Summary
ويوصف إجراء يبين انتكاسة قوية ناجمة عن الحرمان الحاد من الغذاء إلى الهيروين بعد الامتناع عن ممارسة الجنس بعد فرض العقوبة. ونفذ بنجاح نموذج للامتناع عن ممارسة الجنس مفروض عليه العقوبة باستخدام الجدول الزمني لسلسلة البحث واتخاذ الإدارة الذاتية للهيروين. ثم تجرى اختبارات البحث عن الهيروين بعد 24 ساعة من الإجهاد الناجم عن الحرمان من الطعام.
Abstract
نموذج إجراء الامتناع عن ممارسة الجنس المفروض على العقوبة الامتناع المفروض ذاتيا الذي يبدأه البشر بسبب العواقب السلبية المرتبطة بتعاطي المخدرات. تم تنفيذ هذا النموذج في تجارب باستخدام أنواع مختلفة من المواد المتعاطية مثل الميثامفيتامين والكوكايين والكحول. ومع ذلك، لم يثبت الامتناع عن ممارسة الجنس الناجم عن العقاب في الحيوانات المدربة على الهيروين. علاوة على ذلك ، فإن الإجهاد الحاد هو سبب رئيسي للانتكاس في البشر والنماذج الحيوانية. وقد ثبت سابقا أن الحرمان الحاد من الغذاء أدى بقوة إلى إعادة البحث عن الكوكايين والهيروين المنطفئين. يمكن استخدام الإجراء الموصوف هنا لتقييم آثار التعرض للإجهاد الحاد على الهيروين الذي يسعى بعد الامتناع عن ممارسة الجنس الذي تفرضه العقوبة. وزرع ما مجموعه 8 فئران بقسطرة وريدية مزمنة (أي فأر) ودربت على الإدارة الذاتية للهيروين (0.1 مغ/كغ/تسريب) لمدة 18 يوما في إطار جدول زمني متسلسل بالسلاسل. وأتاح إكمال وصلة البحث الوصول إلى رافعة الأخذ، التي اقترنت بتسريب الهيروين. تمت برمجة ذراع البحث مع جدول زمني متغير للتعزيز 60 (VI60) ، وتم برمجة ذراع الالتقاط بجدول تعزيز 1 ثابت النسبة (FR1). بعد التدريب على الإدارة الذاتية ، تم تسليم صدمة خفيفة للقدم على 30٪ من روابط البحث المكتملة بدلا من تمديد رافعة الأخذ. تم زيادة شدة صدمة القدم بمقدار 0.1 مللي أمبير لكل جلسة يومية من 0.2 مللي أمبير إلى 1.0 مللي أمبير. وأجريت اختبارات البحث عن الهيروين بعد 24 ساعة من الحرمان من الغذاء أو حالات الشبع. وزادت الفئران التي تعاني من الحرمان الحاد من الغذاء بقوة من السعي وراء الهيروين بعد الامتناع عن ممارسة الجنس الذي فرضته العقوبة.
Introduction
الانتكاس هو المشكلة الأكثر تحديا في علاج تعاطي المخدرات 1,2. ومع ذلك ، تمت الموافقة على عدد قليل فقط من العلاجات الدوائية للمساعدة في تجنب الانتكاس في البشر3. إن وباء المواد الأفيونية الذي تواجهه أمريكا الشمالية حاليا هو مثال صارخ على ذلك ، ويتطلب النظر في نهج مختلفة بشأن النماذج الحيوانية للانتكاس إلى المواد الأفيونية.
