быть использованы нажав на соответствующее поле. Двигаться вперед с учебником, установив соответствующие флажки в каждом окне и нажмите кнопку ОК , чтобы перейти к следующему набору параметров с следующую последовательность.
    1. Выберите поле Epiluminescence для параметра флуоресценции, выберите поле mCherry для параметра filter пар. Установите флажки фотография режиме и Подтвердить фокус и выберите поле автоматическое для параметра экспозиции.
  4. После того, как был создан прибор, переместите одно животное в камере анестезии. Когда полностью под наркозом, передачи животное внутри в vivo imaging системы клетки и поместите его в бок вверх с его голову внутрь трубочка, подключенный к машине анестезии. Закройте крышку и нажмите получить для мониторинга.
  5. Приобрести изображения (в общей сложности пять изображений, один образ для каждой пары фильтров выбран) и сохранение данных, нажав кнопку Сохранить как . Переместите мышь в области восстановления после анестезии. Повторите процесс с остальных животных.
  6. Повторяйте наблюдение два или три раза в неделю по итогам сигнал надлежащим образом в течение времени.
  7. Перейти в жертву животное в конце курса время CO2 удушение.

5. Количественная оценка в Vivo флуоресценции изображений

  1. Сегрегация фактической флуоресценции через расслоение изображения:
    1. Откройте в Vivo Imaging анализ сочетании программного обеспечения.
    2. Выберите файл «Sequenceinfo», чтобы начать анализ. Появится два окна: «Последовательность взгляд» и «Палитра». Выберите Палитру и после отображения меню выберите следующие параметры.
    3. Выберите исправления и нажмите на поле Адаптивное вычитание фона FL для удаления нежелательных флуоресцентные сигналы из данных светящиеся изображения. Выберите порог наибольший интерес и нажмите кнопку установить.
    4. Нажмите кнопку спектральные Unmixing, выберите длин волн интерес, метод, выбранный для unmixing (Библиотека, экскурсии, автоматическая или ручная) и нажмите кнопку начать Unmix.
    5. Выберите Unmixed изображения, соответствующие mCherry сигнала и дважды щелкните. Появится новое окно с окончательное изображение сигнала интерес.
    6. Повторите шаг 5.1.3.
    7. НЕОБЯЗАТЕЛЬНО: Если требуется представитель изображение (JPEG) unmix результата, выберите нужные параметры в палитру | Изображение отрегулируйте (цвет таблицы биннинга, контраст, и т.д.), а затем выберите команду Экспортировать графику в окне unmix для экспорта текущего представления изображение как изображение.
    8. Сохраните файл несмешанных: файл | Сохранить как | Выберите папку и ОК.
    9. Повторите процесс с остальной частью мониторинга дней и со всеми животными.
  2. Трансформирования создана и сигнал количественной оценки
    1. Нажмите кнопку Обзор и выберите файл несмешанных (см. шаг 5.1.8), представляющих интерес для анализа. Появится новое окно.
    2. Нажмите кнопку Добавить в список , чтобы включить все несмешанных файлы от каждого животного в разное время точки и нажмите на Нагрузку как группа. Все изображения должны появиться как единую последовательность.
    3. Перейдите в окно Палитры инструментов : нажмите покинуть полендивидуальное шкалу для получения всех изображений на той же шкале.
    4. Дважды щелкните в одном изображении последовательности и создавать ROI в зоне интереса, используя следующую последовательность. Пойдите к Инструменты ROI и выберите параметр Auto 1 и контурной , нажмите на круглую появляться, поместите его на центре флуоресцентного сигнала и нажмите кнопку создать на открывшемся окне.
      Примечание: Это автоматически выделяет пикселей с интенсивностью флуоресценции выше фоновых значений (т.е., поражения) и генерирует форму, OBLASTь которого охватывает изложенные пикселей.
    5. Скопируйте созданный ROI форму и вставьте на фоне зоны там, где нет сигнала.
    6. Нажмите на мера ROI | Выбрать все для отображения значений интенсивности флуоресценции. Приступить к выбрать значения данных с помощью мыши, щелкните правой кнопкой, нажмите кнопку Копировать и вставить в таблицу.

