Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Источник и путь загрязнения алкалоидами пирролизидина в образцах чая

2.7K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/64375

⸱

28 сентября 2022 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

В этой статье

Краткое содержание

В настоящем протоколе описывается контаминация пирролизидиновыми алкалоидами (ПА) в образцах чая из сорняков, продуцирующих ПА, на чайных плантациях.

Аннотация

В образцах чая обнаружены токсичные пирролизидиновые алкалоиды (ПА), которые представляют угрозу для здоровья человека. Однако источник и путь загрязнения ПА в образцах чая остались неясными. В данной работе был разработан метод адсорбента в сочетании с UPLC-MS/MS для определения 15 PA в корневищной почве сорняков Ageratum conyzoides L., A. conyzoides, свежих чайных листьях и образцах сушеного чая. Среднее выздоровление варьировало от 78% до 111% с относительными стандартными отклонениями 0,33%-14,8%. Пятнадцать пар образцов ризосферной почвы A. conyzoides и A. conyzoides и 60 образцов свежего чайного листа были собраны в чайном саду Цзиньчжай в провинции Аньхой, Китай, и проанализированы на наличие 15 ПА. Не все 15 PA были обнаружены в свежих чайных листьях, за исключением интермедина-N-оксида (ImNO) и сенеционина (Sn). Содержание ImNO (34,7 мкг/кг) было больше, чем Sn (9,69 мкг/кг). Кроме того, и ImNO, и Sn были сосредоточены в молодых листьях чайного растения, в то время как их содержание было ниже в старых листьях. Результаты показали, что ПА в чае переносились по пути сорняков, продуцирующих ПА, почвы и свежих чайных листьев в чайных садах.

Введение

В качестве вторичных метаболитов пирролизидиновые алкалоиды (ПА) защищают растения от травоядных, насекомых и патогенов 1,2. На сегодняшний день более 660 PA и PA-N-оксидов (PANO) с различной структурой были обнаружены в более чем 6,000 видах растений по всему миру 3,4. Растения, продуцирующие ПА, в основном встречаются в семействах Asteraceae, Boraginaceae, Fabaceae и Apocynaceae 5,6. ПА легко окисляются до нестабильных алкалоидов дегидропирролизидина, котор....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Для настоящего исследования были собраны следующие виды сорняков: Ludwigia prostrata Roxb., Murdannia triquetra (Wall. ex C. B. Clarke) Bruckn., Ageratum conyzoides L., Chenopodium ambrosioides, Trachelospermum jasminoide (L.) Lem., Ageratum conyzoides L., Emilia sonchifolia (L.) DC, Ageratum conyzoides L. и Crassocephalum crepidioides (Бент.) С. Мур. Свежие чайные листья были собраны из сорта чайных деревьев Longjing 43 #, а образцы сушеного чая были коммерчески доступными чайными изделиями, обработанными в соответствии с процессом производства зеленого чая (см. Табли....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Был установлен оптимизированный метод очистки и анализа адсорбента 15 ПА в образцах сухого чая, свежих чайных листьях, сорняках и почве и сопоставлен с широко используемым методом очистки с использованием картриджа SPE. Результаты показали, что извлечение 15 ПА в образцах сушеного чая, сорняков и свежих чайных листьев с использованием картриджа SPE составило 72-120%, в то время как при очистке адсорбента - 78-98% (рис. 1). Извлечение 15 ПА в почве с помощью адсорбентной очистки составило 79-.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Настоящая работа была разработана для разработки эффективного, чувствительного метода изучения путей загрязнения и источников ПА в образцах чая, а также распределения ПА в различных частях чайных растений. Однако в этом исследовании только 15 ПА были успешно разделены на хроматографической колонке, что является очень небольшим числом по сравнению с большим количеством алкалоидов у видов растений 3,4. Это было связано не только с упаковочными свойствами самой коло.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторам раскрывать нечего.

Благодарности

Эта работа была поддержана Национальным естественно-научным фондом Китая (32102244), Национальным проектом оценки качества и безопасности сельскохозяйственной продукции и рисков (GJFP2021001), Естественно-научным фондом провинции Аньхой (19252002) и Министерством сельского хозяйства США (HAW05020H).