وقد ثبت أن الإجهاد الحاد هو المحفز الرئيسي للانتكاس في البشر4. أحد الضغوطات البيئية التي غالبا ما ترتبط بإدمان المخدرات هو الحرمان من الطعام. وكثيرا ما يختار متعاطو المخدرات تخصيص الموارد للحصول على المخدرات بدلا من الغذاء. وقد تبين أن العجز في السعرات الحرارية يرتبط بزيادة الانتكاس إلى السجائر5 والكحول6. بسبب القضايا الأخلاقية والعملية ، تم تطوير نماذج حيوانية على مدى العقود الماضية لتسهيل البحث في هذا المجال. وفي النماذج الحيوانية، ثبت أن الحرمان الحاد من الغذاء يعيد بقوة الهيروين المطفأ الذي يسعى إلىالحصول على 7. وفي الوقت الحالي، تستند معظم النماذج الحيوانية للانتكاس إلى إجراءات الامتناع عن ممارسة الجنس التي لا تمثل الامتناع عن ممارسة الجنس البشري (مثل النماذج القائمة على الانقراض) أو تشمل فقط النسبة المئوية الصغيرة من متعاطي المخدرات الذين يجبرون على الامتناع عن التدخين بسبب السجن أو علاج المرضى الداخليين (على سبيل المثال، نماذج الامتناع القسري). السبب الرئيسي وراء اختيار متعاطي المخدرات الامتناع عن التدخين هو العواقب السلبية المرتبطة بالبحث عن المخدرات وتناول8. الامتناع عن ممارسة الجنس المفروض على العقوبة هو نموذج حيواني يحاكي العواقب السلبية المرتبطة بالبحث عن المخدرات على الامتناع عن ممارسة الجنس المفروض ذاتيا لدى البشر. يقدم هذا النموذج حافزا مترددا ، على سبيل المثال ، صدمة قدم خفيفة ، مع البحث عن المخدرات أو تناولها ، مما يؤدي بالحيوان إلى التوقف عن تناول الدواء طواعية. إجراء آخر يتضمن عواقب سلبية على البحث عن المخدرات هو نموذج صراع الحاجز الكهربائي للامتناع عن تعاطي المخدرات والانتكاس9. يجب على الفئران عبور حاجز كهربائي لأداء السلوك العامل المرتبط بالإدارة الذاتية للمخدرات. تم استخدام النموذج بنجاح لإثبات الامتناع الطوعي والانتكاس إلى المنشطات النفسية والمواد الأفيونية10,11. ومع ذلك ، في ظل إجراء الحاجز الكهربائي ، ترتبط جهود البحث عن المخدرات دائما بحدث متردد ، على عكس الحالة البشرية. علاوة على ذلك ، قد يتداخل تعاطي المخدرات نفسه مع صدمة القدم الكهربائية مع عودة الحيوان إلى المنطقة الآمنة بعد التسريب عن طريق عبور الحاجز مرة أخرى.
وقد استخدم الامتناع عن ممارسة الجنس الذي تفرضه العقوبة مع عقاقير أخرى من تعاطي المخدرات مثل الكوكايين 12 والكحول 13 والميثامفيتامين14 وريميفنتانيل15، ولكنه لم يطبق قط على الحيوانات المدربة على الهيروين. تم استخدام النموذج لدراسة الانتكاس الناجم عن تحضير14 والإشارات المرتبطة بالمخدرات16 ، ولكن لم يتم دمجه في إجراء الانتكاس الناجم عن الإجهاد. يستخدم الإجراء الموصوف هنا لإثبات الانتكاس الحاد الناجم عن الحرمان الغذائي إلى الهيروين بعد الامتناع عن ممارسة الجنس الذي فرضته العقوبة على ذكور الفئران.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
يتم التعامل مع جميع الفئران وفقا للمبادئ التوجيهية للمجلس الكندي لرعاية الحيوانات. تم منح الموافقة على جميع الإجراءات التجريبية من قبل لجنة أخلاقيات البحوث الحيوانية بجامعة كونكورديا.
1. الحيوانات
- الحصول على الفئران إيفانز طويلة تزن 275-300 غرام (الذكور) أو 225-250 غرام (الإناث). فئران المنزل المزدوج في أقفاص بلاستيكية قياسية مع فراش كوز الذرة والورق الممزق حتى الجراحة.
- حافظ على الفئران في دورة ضوء وظلمة معكوسة (إطفاء الأنوار في الساعة 9:30 صباحا ، والإضاءة في الساعة 9:30 مساء).
- السماح بالوصول غير المحدود إلى الطعام والماء، إلا أثناء اختبار الحرمان من الطعام. استخدم تشاو الفئران العادية (20.9٪ بروتين ، 67.2٪ كربوهيدرات ، و 11.8٪ دهون).
2. العمليات الجراحية عن طريق الوريد
- بناء القسطرة وإجراء جراحة في الوريد كما هو موضح في Sedki et al. 201317 مع الاختلافات التالية: 1) استخدام Isofluorane 2-2.5٪ للتخدير ، 2) تغيير جرعة البنسلين التي تدار أثناء الجراحة إلى 60000 وحدة دولية / فأر ، عن طريق الحقن تحت الجلد ، و 3) زيادة جرعة الجنتاميسين في خليط الهيبارين والجنتاميسين المستخدمة لطرد القسطرة إلى 7.5 وحدة دولية + 800 ميكروغرام ؛ 0.2- 0.3 مل.
