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방법 논문

희생 빈 섬유 막 세포 배양을 통해 기질 섬유의 생산

7.3K 조회수

⸱

DOI:

10.3791/58791

⸱

2019년 2월 2일

 ,  ,  ,  , 
1Cell & Molecular Biology Program, University of Arkansas, 2Department of Biomedical Engineering, University of Arkansas, 3Ralph E. Martin Department of Biomedical Engineering, University of Arkansas

이 논문에서

요약

이 프로토콜의 목표는 재생 비 계 임 플 란 트의 일환으로 전 임상 평가 위한 적당 한 상처 복구에 대 한 대상 전체 기질 섬유의 생산입니다. 이러한 섬유는 빈 섬유 막에 섬유 아 세포의 문화에 의해 생성 하 고 세포 막의 해체에 의해 추출.

초록

세포 외 기질 (ECM)에서 파생 된 설계 건설 기계 폐쇄 하 고 치유를 상처에 신속 하 게 그들의 잠재력에 대 한 의학에 구동된 상당한 관심을가지고. Fibrogenic 셀 문화에서 에 체 외에서 세포 외 매트릭스의 추출 임상 방해는 xenogeneic epitopes의 존재를 최소화 인간의-그리고 잠재적으로 환자 특정 셀 라인에서 ECM의 생성에 대 한 잠재력을가지고 일부 기존 ECM 제품의 성공입니다. ECM 이식 적합의 생체 외에서 생산에 중요 한 도전이 이다 ECM 생산 세포 배양에 의해 일반적으로 상대적으로 낮은 수익률의. 이 작품에서 셀 희생 빈 섬유 막 건설 기계 내에서 교양된으로 ECM의 생산에 대 한 프로토콜을 설명 합니다. 중공 사막은 fibroblast 세포 라인 전통적인 휴대 매체에 경작 그리고 ECM의 지속적인 스레드를 세포 배양 후 해산. 이 메서드에 의해 생성 결과 ECM 섬유 수 decellularized 고 동결 건조 된, 그것을 렌더링 하는 스토리지 및 이식에 적합.

서론

이식 외과 건설 기계는 상처 복구, 이식 복 벽 수리 혼자1매년 전세계 1 백만 이상의 합성 폴리머 메시의 정착 물. 그러나, 합성 물질 중합체는 전통적으로 이러한 장비의 제조에 사용 되는 주입에 따라 하는 경향이 이물질 응답, 이식의 기능에 해로운 염증의 결과로 및 조직2의 흉터를 자극합니다 . 또한, 주된 합성 메시 물자 (즉, 폴 리 프로필 렌)는 몸에 의해 분명 리 모델링 하지, 그들은 일반적으로 흉터을 어디 용납 될 수 있다, 조직에 적용 가능한 치료의 방향으로 그들의 임상 유용성을 제한 고차 함수 근육 같은 조직. 많은 외과 메쉬 제품을 임상 성공으로 적용 된 반면, 최근 제조 업체 회상 합성 수술의 극대화 임 플 란 트의 중요성을 강조 하는 메쉬 및 interspecies 조직 이식의 합병증 생체 적합성, 수술에 대 한 규제를 강화 하는 FDA 라는 메쉬 제조 업체3,4. 이식 환자 자신의 조직에서 파생 하는 장비의이 면역 반응을 감소 하지만 중요 한 기증자 사이트 사망률5에서 발생할 수 있습니다. 세포 외 기질 (ECM) 건설 기계 생산 체 외에 는 가능한 대안, decellularized ECM 건설 기계 전시 우수한 생체 적합성로 특히 헌 ECM의 경우 임 플 란 트6.