6. данные (флуоресцентные сигнал) нормализации

  1. Выберите начальное время точку, в которой сигнал максимальной интенсивности. Перейти к нормализации сигнала на каждом этапе, используя формулу:
    Сигнал интенсивности в каждой точке время / интенсивность максимального сигнала наблюдается в течение времени) x 100.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Здесь мы описывают процесс создания гетерологичных модели эндометриоза, в котором сохраняется архитектура поражений путем имплантации дневно обозначенные частей человеческого эндометрия в ослабленным мышей, таким образом позволяя неинвазивных мониторинг прогрессирования поражения. Маркировка эндометрия фрагментов достигается инфекции с аденовирус, спроектирован, чтобы выразить mCherry, белок, испуская флуоресценции в регионе ближнего инфракрасного. На рисунке 1

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Протокол здесь подробно описывает реализацию животной модели эндометриоз, в котором архитектура имплантации поражения архитектура сохраняется пока одновременно позволяет реального времени оценки флуоресценции испускаемого mCherry с меткой эндометрия ткани. В этом протоколе мы описывают использование определенной в естественных условиях тепловизионные системы и соответствующего программного обеспечения неинвазивно оценить флуоресценции, испускаемых помечены поражение. Каждый пользователь должен адаптировать протокол в зав...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы не имеют ничего сообщать.

Благодарности

Эта работа была поддержана испанским министерством экономики и конкурентоспособности через Мигель Сервет программу [CP13/00077] создана ФЕДЕР (Европейский фонд регионального развития) и присуждена к д-р р. Гомес, а также Карлос III институт здравоохранения гранты Dr R Гомес [ПЭ14/00547 и PI17/02329] и профессор а. Кано [ПЭ12/02582].

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Эндосэмплеры и торговля;Medgyn22720Канюля для забора эндометрия
DMEM MediumVWRHYCLSH30285. FSMedium
Ad-mCherryVector Biolabs1767Аденовирусный вектор экспрессирующий mCherry
PBS, 1x раствор, стерильный, pH 7.4VWRE504-500MLБуфер для стирки
Пеллеты 17-B-Эстрадиол 18 мг/60 днейInnovative Research of AmericaSE-121Гормональные гранулы для грызунов
Vetbond™ Тканевый клей3M780-680Тканевый клей
чашки Петри в кристалле полистиролаLevantina367-P101VR20чашки Петри
Пенициллин-стрептомицинSigmaP4333-100MLАнтибиотики
Шприцы медицинские 10 мл 0,5 млVWRCODA626616Шприцы
нитриловые, неопудренныеVWR112-2754Перчатки
Мягкие швейцарские обнаженные мышиCharles RiverSNUSSFE05Sмыши для эксперимента на животных
Ivis Spectrum In vivo Imaging SystemPerkin Elmer124262In vivo Оборудование для мониторинга
Living Image® (Программное обеспечение Ivis)Перкин Элмер---Программное обеспечение для мониторинга in vivo
Фетальная бычья сывороткаGibco10082147Обогащение сыворотки
96-луночных обработанных клеточных культур Жизненныетехнологии167008Культуральные планшеты
Мочевые колбыSummedical4004-248-001Колбы для мытья
Стерильные хирургические лезвия(Aesculap Division) Sanycare1609022-0008Хирургические лезвия
Isovet 1,000 мг/гB-BRAUNИзофлуран (Обезболивающее)
Buprex® 0,3 мгSchering Plough S.A.---Бупренорфин (Обезболивающий раствор)
Раствор морфина для инъекций 10 мг/мл BBRAUNМорфин (Обезболивающий раствор)
Монофил Рассасывающиеся шовные материалыCOVIDIENШовные материалы
Desinclor chlorhexidinePromedic SAАнтисептический раствор
Микроскопия DMi8Leica Mycrosystems---флуоресцентный микроскоп
Hera Cell 150 ИнкубаторThermo Scientific51026282инкубатор
матки ------------