- حقن الكيتوبروفين أو كاربروفين ، مسكن مضاد للالتهابات ، داخل الصفاق أو تحت الجلد (5 ملغ / كغ) مباشرة بعد الجراحة (قبل الشفاء من التخدير) وفي الأيام الثلاثة التالية. خلال فترة الاسترداد 2 أيام ، أعط الطعام المهروس والحرارة (إذا لزم الأمر) للمساعدة في الانتعاش. وزن الحيوانات والإشراف عليها يوميا للتحقق من أي فقدان مفاجئ للوزن أو أي علامات أخرى على وجود مشاكل صحية.
3. الإجراءات السلوكية
- غرف تكييف التشغيل:
- اضبط غرف تكييف العامل كما هو موضح في Sedki et al. 201317.
- يوم التعويد:
- إيواء الفئران في غرف التدريب بعد التعافي من الجراحة والسماح للحيوانات بالتعود على الغرفة لمدة 24 ساعة قبل البدء في أي بروتوكول. حافظ على الحيوانات الموجودة في غرف التشغيل طوال التجربة بأكملها.
- لا تقم بتوصيل الفئران بالزنبرك المعدني ولا تبدأ أي بروتوكول تجريبي (لا يتوفر ضوء الإشارة والنغمة والرافعات خلال يوم التعود).
- الإدارة الذاتية للهيروين:
- قم بتوصيل الموصل المكون من 5 إلى أعلى بأنبوب Tygon والزنبرك المعدني.
- إعداد دورات تدريبية يومية لمدة 6 ساعات من الإدارة الذاتية للهيروين (0.1 مغ/كغ/تسريب) وفقا للإجراء الموضح أدناه.
- ابدأ جلسات التدريب اليومية في بداية المرحلة المظلمة من دورة الضوء المعكوسة (حوالي الساعة 9:30 صباحا في النتائج التمثيلية) مع تمديد ذراع البحث (أو خذ الرافعة في أول يومين ؛ انظر أدناه) ، وكذلك إيقاف تشغيل المصباح المنزلي.
- الإدارة الذاتية مع ذراع الالتقاط فقط المتاحة تحت النسبة الثابتة 1 (FR1 ؛ يومين)
- قم ببرمجة كل تجربة لتبدأ بإدخال رافعة الالتقاط.
- بمجرد أن يضغط الفئران على ذراع الأخذ مرة واحدة (FR1) ، قم بسحب ذراع الأخذ ، وقم بتشغيل ضوء الإشارة فوق الذراع والنغمة لفترة مهلة 20 ثانية ، وأطفئ ضوء المنزل ، واسمح بتوصيل تسريب الهيروين (0.1 مجم / كجم في 0.13 مل)
- قم ببرمجة فاصل زمني بين المحاكمات مدته 30 ثانية لا يتم فيه تقديم أي إشارات ، ويتم إيقاف تشغيل ضوء المنزل ، ويتم سحب الرافعة. في بداية الإصدار التجريبي التالي، أدخل ذراع الالتقاط، وقم بتشغيل مصباح المنزل.
- الإدارة الذاتية مع سلسلة البحث تحت FR1 (5 أيام)
- قم ببرمجة نظام التدريب التشغيلي لإدخال ذراع البحث فقط وتشغيل الضوء المنزلي للإشارة إلى بداية الجلسة. رافعة الأخذ في حالة تراجع.
- بمجرد أن يضغط الفئران مرة واحدة (FR1) على ذراع البحث ، يسحب البرنامج ذراع البحث ويدرج رافعة الالتقاط.
- ضغطة واحدة على ذراع الالتقاط (FR1) تسحب ذراع الالتقاط وتبدأ نفس الإجراء كما في الخطوة 3.3.4.2 والفاصل الزمني بين التجارب 30 ثانية.
- قم ببرمجة نظام التدريب التشغيلي لإدخال ذراع البحث في نهاية الفترة الفاصلة بين المحاكمات وتشغيل ضوء المنزل للإشارة إلى بداية التجربة التالية.
- قم ببرمجة نظام التدريب التشغيلي لبدء الفاصل الزمني بين التجارب إذا فشل الفئران في إنجاز سلسلة البحث عن التناول خلال 10 دقائق (عدم الضغط على البحث أو رافعة الأخذ) لتمثيل نهاية التجربة وفقدان فرصة إعطاء الدواء.
