يصف هذا البروتوكول نموذج فأر تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني الناجم عن فوسفات الكالسيوم (AAA) لدراسة السمات المرضية والآليات الجزيئية ل AAAs.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
نموذج تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني للفأر الناجم عن فوسفات الكالسيوم
* These authors contributed equally
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني (AAA) هو مرض قلبي وعائي يهدد الحياة ويحدث في جميع أنحاء العالم ويتميز بتمدد لا رجعة فيه للشريان الأورطي البطني. حاليا ، يتم استخدام العديد من نماذج AAA المستحثة كيميائيا ، كل منها يحاكي جانبا مختلفا من التسبب في AAA. نموذج AAA الناجم عن فوسفات الكالسيوم هو نموذج سريع وفعال من حيث التكلفة مقارنة بنماذج AAA التي يسببها الأنجيوتنسين II والإيلاستاز. يؤدي تطبيق بلورات CaPO4 على الشريان الأورطي للفأر إلى تدهور الألياف المرنة ، وفقدان خلايا العضلات الملساء ، والالتهاب ، وترسب الكالسيوم المرتبط بتمدد الأبهر. تقدم هذه المقالة بروتوكولا قياسيا لنموذج AAA المستحث CaPO4. يتضمن البروتوكول تحضير المواد ، والتطبيق الجراحي ل CaPO4 على ظهور الشريان الأورطي البطني تحت الكلوي ، وحصاد الأبهر لتصور تمدد الأوعية الدموية الأبهري ، والتحليلات النسيجية في الفئران.
المقدمة
تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني (AAA) هو مرض قلبي وعائي قاتل يتميز بالتمدد الدائم للشريان الأورطي البطني ، مع ارتفاع معدلات الوفيات بمجرد حدوث التمزق. يرتبط AAA بالشيخوخة والتدخين وجنس الذكور وارتفاع ضغط الدم وفرط شحميات الدم1. ثبت أن العديد من العمليات المرضية تساهم في تكوين AAA ، بما في ذلك التحلل البروتيني لألياف المصفوفة خارج الخلية ، وتسلل الخلايا المناعية ، وفقدان خلايا العضلات الملساء الوعائية. حاليا ، لا تزال الآليات المرضية ل AAA بعيدة المنال ، ولا توجد أدوية مثبتة لعلاج AAA1. البحث في AAA البشري محدود بسبب وجود عدد قليل من عينات الأبهر البشري. وهكذا ، تم إنشاء العديد من نماذج AAA الحيوانية التي يسببها التعد....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تم إجراء الدراسات على الحيوانات وفقا للمبادئ التوجيهية للجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الحيوانات في مركز العلوم الصحية بجامعة بكين وتمت الموافقة عليها من قبل لجنة أخلاقيات الطب الحيوي بجامعة بكين (LA2015142). تم تخدير جميع الفئران للجراحة باستخدام إيزوفلوران (1.5٪ -2٪) ، وتم مراقبة التخدير بعناية لتجنب الألم أو الانزعاج للفئران.
1. التحضير
- قطع شرائح بعرض 0.3 سم من القفازات المطاطية الخالية من البودرة والشاش.
- شراء الفئران الذكور C57BL / 6J البالغ من العمر 8-10 أسابيع. إيواء الحيوانات في بيئة مكيفة مع دورة 12 ساعة من الضوء والظلام وحرية الوصول إلى الطعام والماء.
- الأوتوكلاف الشاش ومسحات القطن والمق....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
بعد 14 يوما من تطبيق CaPO4 ، تم القتل الرحيم للفئران الذكور C57BL / 6J ، وتم حصاد وتنظيف الأورتا الخاصة بهم. تم تصوير مورفولوجيا الأورتا لتصور تشكيل AAA. كما هو موضح في الشكل 1A-B ، أدى تطبيق CaPO4 إلى تمدد الشريان الأورطي البطني تحت الكلوي. من الناحية النسيجية ، أدى CaPO4 إلى تدهور كبير في الألياف المرنة ، كما يتضح من فواصل الإيلاستين (الشكل 1C).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
التطبيق حول الأبهر ل CaPO4 هو نهج قوي للحث على AAA في الفئران. استخدمت العديد من الدراسات نموذج CaPO4 وأفادت باستمرار أن هذه طريقة سريعة وقابلة للتكرار لدراسة AAA في الفئران 7,9. يعتبر هذا النموذج ملخصا لجزء من ميزات تمدد الأوعية الدموية الأبهري البشري ويوفر رؤى ميكانيكية حول التسبب في AAA ، بما في ذلك الالتهاب وتدهور المصفوفة خارج الخلية.
تشمل عوامل الخطر ل AAA البشري بشكل أساسي الشيخوخة ، وجنس الذكور ، والتدخين .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
شكر وتقدير
تم دعم هذا البحث بتمويل من المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (NSFC ، 81730010 ، 91839302 ، 81921001 ، 31930056 ، و 91529203) والبرنامج الوطني للبحث والتطوير الرئيسي في الصين (2019YFA 0801600).
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| CaCl2< / sub> | MECKLIN | C805225 | |
| كلوريد الصوديوم | Biomed | SH5001-01 | |
| PBS | HARVEYBIO | MB5051 | |
| جهاز التنفس الصناعي للحيوانات الصغيرة | RWD | H1550501-012 |
المراجع
- Kent, K. C. Abdominal aortic aneurysms. The New England Journal of Medicine. 371, 2101-2108 (2014).
- Patelis, N., et al. Animal models in the research of abdominal aortic aneurysms development. Physiological Research. 66 (6), 899-915 (2017).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