환자 조직 자가 이식에 대 한 수확의 한정 된 가용성 및 기증자 사이트에서 기능을 방해한의 위험, ECM 생산 능력을 생체 외에서 인간 세포 선의 문화에서 투어 또는, 만약에 가능 하다 면, 환자 자신의 셀 매력적인 대안 이다입니다. ECM에서 생체 외에서 의 상당한 금액의 제조에 있는 주요 과제는 이러한 어려운 캡처 분자의 격리. 이전 작품에서는, 우리는 증명 하고있다 ECM ECM 분 비 이식7, decellularized 수 있는 수익률 ECM 문화 기간 후 해산는 희생 폴리머 폼에서 섬유 아 세포를 배양 하 여 생산 될 수 있다 8,,910. ECM 생산에 폼은 폼의 내부 아키텍처를 채택 하는 경향이, 빈 섬유 막 (HFMs) ECM의 생산을 위한 희생 발판으로 탐구 했다. 여기에 설명 된는 방법 주어 실험실 규모 세포 문화 품질 빈 섬유 막과 같은 섬유 문화의 기간 뒤에에서 대량 기질 섬유의 추출의 제조에 대 한. 이 정적 문화 방식은 쉽게 채택할 수 있는 실험실 표준 포유류 세포 배양 장비를 포함 하 여입니다. ECM이 접근이 방식에 의해 생산은 다양 한 임상 응용으로 적용할 수 있습니다.

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프로토콜

1. 희생 중공 사막은 사용 하 여 세포 외 매트릭스의 생산

주의: N-메 틸-2-pyrrolidone는 자극 용 매 및 생식 toxicant. NMP에 노출 피부, 눈, 코과 목에 자극을 일으킬 수 있습니다. NMP를 처리할 때 용 매 저항 개인 보호 장비를 사용 해야 합니다. NMP의 사용 연기 후드 내에서 수행 되어야 합니다.