- الإدارة الذاتية مع سلسلة البحث والاستلام ضمن الفواصل الزمنية المتغيرة (VI5 وVI30 وVI60)
- قم ببرمجة جميع الخطوات في القسم 3.3.5 ولكن أدخل فاصلا متغيرا قدره 5 (VI5) كجدول جديد للتعزيز على ذراع البحث ، بدلا من FR1. السماح بالتدريب على الإدارة الذاتية بموجب جدول VI5 لمدة 3 أيام.
- قم بإعداد البرنامج للسماح بالضغط الأول على ذراع البحث لتنشيط جدول VI5. بالنسبة لجدول VI5 ، اسمح للبرنامج بتحديد وقت فاصل زمني عشوائيا من قائمة من 0.1 s و 5 s و 10 s ، مما يؤدي إلى متوسط فاصل زمني قدره 5 ثوان. أول ضغط ذراع بحث بعد انقضاء الفاصل الزمني المحدد، يسحب ذراع البحث ويمدد ذراع الالتقاط.
- اتبع الخطوات 3.3.4.2 و 3.3.5.4.و 3.3.5.5. لاتخاذ رافعة ونهاية تعليمات المحاكمة.
- بعد ذلك ، قم بتدريب الفئران لمدة 5 أيام تحت جدول VI30 لرابط البحث ، متبوعا ب 3 أيام تحت جدول VI60.
- بالنسبة لجدول VI30 ، اسمح للبرنامج بتحديد وقت عشوائيا من قائمة من 15 ثانية و 30 ثانية و 45 ثانية ، بمتوسط 30 ثانية ، بينما بالنسبة لجدول VI60 ، يختار البرنامج عشوائيا وقتا من قائمة من 45 ثانية و 60 ثانية و 75 ثانية.
- قم بتغيير الفترات الفاصلة بين المحاكمات على طول الجداول الزمنية المختلفة للتعزيز. ابدأ الفاصل الزمني بين التجارب عند 30 ثانية خلال FR1 و VI5 ولكن قم بزيادته تدريجيا إلى 7 دقائق خلال VI30 و VI60.
- الامتناع عن ممارسة الجنس بسبب العقوبة
- ابدأ جلسات العقاب بإدخال ذراع البحث وتشغيل ضوء المنزل. السماح بجلسات العقاب لمدة 8 أيام ، مع الإشراف المنتظم لضمان عدم ظهور علامات الألم غير الطبيعي للحيوانات أو أي مشاكل صحية.
- قم ببرمجة نظام التدريب التشغيلي بحيث بعد الانتهاء من رابط البحث تحت VI60 ، تتراجع ذراع البحث ، ويتم إيقاف تشغيل ضوء المنزل ، ويتم إعطاء صدمة قدم خفيفة على 30٪ من روابط البحث المكتملة بدلا من إدخال ذراع الالتقاط. تمتد رافعة الأخذ على 70٪ الأخرى من روابط البحث المكتملة ، كما هو الحال في تجربة الإدارة الذاتية العادية.
- قم ببرمجة فاصل زمني بين التجارب لمدة 7 دقائق مع إيقاف تشغيل جميع الإشارات والإضاءة المنزلية قبل إدخال ذراع البحث وتشغيل مصباح المنزل للإشارة إلى بداية التجربة التالية.
- اضبط شدة صدمة القدم على 0.2 مللي أمبير وقم بزيادتها بمقدار 0.1 مللي أمبير لكل يوم عقوبة حتى 1.0 مللي أمبير.
- بعد أن تضغط الفئران على ذراع الأخذ (في التجارب عندما تكون متاحة) ، كرر الخطوة 3.3.4.2 لسحب الرافعة ، وتسليم تسريب الهيروين ، وتقديم الإشارات ، متبوعا بفاصل زمني مدته 7 دقائق بين التجارب.
- ابدأ التجربة التالية بإدخال ذراع البحث وتشغيل مصباح المنزل.
- إذا لم يضغط الفئران على أي رافعة لمدة 10 دقائق، فاتبع الخطوة 3.3.5.5.
- الحرمان الحاد من الطعام (24 ساعة)
- في اليوم التالي لليوم الأخير من الامتناع عن ممارسة الجنس المفروض عليه ، قسم الفئران إلى مجموعتين متطابقتين (وفقا لوزن الجسم ومتوسط عدد رافعة البحث والحقن على مدار آخر 3 أيام من التدريب على الإدارة الذاتية): الغذاء المحروم (FD) و Sated.
