Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Хроническая пост-Ишемия Боль Модель для комплексного регионального болевого синдрома Тип-I у крыс

7.4K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/60562

⸱

21 января 2020 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Приведенный здесь протокол, в который подробно описаны шаги по созданию животной модели хронической послеишемской боли (CPIP). Это хорошо признанная модель, имитирующая человеческий сложный региональный болевой синдром типа I. Механическая и тепловая гиперчувствительность дополнительно оценивается, а также капсаицин-индуцированного ноцифенсивного поведения наблюдается в модели CPIP крысы.

Аннотация

Сложный региональный болевой синдром типа I (CRPS-I) является неврологическим заболеванием, которое вызывает сильную боль среди пациентов и остается нерешенным заболеванием. Тем не менее, основные механизмы КРБС-Я до сих пор не выявлено. Известно, что ишемия / реперфузии является одним из ведущих факторов, вызывающих КРБС-I. С помощью длительной ишемии и реперфузии задней конечности, крыса хронической после ишемии боли (CPIP) модель была создана для имитации КРБС-I. Модель CPIP стала хорошо признанной животной моделью для изучения механизмов CRPS-I. В этом протоколе описаны подробные процедуры, связанные с созданием крысиной модели CPIP, включая анестезию, за которой следует ишемия/реперфузия задней конечности. Характеристики модели крысы CPIP дополнительно оцениваются путем измерения механической и тепловой гиперчувствительности задней конечности, а также ноцифенцев реакции на острый капсаицин инъекции. Крыса CPIP модель экспонатов несколько КРБС-I-подобных проявлений, в том числе отек задних конечностей и гиперемии на ранней стадии после создания, стойкие тепловой и механической гиперчувствительности, и увеличение ноцифенцеватных реакций на острый капсаицин инъекции. Эти характеристики делают его подходящей животной моделью для дальнейшего изучения механизмов, участвующих в КРБС-I.

Введение

Комплексный региональный болевой синдром (КРБС) отражает сложные и хронические болевые симптомы в результате переломов, травм, хирургии, ишемии или травмы нерва1,2,3. КРБС делится на 2 подкатегории: CRPS type-I и type-II (CRPS-I и CRPS-II)4. Эпидемиологические исследования показали, что распространенность КРБС была приблизительно 1:20005. КРБС-I, который не показывает никаких очевидных повреждений нерва, может привести к хронической боли и резко влияет на качество жизни пациентов. Текущие доступные методы лечения показывают неад....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Протоколы животных были одобрены Комитетом по этике животных Китайского медицинского университета Чжэцзяна.

1. Звери

  1. Получить самца Спраг-Доули (SD) крыс (280-320 г, 8-10 недель возраста) из Шанхайского центра лабораторных животных. Дом животных в Чжэцзян Китайский медицинский университет Лаборатория животных центра. Обратите внимание, что условия размножения должны включать 12 ч/ 2ч светлых/темных циклов и поддерживать постоянную температуру при температуре 24 градусов по Цельсию. Обеспечить воду и пищу объявление libitum. Обратите внимание, что в общей сложности 48 крыс используются в этом исследовании. Одно замечание, ....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

После размещения O-кольцо на лодыжке, ipsilateral задняя лапа кожа показала цианоз, указание гипоксии ткани(Рисунок 1A). После резки O-кольцо, ipsilateral задняя лапа начала заполняться кровью и показал сильный отек, который продемонстрировал интенсивный признак гиперемии(Рисунок 1A). Отек лап постепенно уменьшился и вернулся к нормальной 48 ч после ишемической / реперфузии процедуры (двусторонний ANOVA с Sidak после специальног.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Этот протокол описывает подробные методы для создания модели крыс CPIP путем применения ишемии / реперфузии задних конечностей крыс. Она включает в себя оценку внешний вид задних конечностей, отек, механические / тепловой гиперчувствительности, и острое ноцифенцевальное поведение в ответ на капсаицин инъекции.

Ишемия/реперфузия конечностей является распространенным фактором, способствующим КРБС-I у пациентов12. Этот протокол описывает, как установить крысы CPIP модель, .......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы не заявляют о каких-либо конфликтах интересов в этой работе.

Благодарности

Этот проект был спонсирован Национальным фондом естественных наук Китая (81873365 и 81603676), Чжэцзян провинциальных природных наук фонды для уважаемых молодых ученых (LR17H270001) и научно-исследовательских фондов из Чжэцзян Китайский медицинский университет ( 2019J01, 2018 Y37, 2018 Y19).

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
1,5 мл Eppendorf TubeEppendorf22431021
DMSO Sigma-AldrichD1435
КапсаицинAPEXBIOA3278
Цифровой штангенциркульMeinaiteNA
Уплотнительное кольцо Уплотнительные кольца Западныйнитрил 70 Дюрометр7/32 дюйма<бр/> внутренний диаметр
Подошвенный испытательный аппаратUGO Basile, Италия37370
von Frey filamentsUGO Basile, ИталияNC12775

Ссылки

  1. Goh, E. L., Chidambaram, S., Ma, D. Complex regional pain syndrome: a recent update. Burns, Trauma. 5 (1), 2(2017).
  2. Birklein, F., Ajit, S. K., Goebel, A., Rsgm, P., Sommer, C. Complex regional pain syndrome - phenotypic characteristics and potential biomarkers.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

ишемия-реперфузиязадняя конечностьмеханическая аллодиниятермическая гипералгезияинъекция капсаицинанити фон Фреяметод Харгривзаноцицептивное поведение