  1. 중공 사막은 polysulfone 폴리머 솔루션의 준비
    1. Polysulfone 펠 릿의 70 g의 무게 (35의 분자량 kD) 분석 균형을 사용 하 여 무게 보트에서.
    2. 깨끗 한 붕 규 산 플라스 크를 N-메 틸-2-pyrrolidone (NMP)의 314 mL (323.3 g)를 전송 합니다.
    3. 저 어 바를 교 반기에 NMP 그리고 장소 플라스 크와 플라스 크에 놓습니다. 교 반기 회전의 적당 한 속도를 설정 합니다.
    4. 건조 퍼 널을 사용 하 여 천천히 NMP와 함께 플라스 크에 polysulfone의 준비 70 g를 삽입.
    5. 3 일 동안 실내 온도에, 또는 무 균 때까지 저 어을 폴리머 "마약" 솔루션을 수 있습니다.
  2. 동심도 설정 하 고 빈 섬유 막 spinneret의 청소
    참고: Spinnerets는 상업적으로 사용할 수; 올바른 spinneret 차원 성공적인 막 제조에 중요 한 고 자료의 테이블에에서 나열 됩니다. spinneret spinneret 바늘은 특히 허약으로 매우 부드럽게 처리 합니다.
    1. 신중 하 게는 spinneret를 분해 하는 적절 한 드라이버 비트 드릴 또는 드라이버를 사용 합니다.
    2. 부드럽게 아세톤 입구와 출구의 수집 처리 유리 비 커에 어떤 아세톤 및 잔류 폴리머 spinneret 통해 흐름.
    3. 테이블 바이스에 위쪽으로 직면 하는 바늘은 spinneret의 상체를 보안 합니다.
    4. 상체에 spinneret의 콘센트 (아래) 본문을 놓습니다.
    5. 바이스에 고정 spinneret 바늘은 직접 콘센트 본문의 때까지 상체를 들고는 spinneret의 콘센트 시체를 옆으로 이동 합니다.
    6. 신중 하 고 천천히 spinneret 콘센트에서 보이는 바늘 중심으로 유지 하면서는 spinneret 두 개의 시체를 연결 하는 나사를 다시 삽입 합니다.
  3. Polysulfone 빈 섬유 막의 제조
    1. 45 mL N-메 틸-2-pyrrolidone의과 이온된 수, 이온된 수와 NMP의 15% 혼합물 형성의 255 mL를 포함 하는 "구멍 솔루션"을 준비 합니다.
    2. 동심 중공 섬유 막 spinneret 룸 온도 수돗물 목욕의 표면 위에 8 cm를 탑재 합니다.
    3. 적어도 350 mL의 내부 볼륨 있는 두 개의 별도 강철 압력 용기에는 spinneret의 폴리머 입구와는 spinneret의 구멍 입구를 연결 합니다. 두 배는 그들의 출구에 체크 밸브를가지고 있어야 합니다.
    4. 압력 용기의 각각 별도 N2 가스 실린더 조정기에 연결
    5. 준비 마약 솔루션 (~ 315 mL)을 삽입 하는 spinneret의 폴리머 입구에 연결 된 압력 용기에 깔때기를 사용 합니다. 그릇 상단의 단단히 밀폐 된 확인 하십시오.
    6. 사용 퍼 널은 준비를 삽입 하는 spinneret의 구멍 입구에 연결 된 압력 용기로 솔루션 (300 mL)를 낳았다. 그릇 상단의 단단히 밀폐 된 확인 하십시오.
    7. 열 구멍 선박에 대 한 체크 밸브 먼저, 다음 폴리머 선박 두 번째. spinneret 충분히 깨끗 한 경우에, 보어 솔루션 spinneret 콘센트에서 스트림 시작 됩니다.
    8. 두 배 1 psi 압력 시각적으로 폴리머와 보어 솔루션 결합 된 스트림을 문의 물 목욕으로 연속 화이트 필 라 멘 트 계기와 spinneret 종료 됩니다 확인 합니다.
    9. 목욕의 센터에서 롤러 아래 초기 섬유 안내 하 긴 집게를 사용 하 고 회전 바퀴는 모터에 연결 된 주위 초기 섬유를 바람.
    10. 감는 장치 바퀴와 분당 약 2 미터의 속도로 회전 하는 모터를 설정 합니다.
    11. 약간 조정 레 귤 레이 터 또는 정상 상태 흐름 달성 될 때까지 필요에 따라 감는 장치 바퀴 속도를 확인 합니다. 초기 섬유 물 목욕의 표면 가진 90 ° 각을 형성 한다.
    12. 닫기 N2 실린더 레 귤 레이 터 및 압력 용기 밸브를 확인 하 고 모든 고분자와 보어 솔루션 혈관에서 압출 된 후 감는 장치 바퀴 모터를 분리.