- قم بإزالة قواديس الطعام من الغرف (حوالي الساعة 9:30 صباحا) للفئران التي تخضع لاختبار الانتكاس الناجم عن الحرمان من الطعام والحفاظ على قواديس الطعام للمجموعة المشبعة التي لديها وصول غير محدود إلى الطعام. توفير الوصول غير المحدود إلى المياه في كلتا المجموعتين والإشراف على الحيوانات لضمان عدم ظهورها أي مشاكل صحية خلال فترة الحرمان من الطعام.
- اختبارات البحث عن الهيروين الناجم عن الحرمان من الغذاء
- في صباح اليوم التالي للحرمان من الطعام لمدة 24 ساعة ، قم بإجراء اختبار للبحث عن الهيروين لمدة 3 ساعات ، بموجب جدول VI60 مع فاصل زمني بين التجارب لمدة 7 دقائق دون أي صدمة أو حقن الهيروين التي يتم تسليمها. أعد قواديس الطعام إلى الفئران المحرومة من الطعام بعد جلسة 3 ساعات.
- في صباح اليوم التالي لأول اختبار للبحث عن الهيروين ، قم بإزالة قواديس الطعام من غرف الفئران التي تم إشباعها في اختبار الانتكاس الأول. اسمح للفئران التي كانت محرومة من الطعام سابقا بالوصول غير المحدود إلى الطعام (حالة الإشباع) قبل وأثناء الاختبار.
- قم بإجراء اختبار آخر للبحث عن الهيروين لمدة 3 ساعات في اليوم التالي (بعد الحرمان من الطعام لمدة 24 ساعة) ، كما هو الحال في الخطوة 3.6.1.
- في اليوم التالي للاختبار ، قم بالقتل الرحيم للفئران باستخدام غرفة ثاني أكسيد الكربون (100٪ CO2 بمعدل ملء 30-70٪ من حجم الغرفة في الدقيقة).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
وأظهرت ذكور الفئران زيادة في مكابس رافعة البحث مع زيادة جدول التعزيز خلال أيام التدريب، وعدد موثوق وثابت من دفعات الهيروين خلال أيام التدريب (الشكل 1). أثناء العقاب ، خفضت الفئران عدد مكابس رافعة البحث والحقن مع زيادة شدة صدمة القدم على مدى 8 أيام عقاب (الشكل 2). وأدت حالة الحرمان من الغذاء إلى زيادة كبيرة في البحث عن الهيروين بعد الامتناع عن ممارسة الجنس بسبب العقوبة (حالة التغذية: F(1, 7) = 7.12, p = .0.03, d = 1.3; الشكل 3 ألف). لم يكن هناك تأثير ذي دلالة إحصائية على الوقت ولا على البحث عن المخدرات بمرور الوقت عبر ظروف التغذية (الوقت: F (2 ، 14) = 1.029 ، p = .38 ؛ الوقت × حالة التغذية: F (2 ، 14) = 1.347 ، p = .29 ؛ الشكل 3 باء).
الشكل 1: الإدارة الذاتية للهيروين (N = 8). متوسط ± SEM من مكابس ذراع البحث (باللون الأحمر) وعدد الحقن (الأزرق) ، على زيادة تدريجية في جداول التعزيز (FR1 ، VI5 ، VI30 ، VI60) لمدة 18 يوما تدريبيا. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 2: الامتناع عن ممارسة الجنس بسبب العقوبة (N = 8). يعني ± تسعى SEM إلى الحصول على استجابات رافعة على مدار أيام العقاب. زادت شدة صدمة القدم 0.1 مللي أمبير يوميا من 0.2 مللي أمبير إلى 1.0 مللي أمبير ، باستثناء 0.9 مللي أمبير. الرسم البياني المدرج هو متوسط (±SEM) الحقن على مدار أيام العقاب. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 3: اختبارات البحث عن الهيروين الناجم عن الحرمان من الغذاء (N = 8). (A) متوسط ± SEM تسعى إلى الحصول على مكابس رافعة في ظل ظروف محرومة من الطعام ومشبعة خلال اختبار البحث عن الهيروين لمدة 3 ساعات ، في ظل ظروف الانقراض وعدم وجود عقوبة على الأقدام. تصميم متوازن داخل الموضوع. * يمثل فروق ذات دلالة إحصائية، p = 0.032. (ب) متوسط ± مكابس رافعة التماس SEM تحت ظروف الحرمان من الغذاء (FD) وظروف مشبعة أثناء اختبار انتكاس الهيروين (أجزاء 1 ساعة). يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
هناك دليلان مهمان في هذه الورقة. أولا، التحقق من صحة الامتناع عن ممارسة الجنس الذي فرضته العقوبة باستخدام سلسلة البحث وأخذ الهيروين. ثانيا، ثبت أن الانتكاس الناجم عن الإجهاد يمكن ملاحظته في إجراء الامتناع عن ممارسة الجنس الذي تفرضه العقوبة. هذه مظاهرات مهمة لأن (أ) إجراء الامتناع عن تعاطي المخدرات الناجم عن العقاب يحاكي بشكل أوثق الحالة البشرية لأنها تؤدي إلى الامتناع الطوعي ، أي ليس بسبب انقراض الباحثين عن المخدرات أو الإزالة القسرية من بيئة تعاطي المخدرات18 ، (ب) تم إثبات انتكاسة موثوقة باستخدام عامل ضغط ذي صلة بالبيئة: الإجهاد الحاد للحرمان من الطعام.
