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Articolo metodologico

Strutture a livello molecolare interfacciale di polimeri e biomacromolecole rivelate tramite spettroscopia vibrazionale di generazione della frequenza di somma

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DOI:

10.3791/59380

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13 agosto 2019

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In questo articolo

Sommario

Essendo ampiamente utilizzata, la spettroscopia vibrazionale della generazione di frequenza della somma (SFG) può aiutare a rivelare l'ordine conformazionale della catena e il cambiamento strutturale secondario che avviene nelle interfacce polimeriche e biomacromolecolari.

Abstract

Come spettroscopia ottica non lineare di secondo ordine, la spettroscopia vibrazionale di generazione della frequenza della somma (SFG) è stata ampiamente utilizzata nello studio di varie superfici e interfacce. Questa tecnica ottica non invasiva può fornire le informazioni locali a livello molecolare con sensibilità monostrato o submonostrato. Qui stiamo fornendo una metodologia sperimentale su come rilevare selettivamente l'interfaccia sepolta sia per le macromolecole che per le biomacromolecole. Con questo in mente, vengono discusse le strutture secondarie interfacciali della fibroina di seta e delle strutture idriche intorno al modello short-chain oligonucleotide duplex. Il primo mostra una sovrapposizione a catena o un effetto di confinamento spaziale e il secondo mostra una funzione di protezione contro gli ioni Ca 2 opiù risultanti dalla sovrastruttura del colonna vertebrale chirale dell'acqua.

Introduzione

Lo sviluppo della spettroscopia vibrazionale di generazione della frequenza di somma (SFG) può essere datato al lavoro svolto da Shen et al. trent'anni fa1,2. L'unicità della selettività interfacciale e della sensibilità sub-monostrato rende la spettroscopia vibrazionale SFG apprezzata da un gran numero di ricercatori nei campi della fisica, della chimica, della biologia e della scienza dei materiali, ecc.3,4 ,5. Attualmente, un'ampia gamma di questioni scientifiche relative alle superfici e alle interfacce è in fase....

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Protocollo

1. SFG sperimentale

  1. Utilizzare un sistema SFG picosecondo commerciale (Table of Materials), che fornisce un fascio fondamentale di 1064 nm con una larghezza dell'impulso di 20 ps e una frequenza di 50 Hz, basata su un laser Nd:YAG.
  2. Convertire il fascio fondamentale da 1064 nm in un fascio da 532 nm e in un fascio di 355 nm utilizzando il secondo e il terzo modulo armonico. Guidare direttamente il fascio di 532 nm come un fascio di luce di ingresso e generare l'altro fascio a infrarossi (IR) di ingresso che copre l'intervallo di frequenza da 1000 a 4000 cm-1 attraverso la generazione parametrica ottica (O....

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Risultati

Nella parte del coefficiente Fresnel della Sezione Protocollo, abbiamo dimostrato che, teoricamente, è possibile rilevare selettivamente una sola interfaccia alla volta. Qui, sperimentalmente, abbiamo confermato che questa metodologia è fondamentalmente corretta, come illustrato nella Figura 5 e Figura 6.

Figura 5 Mostra la struttura PHEMA interfacciale sepolta dopo l'intrusione dell'acqua con una pellico.......

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Discussione

Per studiare le informazioni strutturali a livello molecolare, SFG ha i suoi vantaggi intrinseci (ad esempio, sensibilità monostrato o sub-monostrato e selettività interfacciale), che possono essere applicati per studiare varie interfacce, come il solido/solido, solido/ interfacce liquide, solide/gas, liquide/gas, liquide/liquide. Anche se la manutenzione dell'apparecchiatura e l'allineamento ottico richiedono ancora molto tempo, il payoff è significativo in quanto è possibile ottenere le informazioni dettagliate a livel.......

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Dichiarazioni

Non abbiamo niente da rivelare.

Ringraziamenti

Questo studio è stato sostenuto dal Programma di sviluppo chiave dello Stato per la ricerca di base della Cina (2017YFA0700500) e dalla National Natural Science Foundation of China (21574020). I Fondi di Ricerca Fondamentali per le Università Centrali, un progetto finanziato dal Programma Accademico Prioritario Sviluppo degli Istituti di Istruzione Superiore jiangsu (PAPD) e dal Centro di Dimostrazione Nazionale per l'Ingegneria Biomedica Sperimentale Anche l'istruzione (Southeast University) è stata molto apprezzata.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfocolina (DPPC) Avanti Polar Lipids, Inc.850355P-1g
Etanolo anidroSinopharm Chemical Reagent Co., Ltd100092680≥ 99,7%
Prisma CaF2Chengdu YaSi Optoelectronics Co., Ltd.
Cloruro di calcio anidroSinopharm Chemical Reagent Co., Ltd10005817≥ 96,0%
DPPC deuterato (d-DPPC)Avanti Polar Lipids, Inc.860345P-100mg
Forno elettromagneticoZhejiang Supor Co., LtdC21-SDHCB37
Langmuir-Blodgett (LB) tramiteKSV NIMA Co., Ltd.KN 2003
bromuro di litio anidroSinopharm Chemical Reagent Co., Ltd20056926
Sistema di sintesi Milli-QMilliporeAcqua ultrapura
Detergente al plasmaChengdu Mingheng Science& Technology Co., LtdPDC-MGPulizia al plasma di ossigeno
Poli(2-idrossietilmetacrilato) (PHEMA)Sigma-Aldrich Co., LLC.192066 MSDSMw = 300 000
PolistireneSigma-Aldrich Co., LLC.330345 MSDSMw = 48 kDa e Mn = 47 kDa
bozzoliDa Bombyx mori
Singolo filamento complementare di oligonucleotideNanjing Genscript Biotechnology Co., Ltd.H035965'-CGAAGGCTTCCAGCT-3'Singolo
filamento di oligonucleotideNanjing Genscript Biotechnology Co., Ltd.H04936  3¢-estremità modificata da colesterolo-trietilene glicole (Chol-TEG) (5¢-GCTTCCGAAGGTCGA-3¢)
Carbonato di sodio anidroSinopharm Chemical Reagent Co., Ltd10019260≥ 99,8%
Spin-coaterIstituto di Microelettronica dell'Accademia Cinese delle ScienzeKW-4APer la preparazione di film ploymer 
Profilatore a gradiniVeecoDEKTAK 150Per la misura dello spessore del film
Sistema di spettroscopia vibrazionale a somma di frequenza (SFG)EKSPLAUn sistema SFG commerciale a picosecondi
di seta

Riferimenti

  1. Shen, Y. R. Optical Second Harmonic Generation at Interfaces. Annual Review of Physical Chemistry. 40, 327-350 (1989).
  2. Shen, Y. R. Surface properties probed by second-harmonic and sum-frequency generation. Nature. 337, 519-525 (1989).
  3. Lu, X....

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Ristampe e permessi

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