    13. 준비 된 중공 사막은 제거 하 고 교환 하는 이온된 수 잔여 용 매를 제거 하는 하루에 한 번씩 3 일 동안 이온된 물 욕조에 넣어.
    14. 압력가 마로 소독 하 여 중공 사막은 소독 30 분 또는 1 일 70% 에탄올에 대 한 그들을 immersing 하 여 121 ° C에서 그들.
  4. 셀 빈 섬유 막의 시드
    참고: 모든 셀 문화 절차 biosafety 내각 내에서 수행 되어야 합니다.
    1. PBS에서 소 플라즈마 fibronectin의 20 µ g/mL 솔루션 빈 섬유 막 치료 (pH = 7.4) 셀 첨부 파일 홍보 하.
      1. 분말된 소 플라즈마 fibronectin 무게 보트에서의 1 밀리 그램의 무게와 살 균 PBS의 1 mL에 용 해 (pH = 7.4) 살 균 1.5 mL microcentrifuge 튜브에서.
      2. 30 분 동안 인큐베이터에서 1mg/mL 소 플라즈마 fibronectin 솔루션을 품 어. 살 균 50 mL 원뿔 원심 분리기 튜브에서 살 균 PBS의 49 mL에 솔루션을 추가 합니다.
      3. 1 시간 동안 5% CO2 와 37 ° c 배양 기에서 소 플라즈마 fibronectin의 준비 50 mL에 섬유를 품 어. 나중에 사용 및 4 ° c.에 살 균 50 mL 원뿔 원심 분리기 튜브에 저장소 fibronectin 솔루션을 가라앉 히 다
    2. 살 균 microscissors를 사용 하 여 섬유 원하는 길이로 잘라 (< 6 cm).
    3. 시드 1 mL 주사기 21-게이지 바늘을 사용 하 여 섬유 당 100000 세포 밀도에 빈 섬유 막의 루미나에 직접 씨앗 fibroblast 세포.
      참고: 로드 주사기에 세포 현 탁 액을 준비 하기 위한 실용적인 대상 매체의 모든 30 microliters 100000 셀 서 스 펜 션 밀도입니다.
    4. 6 시드 섬유 6 cm 직경 페 트리 접시에 놓습니다. 5% CO2 와 37 ° C에서 5 분 동안 품 어 하 시드 섬유를 허용 합니다.
    5. 부 화에서 시드 섬유를 제거 하 고 DMEM/F-12 포함 된 50 µ g/m l L-아 스 코르 빈 산 및 150 µ g/m l L-아 스 코르 빈 산 2 인산 염의 최종 농도에서 최대 3 주 동안 그들을 문화 (갓 준비 하 고 살 균 필터링), 5 ng/mL TGF-β1 (에서 살 균 필터링-20 ° C에 저장 된 aliquots), 그리고 6 cm 37 ° c.에 5% CO2 배양 기에서 배양 접시에에서 1% 페니실린-스 Exchange 셀 중간 매 2 일입니다.
  5. 교양된 빈 섬유 막에서 세포 외 매트릭스의 추출
    1. 장소는 집게를 사용 하 여 개별 섬광 유리병으로 섬유를 경작.
    2. NMP의 최대 5 mL 유리 피 펫을 사용 하 여 각 유리병에 넣으십시오.
    3. NMP, NMP의 3 개의 교류의 총 수행에서 빈 섬유를 담가. 천천히 1 mL 피 펫을 사용 하 여 추출 된 ECM의 찢 어 방지 하기 위해 오래 된 NMP 발음.
      참고: 신선한 NMP를 추가할 때 그것은 도움이 유리병을 기울기 고 NMP, 측의 아래 실행 허용 그렇지 않으면 나머지 ECM 발판을 복종 된다 전단이 찢 어 될 수 있습니다.
    4. NMP를 제거 하 고 씻어 서 이온된 수에 3 번 결과 ECM 스레드.
    5. 3 인치, 1 인치 폭의 길이에 실리콘 고무의 1/32 인치 두꺼운 시트 고는 8 m m 4mm 고무의 길이의 중앙에 직사각형 형에 의해 잘라.
    6. 30 분 동안 121 ° C에서 표준 3-인치 1 인치 현미경 슬라이드와 압력솥에 고무의 준비 조각을 놓습니다.
    7. 오픈 공간을 볼 수 있을 때까지 각 ECM 섬유를 8 m m에서 나란히 4 m m 실리콘 몰드로 하다.
    8. 50 mL 원뿔 원심 분리기 관으로 금형을 놓고 완전히 고정 될 때까지-80 ℃에서 동결 합니다.
    9. 하룻밤 또는 완전히 건조 될 때까지 냉동된 ECM 메쉬를 lyophilize. Decellularization에 대 한 준비까지 4 ° C에서 메쉬를 저장 합니다.