عند تنفيذ البروتوكول ، يجب توخي الحذر للتدريب المناسب للفئران في إطار إجراء البحث عن الطعام الأكثر تعقيدا مقارنة بالإدارة الذاتية المستمرة الشائعة باستخدام رافعة "نشطة" واحدة. وبالإضافة إلى ذلك، ينبغي تعديل مرحلة العقوبة بعناية وفقا لسلالة الفئران المستخدمة لمنع الألم غير الضروري و "العقاب المفرط" الذي يمكن أن يؤدي إلى استجابة للتجميد ومن شأنه أن يتداخل مع اختبارات الانتكاس. لاحظ أن الآثار المسكنة للهيروين يمكن أن تقلل من الاستجابة لعقوبة الصدمة؛ بيد أنه في ظل الظروف الموصوفة في هذا البروتوكول، تبين وجود امتناع شديد عن الاستعمال الذاتي للهيروين بسبب العقوبات. وتهدف شروط هذا البروتوكول إلى الفصل قدر الإمكان بين ضخ الهيروين وصدمة القدم (في محاكمات العقوبات). ولتحقيق ذلك، تضمن البروتوكول فترات زمنية طويلة بين التجارب (7 دقائق) بين تجارب التسريب وتجارب صدمة القدم.
التوزيع الشبيه بنمطين الموجود للبحث عن المخدرات في ظل الحرمان من الغذاء ليس فريدا عند دراسة الانتكاس. وهو يعكس الفروق الفردية التي لوحظت داخل البشر مع تجربة تعاطي المخدرات19. يمكن أن تكون هاتان المجموعتان الفرعيتان المنفصلتان ميزة للدراسات المستقبلية التي تهدف إلى تحديد الفروق الفردية التي تتنبأ بالانتكاس الناجم عن الإجهاد.
وعلى النقيض من التدريب في إطار إجراءات الروافع النشطة/غير النشطة الأكثر شيوعا، حيث يرتبط كل من البحث عن المخدرات وتناولها بنفس الرافعة النشطة، يسمح الإجراء المتسلسل بالبحث عن المخدرات بفحص عوامل محددة تتعلق بالبحث عن المخدرات وتناولها كمجموعتين منفصلتين من الإجراءات. يعاقب فقط على البحث عن المخدرات ، وبالتالي تجنب الانخفاض المحتمل في قيمة خصائص المخدرات المجزية20.
أحد قيود هذه الدراسة هو انخفاض تناول الدواء بموجب جدول VI60 مقارنة بالدراسات التي تستخدم FR1. بالإضافة إلى ذلك ، فإن الفواصل الزمنية الطويلة بين التجارب التي تبلغ 7 دقائق تقلل أيضا من الوقت المتاح أثناء الجلسة للوصول إلى الدواء. ويتمثل أحد الخيارات للتغلب على هذه القيود في المستقبل في تقليل الفترة الفاصلة بين المحاكمات أو زيادة مدة الدورة. ومن القيود الأخرى على النموذج إقران الإجهاد البدني (صدمة القدم) بالبحث عن المخدرات، في حين أن متعاطي المخدرات من البشر يعانون في الغالب من الإجهاد النفسي. ومع ذلك ، في ظل الإدخال الاحتمالي للعقوبة ، كما هو محدد في الإجراء ، يتم تخفيف البحث عن المخدرات بسبب الخوف من العواقب المحتملة ، والتي يمكن اعتبارها ضغطا نفسيا. الشروط الواردة في البروتوكول الموصوف هنا تنشئ صراعا تحفيزيا يتم تجربته في كل تجربة خلال مرحلة العقاب وهي أساسية لعملية اتخاذ القرار في الإدمان21.