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Ацетонитрил (99,9%)Tedia Company,Inc.21115197CAS No:75-05-8
Аммиак (25%-28%)Wuxi Zhanwang Chemical Reagent Co., Ltd.181210CAS No:1336-21-6
Формиат аммония (97,0%)Anpel Laboratory Technoiogies (Шанхай)G0860050CAS No:540-69-2
Carbon-GCBCNWB7760030120-400 меш, 10г. в коробке 
Центрифуга Z 36 HKHERMLEZ36HK30000  об/мин (мин.: 10 об/мин), размеры (Ш x В x Г):  71,5 см&крат; 42 см & раз; 51 см
Коммерчески доступный чайный продуктLvming, Qingshan, Luyuchun, Changling, Huixing, Wuyunjian, Heshengchunрассыпной чайЗеленый чай
Europine N-oxid (EuNO) (98.0%)BioCrick323256CAS No:65582-53-8
Europine (Eu) (98.0%)BioCrick98222CAS No:570-19-4
Formate (98.0%)AladdinE2022005CAS No:64-18-6
HC-C18CNWD211006040-63 μ м,100г.в коробке
Гелиотрин (He) (98.0%)BioCrick906426CAS No:303-33-3
Гелиотрин-N-оксид (HeNO) (98.0%)BioCrick22581CAS No:6209-65-0
Высокоскоростная центрифуга TG16-WScence203158000макс.: 16000 об/мин, 330 &раз; 390 × 300 мм (L × W & раз; H), Вместимость: 6 и раз; 50 мл
HSS T3 колонкаWaters186004976ACQUITY UPLC HSS T3 (2,1 & раз; 100 мм 1,8 μ m)
Интермедин (Im) (98,0%)BioCrick114843CAS No:10285-06-0
Интермедин-N-оксид (ImNO) (98,0%)BioCrick340066CAS No:95462-14-9
Jacobine (Jb) (98,0%)BioCrick132282048CAS No:6870-67-3
Якобин-N-оксид (JbNO) (98,0%)ChemFacesCFN00461CAS No:38710-25-7
Метиловый спирт (99,9%)Компания Tedia21115100CAS No:67-56-1
PSAAgelaP19-0083340-60 μ м, 60 и Аринг; 100г.в коробке
Retrorsine (Re) (98.0%)BioCrick5281743CAS No:480-54-6
Retrorsine-N-оксид (ReNO) (98.0%)BioCrick5281734CAS No:15503-86-3
Senecionine (Sc) (98.0%)BioCrick5280906CAS No:130-01-8
Senecionine-N-оксид (ScNO) (98.0%)BioCrick5380876CAS No:13268-67-2
Сенецифиллин N-оксид (SpNO) (98.0%)BioCrick6442619CAS No:38710-26-8
Сенецифиллин (Sp) (98.0%)BioCrick5281750CAS No:480-81-9
Senkirkine (Sk) (98.0%)BioCrick5281752CAS No:2318-18-5
SPE PCXAgilent Technologies12108206Cation Mixed Mode, 6 мл
серной кислоты (97%)Wuxi Zhanwang Chemical Reagent Co., Ltd. 1003019CAS No:7664-93-9
Тринатрия цитратSinpharm Chemical Reagent Co., Ltd.20121009CAS No:6132-04-3
Ультразвуковой очистительSupmileKQ-600BРазмер внутреннего щеля: 500 &x 300 & times 150 мм; Емкость: 22,5 л
UPLC-xevoTQMSWatersZPLYY-003Тройной четырехступенчатый стержневой масс-анализатор, Waters Alliance 2695/Waters ACQUITY UPLC Жидкофазная система
Водяная баня термостат генераторГоюй приборSHY-2AHSВремя колебаний:   60-300 раз/мин, Постоянный диапазон температур: комнатная температура до 100 °°; С

Ссылки

  1. Schramm, S., Kohler, N., Rozhon, W. Pyrrolizidine alkaloids: Biosynthesis, biological activities and occurrence in crop plants. Molecules. 24 (3), 498(2019).
  2. EFSA Panel on Contaminants in the Food Chain (CONTAM). Scientific opinion on pyrrolizidine alkaloids in fo....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Пирролизидиновые алкалоидызагрязнение чаяУВЭЖХ-МС/МСочистка адсорбентомтвердофазная экстракцияанализ проб почвыN-оксид интермединаопределение сенеционинаанализ чайных листьевпуть переноса алкалоидов