2입니다. 세포 외 매트릭스의 decellularization

  1. 1% (w/w%) 나트륨 라우릴 황산 염 (SDS) 이온된 수에의 한 솔루션을 준비 합니다.
  2. 부드러운 동요와 로커에 실 온에서 24 시간 동안 1 %SDS 있는 형에서 추출 된 기질을 품 어.
  3. 린스는 세 번에 멸 균 인산 염 버퍼 식 염 수 (PBS) 린스 당 PBS의 3 mL를 사용 하 여 부드러운 동요와 세포 외 기질을 추출.
    참고: 린스 준비 장비의 찢을 최소화 하기 위해 부드럽게 수행 되어야 한다.
  4. DNAse/RNAse 소화 버퍼 1 리터를 준비 합니다.
    참고: DNAse/RNAse 소화 버퍼는 4 ° c.에 몇 달 동안 저장 될 수 있습니다.
    1. Tris HCl의 1.54 g, MgCl2, 308 mg 및 별도 무게 보트에서 CaCl2 의 56 밀리 그램 무게.
    2. 저 어 바 큰 플라스 크에 이온을 제거 된 물 1 l Tris HCl, MgCl2및 CaCl2 를 결합 하 고 모든 구성 요소는 해산 때까지 휘저어.
    3. 멸 균 1 L 붕 병 및 4 ° c.에가 게에는 0.22 μ m 필터와 살 균 필터 소화 버퍼
  5. 5 mL DNAse/RNAse 소화 솔루션의 준비.
    참고: 소화 솔루션 준비의 24 시간 안에 사용 되어야 한다.
    1. 0.125 mg (50 구) DNAse의 무게는 무게에 나 보트 및 소화 버퍼의 5 mL을 추가.
    2. 소화 버퍼에 RNAse A 재고 솔루션의 75 µ L를 추가 합니다.
  6. 소화 솔루션 각 몰드를 6 시간 동안 4 ° C에서 품 어.
  7. 소화 솔루션을 발음 하 고 메 마른 PBS에 세 번 씻어.
  8. PBS를 발음 하 고 10% 페니실린-스 PBS에 4 ° c.에 하룻밤 사이에 건설 기계를 품 어
  9. 페니실린-스를 발음 하 고 메 마른 PBS에 건설 기계 세 번을 씻어.
  10. 50 mL 원뿔 원심 분리기 관으로 금형을 놓고-80 ° c.에 동결
  11. 하룻밤 또는 완전히 건조 될 때까지 decellularized ECM 메쉬를 lyophilize.
  12. 사용 중인 4 ° C에서 살 균 컨테이너 biosafety 후드 내에서 건설 하는 동결 건조 된 기계를 전송 합니다.

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결과

희생 건설 기계에서 세포 외 매트릭스의 성공적인 생산은 적절 한 비 계 제조, 세포 배양, 그리고 용 린스 절차에 관 하 우발적 이다. 빈 섬유 막의 제조는 상용 철강의 환대를 통해 폴리머 솔루션의 돌출을 사용 하 여 상업적으로 사용 가능한 구성 요소 (그림 1)에서 조립 드라이-제트 젖은 회전 시스템을 사용 하 여 수행 spinneret (내부 직경 0.8 m m, 외경 = = 1.6 m m) 물 목욕과 접촉 시 빈 섬유 막으로 침전 폴리머 솔루션의 초기 튜브를 생성 하기 위해.

HFMs에서 ECM 추출 예제 과정은 그림 2에 나와 있습니다. 그림 3A 는 손가락 같은 모는 비대칭 막의 특성의 외부 및 ...

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토론

설명 하는 프로세스의 대량 ECM 생체 재료에서 생체 외에서 중공 사막은 표준 셀 문화 장비 뿐만 아니라 세포 막의 저렴 한 대량 생산을 위한 수 있도록 드라이-제트 젖은 회전 시스템에 의해 캐스팅을 사용 하 여 생산 가능 이 프로토콜에서 조작 막 사용 하기 위한 세포 배양에서 하는 동안 설명 하는 시스템 또한 목적을 위해 분리, 기 공 크기 분포 및 빈 섬유 크기 가변 변화 하 여 막의 생산을 위해 적용할 수 있습니다. spinneret 크기, 폴리머 사용, 마약 하 고 보어 유량, 감는 속도, 그리고 환경 조건. 13 상세 프로토콜 중공 사막은 고용, 하지만 원칙적으로 어떤 분해할 수 있는 세포 배양 발판 오픈 셀 등 적절 한 전송 속성을 폼 사용할 수, 이전 작업7, 에서 같이 8,9. 이 일반적인 ...