يمكن أن يحدث الانتكاس إلى الهيروين حتى بعد فترة الامتناع عن ممارسة الجنس لفترات طويلة22. وينبغي للدراسات المستقبلية أن تبحث في أثر التعرض لإجهاد الحرمان من الغذاء بعد فترات أطول من الامتناع عن ممارسة الجنس بسبب العقوبة. وعلاوة على ذلك، ركزت هذه الورقة على إثبات الانتكاس وليس على دراسة الفروق الفردية في الاستجابة للعقاب ("مقاومة للعقاب" و "حساسة للعقاب"23). لذلك ، زادت شدة صدمة القدم حتى 1.0 مللي أمبير لضمان تحقيق جميع الفئران الامتناع الطوعي. وسيكون من المثير للاهتمام استكشاف تطور الفروق الفردية في الفئران المدربة على الهيروين عن طريق إبقاء صدمة القدم بكثافة أقل (على سبيل المثال، 0.4 مللي أمبير).
هنا يتم تقديم إجراء الانتكاس الذي يتم فيه الوصول إلى الامتناع الطوعي بسبب العواقب السلبية ، ويتم تحفيز الانتكاس بواسطة ضغوط بيئية ذات صلة بالبيئة. الانتكاس الناجم عن الحرمان من الغذاء قوي ويمكن تكراره بسهولة. وسيتيح هذا الإجراء فهما أفضل للآلية الكامنة وراء الانتكاس إلى الهيروين بعد الامتناع الطوعي عن ممارسة الجنس.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
ويعلن صاحبا البلاغ أنه ليس لديهما مصالح مالية منافسة.
Acknowledgments
تم دعم هذا العمل من قبل برنامج اكتشاف مجلس العلوم الطبيعية والهندسة (الولايات المتحدة: RGPIN-2016-06694).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Anafen Injection 100 mg/mL Vial/50 mL | MERIAL Canada, Inc. | 1938126 | anti-inflammatory drug |
| Balance arm | Coulbourn Instruments | H29-01 | |
| Cannulae (22 G, 5-up) | Plastics One | C313G-5up | |
| Environment connection board & Linc cable | Coulbourn Instruments | H03-04 | |
| Fixed speed infusion pump (3.3 RPM) | Coulbourn Instruments | A73-01-3.3 | |
| GE Marine Silicon | GE | SE-1134 | |
| Graphic State Notation 3 | Coulbourn Instruments | GS3 | Software |
| Habitest universal Linc | Coulbourn Instruments | H02-08 | |
| Heroin HCl | National Institute for Drug Abuse, Research Triangle Park, NC, USA | ||
| House light-Rat | Coulbourn Instruments | H11-01R | |
| Isofluorane USP 99.9% Vial/250 mL | Fresenius Kabi Canada Ltd | 2237518 | |
| Liquid Swivels, Plastic, 22 G | Lomir Biomedical, Inc. | RSP1 | |
| Rat test cage | Coulbourn Instruments | H10-11R-TC | Operant conditioning chambers |
| Retractable lever-Rat | Coulbourn Instruments | H23-17RA | |
| Silastic tubing (ID 0.02, OD 0.037) | Fisher Scientific (Canada) | 1118915A | |
| Single high-bright cue-Rat | Coulbourn Instruments | H11-03R | |
| Sound attenuation boxes | Concordia University | Home made | |
| Stainless steal grid floor | Coulbourn Instruments | H10-11R-TC-SF | |
| System controller 2 | Coulbourn Instruments | SYS CTRL 2 | |
| System power base | Coulbourn Instruments | H01-01 | |
| Tone module 2.9 KHz | Coulbourn Instruments | H12-02R-2.9 | |
| Tygon tubing (ID 0.02, OD 0.060) | VWR | 63018-044 |
References
- Jaffe, J. H. Drug addiction and drug abuse. Goodman & Gilman's the Pharmacological Basis of Therapeutics. Gilman, A. G., Rall, T. W., Nies, A. S., Taylor, P. , Pergamon Press. New York. 522-573 (1990).
- O'Brien, C. P., McLellan, A. T.
- Miczek, K. A., de Wit, H. Challenges for translational psychopharmacology research--some basic principles. Psychopharmacology (Berl). 199 (3), 291-301 (2008).
