Testen der physiologische Barrieren für die virale Transmission in Blattläuse mit Mikroinjektion

Summary

Blattläuse sind effektiver Überträger von Pflanzenviren. Blattlaus Mikroinjektion von Virus, das Verfahren wir Ihnen zeigen, heute, ist eine Technik, so dass die Forscher Viren direkt in die hemocoel der Blattlaus injizieren, unter Umgehung des Darms, einer der 2 größten Hindernisse für eine Übertragung des Virus in einer zirkulativen Weise. Die gleiche Technik wird auch verwendet, um dsRNA für RNAi zu injizieren.

Abstract

Potato loafroll Virus (PLRV), aus der Familie der Nachtschattengewächse Luteoviridae infiziert Pflanzen. Es wird durch Blattläuse übertragen, in erster Linie, die grüne Pfirsich-Blattlaus. Wenn einem nicht infizierten Blattläusen auf einem infizierten Anlage speist es Verträge des Virus durch die Anlage Phloem. Einmal eingenommen, muss das Virus aus dem Insektendarm der Hämolymphe (das Insekt Blut) passieren und dann muss durch die Speicheldrüse passieren, um wieder in ein neues Werk übertragen werden. Eine Blattlaus kann bis verschiedener Viren, wenn kaute auf einem Werk, jedoch nur ein kleiner Teil wird durch den Darm und Speicheldrüsen passieren, die beiden größten Hindernisse für die Übertragung an weitere Pflanzen infizieren. Im Labor verwenden wir Physalis Pflanzen PLRV Übertragung zu studieren. In diesem Host, sind Symptome, die durch Verkümmerung und Stellen zwischen Chlorose (Gelbfärbung der Blätter zwischen den Adern mit den Adern noch grün) gekennzeichnet. Das Video, das wir gegenwärtig zeigt ein Verfahren zur Durchführung Blattlaus Mikroinjektion von Insekten, die nicht vector PLVR Viren und testet, ob das gut ist die Verhinderung Virusübertragung. Das Video, das wir gegenwärtig zeigt ein Verfahren zur Durchführung Aphid Mikroinjektion von Insekten, die nicht vector PLVR Viren und testet, ob das gut oder Speicheldrüse verhindert Virus-Übertragung.

Protocol

1. Um zu testen, wenn eine Blattlaus ist in der Lage, Vektor ein Virus, füttern wir die Blattläuse auf infizierte Gewebe für 2 Tage.
2. Dann lassen wir es in eine gesunde Pflanze für 5 Tage zu ernähren. Die Anlage wird dann begast und nach 3 Wochen starten wir für die Symptome suchen.
3. Wenn wir feststellen, einer Blattlaus, die sich nicht Vektor ein Virus, beurteilen wir, welches der 2 Barrieren stoppt das Virus mit einer Mikroinjektion Verfahren kann.
4. Das Virus wird direkt in die hemocoel injiziert, unter Umgehung des Darms Übertragung Barriere.

Bitte besuchen Sie Annual Reviews of Plant Biology , um weitere Informationen über dieses Protokoll und pflanzliche Immunität zu Raupenfraß.