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공개 사항

저자 들은 아무 경쟁 금융 관심사 선언 합니다.

감사의 글

이 간행물에 보고 된 연구 국립 연구소의 관절염과 Musculoskeletal 및 보너스 번호 R15AR064481, 국립 과학 재단 (CMMI-1404716)에서 국립 보건원의 피부 질환에 의해 지원 되었다 뿐만 아니라 아칸소 생물 과학 연구소입니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
1/32 인치 두께의 실리콘 고무GraingerB01LXJULOM
20 mL 섬광 바이알, 붕규산 유리, 일회용 -VWRVWR 66022-004흰색 우레아 캡과 코르크 호일 라이너가 부착
된 3 인치 x 1 인치 현미경 슬라이드VWR75799-268
4C 냉장고Thermo Fisher ScientificFRGG2304D모든 상업용 4C 냉장고 그것으로 충분할 것입니다.
50 mL 튜브VWR21008-178
6-웰 세포 배양 플레이트VWR10062-892대체 브랜드 사용 가능
아세톤VWRE646대체 브랜드 사용 가능
보어 용기McMaster-Carr89785K8676 ft 316 스틸 튜빙
소 플라즈마 피브로넥틴Thermo Fisher Scientific330100181 mg 제공 동결건조된 단백질
CaCl2VWR/Amresco97062-590
세포 배양 인큐베이터(CO2CO2 공급 포유류 세포 인큐베이터로 충분합니다.
일회용 혈청학 피펫, 유리 - Kimble ChaseVWR14673-208대체 브랜드는
DMEM / F-12, HEPESThermo Fisher Scientific1133003237 °C에서 따뜻한 수조를 사용할 수 있습니다. C 사용 전 30분 동안
DNase ISigma-AldrichDN25-10MG
도프 용기McMaster-Carr89785K8676 ft 316 스틸 튜빙
에탄올VWRBDH1160멸균을 위해 70%로 희석
Fetal Bovine Serum, 적격, 미국 원산지 - GibcoThermo Fisher Scientific2614007910% 농도의 성장 배지와 혼합(50mL 배지 내 50mL)
4개의 1/4인치에서 1인치 환원 유니온스웨즈락SS-1610-6-4각 용기의 각 입구와 출구에 각각 하나의 환원 유니
건조기/동결 건조기Labconco117 (A65312906)모든 동결 건조기로 충분합니다.
육각형 정전기 방지 폴리스티렌 계량 접시 - VWRVWR 89106-752모든 계량 보트로 충분합니다
중공 섬유 멤브레인 침지 수조34L 폴리프로필렌 통을 사용하거나 용접 강판으로 대형 수조 용기를 제작할 수 있습니다
중공 섬유 멤브레인 방적돌기AEIhttp://www.aei-spinnerets.com/specifications.html주문 제작. 내경 = 0.8 mm, 외경 = 1.6 mm
열판/교반기VWR97042-634
인간 TGF-β 1PeproTech100-21
L-아스코르브산Sigma-Aldrich,A4544-25G
, L-아스코르브산, 2-인산염, Sigma-Aldrich, A8960-5G
, L-글루타민(200 mM) - GibcoThermo Fisher Scientific1% 농도의 성장 배지와 25030081 믹스(500mL 배지 내 5mL)
MgCl2VWR/Alfa AesarAA12315-A1
마이너스 80 냉동고Thermo Fisher ScientificUXF40086A상업용 -80C 냉동고로 충분합니다.
N2 가스 실린더 (2개)
NIH/3T3 세포ATCCCRL-1658대체 섬유생성 세포주를 사용할 수 있습니다.
N-methyl-2-pyrrolidoneVWRBDH1141대체 브랜드를 사용할 수 있습니다
페니실린/스트렙토마이신 용액 - GibcoThermo Fisher Scientific151401220.1% 농도의 성장 배지와 혼합(500mL 배지 내 0.5mL)폴리
설폰시그마-알드리치(Polysulfone Sigma-Aldrich428302평균 Mw가 35,000 달톤인 모든 폴리설폰을 사용할 수 있습니다
피펫-에이드 피펫팅 장치 - DrummondVWR53498-103대체 브랜드를 사용할 수 있습니다
PTFE 튜빙 (1/4 인치 내경)McMaster-Carr52315K24대체 브랜드를 사용할 수 있습니다.
쥐 골격근 섬유아세포(Rat skeletal muscle fibroblasts) 쥐의 골격근과 독립적으로 분리되어 있습니다. 대안적인 섬유생성 세포주를 사용할 수 있다.
RNase ASigma-AldrichR4642
실리콘 시트McMaster-Carr1460N28
테이크업 모터GreartisanB071GTTSV3200 RPM DC 모터
Tris HCl VWR/Amresco97063-756
2개의 니들 밸브SwagelokSS-1RS4
적절한 온 동결 , , , ) . 휴대용