Ссылки

  1. Nap, A. W., Groothuis, P. G., Demir, A. Y., Evers, J. L., Dunselman, G. A. Pathogenesis of endometriosis. Best Practice & Research: Clinical Obstetrics & Gynaecology. 18, 233-244 (2004).
  2. Holoch, K. J., Lessey, B. A. Endometriosis and infertility. Clinical Obstetrics and Gynecology. 53, 429-438 (2010).
  3. Eskenazi, B., Warner, M. L. Epidemiology of endometriosis. Obstetrics and Gynecology Clinics of North America. 24 (2), 235-258 (1997).
  4. Giudice, L. C., Kao, L. C. Endometriosis. Lancet. 364 (9447), 1789-1799 (2004).
  5. Donnez, J., et al. The efficacy of medical and surgical treatment of endometriosis-associated infertility and pelvic pain. Gynecologic and Obstetric Investigation. 54, 2-7 (2002).
  6. D'Hooghe, T. M., Bambra, C. S., Cornillie, F. J., Isahakia, M., Koninckx, P. R. Prevalence and laparoscopic appearance of spontaneous endometriosis in the baboon (Papio anubis, Papio cynocephalus). Biology of Reproduction. 45 (3), 411-416 (1991).
  7. Dick, E. J., Hubbard, G. B., Martin, L. J., Leland, M. M. Record review of baboons with histologically confirmed endometriosis in a large established colony. Journal of Medical Primatology. 32 (1), 39-47 (2003).
  8. Donnez, O., et al. Induction of endometriotic nodules in an experimental baboon modelmimicking human deep nodular lesions. Fertility & Sterility. 99 (3), 783-789 (2013).
  9. Grummer, R. Animal models in endometriosis research. Human Reproduction Update. 12 (5), 641-649 (2006).
  10. Rossi, G., et al. Dynamic aspects of endometriosis in a mouse model through analysis of implantation and progression. Archives of Gynecology and Obstetrics. 263 (3), 102-107 (2000).
  11. Grummer, R., et al. Peritoneal endometriosis: validation of an in-vivo model. Human Reproduction. 16 (8), 1736-1743 (2001).
  12. Becker, C. M., et al. A novel non-invasive model of endometriosis for monitoring the efficacy of antiangiogenic therapy. The American Journal of Pathology. 168 (6), 2074-2084 (2006).
  13. Laschke, M. W., Giebels, C., Nickels, R. M., Scheuer, C., Menger, M. D. Endothelial progenitor cells contribute to the vascularization of endometriotic lesions. The American Journal of Pathology. 178 (1), 442-450 (2011).
  14. Nap, A. W., et al. Antiangiogenesis therapy for endometriosis. The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism. 89 (3), 1089-1095 (2004).
  15. Wang, C. C., et al. Prodrug of green tea epigallocatechin-3-gallate (Pro-EGCG) as a potent anti-angiogenesis agent for endometriosis in mice. Angiogenesis. 16 (1), 59-69 (2013).
  16. Delgado-Rosas, F., et al. The effects of ergot and non-ergot-derived dopamine agonists in an experimental mouse model of endometriosis. Reproduction. 142 (5), 745-755 (2011).
  17. Al-Jefout, M., Andreadis, N., Tokushige, N., Markham, R., Fraser, I. A pilot study to evaluate the relative efficacy of endometrial biopsy and full curettage in making a diagnosis of endometriosis by the detection of endometrial nerve fibers. American Journal of Obstetrics & Gynecology. 197 (6), 578(2007).
  18. Fortin, M., et al. Quantitative assessment of human endometriotic tissue maintenance and regression in a noninvasive mouse model of endometriosis. Molecular Therapy. 9 (4), 540-547 (2004).
  19. Liu, B., et al. Improved nude mouse models for green fluorescence human endometriosis. Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 36 (6), 1214-1221 (2010).
  20. Wang, N., et al. A red fluorescent nude mouse model of human endometriosis: advantages of a non-invasive imaging method. European Journal of Obstetric Gynecologic and Reproductive Biology. 176, 25-30 (2014).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Мышиная модель эндометриозанеинвазивный флуоресцентный мониторингэкспрессия репортера mCherryчеловеческий эндометриальный ксенотрансплантатсистема визуализации in vivoколичественный флуоресцентный анализмаркировка с помощью аденовирусаимплантация в брюшную полостьреципиентные мыши после оофорэктомииsupplementation гранулами эстрадиола
Неинвазивный мониторинг размера поражения в гетерологичных мыши модели эндометриоза
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.