- Sinha, R. How does stress increase risk of drug abuse and relapse. Psychopharmacology. 158, 343-359 (2001).
- Cheskin, L. J., Hess, J. M., Henningfield, J., Gorelick, D. A. Calorie restriction increases cigarette use in adult smokers. Psychopharmacology. 179, 430-436 (2005).
- Krahn, D., Kurth, C., Demitrack, M., Drewnowski, A. The relationship of dieting severity and bulimic behaviors to alcohol and other drug use in young women. Journal of Substance Abuse. 4, 341-353 (1992).
- Shalev, U., Highfield, D., Yap, J., Shaham, Y. Stress and relapse to drug seeking in rats: studies on the generality of the effect. Psychopharmacology. 150, 337-346 (2000).
- Peck, J. A., Ranaldi, R. Drug abstinence: exploring animal models and behavioral treatment strategies. Psychopharmacology (Berl). 231 (10), 2045-2058 (2014).
- Cooper, A., Barnea-Ygael, N., Levy, D., Shaham, Y., Zangen, A. A conflict rat model of cue-induced relapse to cocaine seeking). Psychopharmacology (Berl). 194 (1), 117-125 (2007).
- Barnea-Ygael, N., Yadid, G., Yaka, R., Ben-Shahar, O., Zangen, A. Cue-induced reinstatement of cocaine seeking in the rat "conflict model": effect of prolonged home-cage confinement. Psychopharmacology (Berl). 219 (3), 875-883 (2012).
- Fredriksson, I., Applebey, S. V., Minier-Toribio, A., Shekara, A., Bossert, J. M., Shaham, Y. Effect of the dopamine stabilizer (-)-OSU6162 on potentiated incubation of opioid craving after electric barrier-induced voluntary abstinence. Neuropsychopharmacology. 45 (5), 770-779 (2020).
- Pelloux, Y., Everitt, B. J., Dickinson, A. Compulsive drug seeking by rats under punishment: effects of drug taking history. Psychopharmacology (Berl). 194 (1), 127-137 (2007).
- Marchant, N. J., Campbell, E. J., Kaganovsky, K. Punishment of alcohol-reinforced responding in alcohol preferring P rats reveals a bimodal population: Implications for models of compulsive drug seeking. Progress in Neuro-Psychopharmacology & Biological Psychiatry. 87, Pt A 68-77 (2018).
- Krasnova, I. N., et al. Incubation of methamphetamine and palatable food craving after punishment-induced abstinence. Neuropsychopharmacology. 39 (8), 2008-2016 (2014).
- Panlilio, L. V., Thorndike, E. B., Schindler, C. W. Reinstatement of punishment-suppressed opioid self-administration in rats: an alternative model of relapse to drug abuse. Psychopharmacology (Berl). 168 (1-2), 229-235 (2003).
- Economidou, D., Pelloux, Y., Robbins, T. W., Dalley, J. W., Everitt, B. J. High impulsivity predicts relapse to cocaine-seeking after punishment-induced abstinence. Biological Psychiatry. 65 (10), 851-856 (2009).
- Sedki, F., D'Cunha, T., Shalev, U. A procedure to study the effect of prolonged food restriction on heroin seeking in abstinent rats. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (81), e50751 (2013).
- Venniro, M., Caprioli, D., Shaham, Y. Animal models of drug relapse and craving: From drug priming-induced reinstatement to incubation of craving after voluntary abstinence. Progress in Brain Research. 224, 25-52 (2016).
- Deroche-Gamonet, V., Piazza, P. V. Psychobiology of cocaine addiction: Contribution of a multi-symptomatic animal model of loss of control. Neuropharmacology. 76, 437-449 (2014).
- Pelloux, Y., Everitt, B. J., Dickinson, A. Compulsive drug seeking by rats under punishment: effects of drug taking history. Psychopharmacology (Berl). 194 (1), 127-137 (2007).
- Epstein, D. H., Kowalczyk, W. J. Compulsive seekers: Our take. Two clinicians' perspective on a new animal model of addiction. Neuropsychopharmacology. 43 (4), 677-679 (2018).
- Hser, Y. I., Hoffman, V., Grella, C. E., Anglin, M. D. A 33-year follow-up of narcotics addicts. Archives of General Psychiatry. 58 (5), 503-508 (2001).
- Chen, B. T., et al. Rescuing cocaine-induced prefrontal cortex hypoactivity prevents compulsive cocaine seeking. Nature. 496 (7445), 359-362 (2013).