참고문헌

  1. Cobb, W. S., Kercher, K. W., Heniford, B. T. The argument for lightweight polypropylene mesh in hernia repair. Surgical Innovation. 12 (1), 63-69 (2005).
  2. Morais, J. M., Papadimitrakopoulos, F., Burgess, D. J. Biomaterials/Tissue Interactions: Possible Solutions to Overcome Foreign Body Response. The AAPS Journal. 12 (2), 188-196 (2010).
  3. Simon, P., et al. Early failure of the tissue engineered porcine heart valve SYNERGRAFT® in pediatric patients. European Journal of Cardio-Thoracic Surgery. 23 (6), 1002-1006 (2003).
  4. FDA strengthens requirements for surgical mesh for the transvaginal repair of pelvic organ prolapse to address safety risks. , Food and Drug Administration. (2016).
  5. Kartus, J., Movin, T., Karlsson, J. Donor-site morbidity and anterior knee problems after anterior cruciate ligament reconstruction using autografts. Arthroscopy: The Journal of Arthroscopic & Related Surgery. 17 (9), 971-980 (2001).
  6. Lu, H., Hoshiba, T., Kawazoe, N., Chen, G. Autologous extracellular matrix scaffolds for tissue engineering. Biomaterials. 32 (10), 2489-2499 (2011).
  7. Wolchok, J. C., Tresco, P. A. The isolation of cell derived extracellular matrix constructs using sacrificial open-cell foams. Biomaterials. 31 (36), 9595-9603 (2010).
  8. Roberts, K., Schluns, J., Walker, A., Jones, J. D., Quinn, K. P., Hestekin, J., Wolchok, J. C. Cell derived extracellular matrix fibers synthesized using sacrificial hollow fiber membranes. Biomedical Materials. 13 (1), (2017).
  9. Hurd, S. A., Bhatti, N. M., Walker, A. M., Kasukonis, B. M., Wolchok, J. C. Development of a biological scaffold engineered using the extracellular matrix secreted by skeletal muscle cells. Biomaterials. 49, 9-17 (2015).
  10. Kasukonis, B. M., Kim, J. T., Washington, T. A., Wolchok, J. C. Development of an infusion bioreactor for the accelerated preparation of decellularized skeletal muscle scaffolds. Biotechnology Progress. 32 (3), 745-755 (2016).
  11. Murad, S., et al. Regulation of collagen synthesis by ascorbic acid. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 78 (5), 2879-2882 (1981).
  12. Zhang, Y., et al. Tissue-specific extracellular matrix coatings for the promotion of cell proliferation and maintenance of cell phenotype. Biomaterials. 30 (23-24), 4021-4028 (2009).
  13. Feng, C. Y., Khulbe, K. C., Matsuura, T., Ismail, A. F. Recent progresses in polymeric hollow fiber membrane preparation, characterization and applications. Separation and Purification Technology. 111, 43-71 (2013).
  14. Domb, A. J., Kost, J., Wiseman, D. Handbook of Biodegradable Polymers. , CRC Press. (1998).

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