مثلي هند زرع الأطراف الاصطناعية في الفئران

أنا روبرت سها من مختبر أبحاث دانيلز روسكي التابع لقسم زراعة الأحشاء وجراحة الصدر من جامعة إنسبروك الطبية. سنعرض لكم اليوم إجراء عملية زرع الأطراف باللون الأحمر ، مع تقديم تقنية الكفة لإعادة التوعية. يتم إجراء جراحة زرع الأطراف هذه من قبل المقيمين في الجراحة لدينا ، بمن فيهم أنا.

نستخدم هذا النموذج الحيواني لدراسة الإصابات المرتبطة بنقص التروية وإعادة التروية في طعم خيفي مركب للنسجة. علاوة على ذلك ، نستخدم هذا الإجراء لدراسة الأحداث المناعية لرفض الطعم الخيفي للأنسجة المركبة ، بالإضافة إلى استراتيجيات منع حدوث الرفض. تشمل هذه الاستراتيجيات تقليل أو حتى تجنب تثبيط المناعة المداومة من خلال استخدام أنظمة منعية مستهدفة.

يبدأ إجراء زراعة الطرف الخلفي الأحمر بحصاد طعم الأنسجة المركبة للمتبرع حيث تتم إزالة الطرف الخلفي الأيمن من الجرذ المتبرع وتخزينه على الجليد. بعد ذلك ، تتم إزالة العرج الخلفي الأيمن من الجرذ المتلقي لإفساح المجال لعرج المتبرع. ثم تتم إزالة عرج المتبرع من الجليد وزرعه في الجرذ المتلقي.

في هذا النموذج ، يتم إجراء مفاغرة الأوعية الدموية باستخدام تقنية الكفة. في تجاربنا ، تم استخدام ذكور لويس ريدز الذين يزن 250 جراما. تم تحفيز التخدير باستخدام 50 ملليغرام لكل كيلوغرام من حقن البنتوباربيتال داخل الصفاق.

يتم حلق اللون الأحمر المخدر وتعقيمه فوق الفخذ والعرج للإجراء. مطلوب مجموعة كاملة من أدوات الجراحة المجهرية بما في ذلك الجراحة المجهرية المستقيمة والمقصات وموسعات الأوعية الدموية والملقطين المنحنيين. علاوة على ذلك ، فإن أهم الأدوات هي مشابك الأوعية الدموية المجهرية الموضحة هنا.

لاختبار عمق التخدير ، يتم استخدام منعكس قرصة إصبع القدم. يتم وضع الجرذ على منصة معقمة ويتم تثبيته بالأطراف الأربعة في امتداد كامل قبل الشق. يتم جلد العرج خاليا من أي محور هنا لمنع التلوث.

يتم إجراء شق عبر الفخذ الأيمن تقريبا على مستوى الرباط الإربي. تظهر الأوعية الفخذية مباشرة تحت الجلد ويتم تشريحها مجانا باستخدام تيري ثنائي القطب وتشريح حاد. ثم يتم تشريح الأوعية الشرسوفية مجانا وكيها.

يتم وضع حلقة واحدة كخياطة حول الوريد والشريان للسماح بالجر دون التعامل مباشرة مع الأوعية باستخدام الأدوات بعد الانفصال. يتم ربط الفروع العميقة للشريان والوريد بثمانية خياطة حريرية بالقرب منها وكيها بعيدا قبل حصاد العرج المتبرع. يتم إعطاء 50 وحدة من الهيبارين عن طريق الوريد الجنائي.

بعد دقيقة واحدة ، يتم إرجاع الانتباه إلى الأوعية الفخذية. يتم ربط الشريان الفخذي قدر الإمكان تقريبا باستخدام ثمانية حرير ، ويتم تكرار نفس الإجراء ل Fal. ثم يتم قطع كلا الوعاءين بعيدا عن الرباط ويتم وميض الطرف الخلفي عبر الشريان بمحلول HDK المثلج البارد على مدى خمس دقائق.

بعد ذلك ، يتم تقسيم جميع مجموعات العضلات بعناية باستخدام المقص. يتم إجراء قطع العظم باستخدام منشار كهربائي دوار على مستوى الثلث البعيد من عظم الفخذ. ثم يتم غمر العرج المحصود في 20 مل من محلول HDK المثلج البارد للحفظ والتخزين البارد حتى الزرع.

تبدأ العملية المتلقية بشكل مشابه لعملية المتبرع بعزل وتشريح الأوعية الفخذية. بعد التشريح الدقيق ، يتم ربط الأوعية باستخدام ثمانية حرير بعيد قدر الإمكان ، ولكن قريب من الأوعية الشرسوفية الإقلاع. ثم ننتقل إلى تركيب الكفة للوريد المتلقي عن طريق سحب الكفة متعددة الخطوط فوق الوعاء.

يتم تطبيق مشبك وريد واحد بالقرب من الكفة فوق مقبض الوريد والكفة لضمان الإرقاء الكامل. يتم قطع الرباط الموجود في الطرف البعيد من الوريد ثم يتم تجنب الوريد فوق الكفة. يتم ربط رباط ثمانية O محيطا حول الوعاء والكفة التي تثبت الوريد المتلقي في المكان.

يتم تنفيذ نفس الإجراء بالضبط للشريان ذو الكفة ذات القطر الأصغر. يتم تشريح عرج المتلقي بشكل مشابه لعرج المتبرع مع تشريح حاد لمجموعات العضلات وقطع العظم الذي يتم إجراؤه في منتصف عظم الفخذ. نحن الآن على استعداد لزرع العرج الخلفي.

تتم إزالة عرج المتبرع من محلول HDK. يبدأ الزرع بتخليق عظم الفخذ بإبرة قياس 18 كقضيب داخل النخاع. يتم قطع الطرف ويتم قطع الإبرة المتبقية إلى سنتيمتر ونصف إلى سنتيمترين.

يتم تقريب مجموعات العضلات البطنية بشكل وثيق بأربعة خيوط متقطعة من Vicryl أو البرولين لتثبيت الطرف والاستعداد لتقليق الأوعية الدموية. بالنسبة لتمفاغرة الكفة R ، يتم توسيع الوريد المتبرع ، وسحبه على الوريد والكفة المتلقي وتثبيته بمحيط آخر ثمانية o رباطة. يتم تنفيذ نفس الإجراء للشريان المتبرع.

أخيرا ، بمجرد أن تصبح كلتا الوعاءين estamos ، يتم تحرير المشبك الوريدي ، يليه المشبك الشرياني. إعادة التروية فوري ويمكن تصوره بسهولة من خلال عودة لون الطرف البعيد والقدم ، وكذلك التدفق النابض عبر الشريان. يتم إعادة تقريب مجموعات العضلات الظهرية المتبقية.

يتم إغلاق الجلد بأربعة خيوط متقطعة من Vicryl أو البرولين ، وتكتمل عملية الزرع بعد الجراحة. يتم تسخين اللون الأحمر على وسادة تدفئة ويتم إعطاء المسكنات والمضادات الحيوية. تتم مراقبة اللون الأحمر عن كثب لمدة 48 إلى 72 ساعة بحثا عن علامات الضيق أو المضاعفات الجراحية.

إجراء تقنية الكفة لإعادة مفاغرة على نطاق واسع في مجالات البحث الجراحي المختلفة على مدار العقود الماضية من نماذج زراعة الكلى البحرية إلى نماذج زرع القلب غير المتجانسة. يسمح بدراسة جوانب مختلفة من العلاج الكيميائي ، والإصابات المرتبطة بإعادة التروية ، بالإضافة إلى الظواهر المناعية. بعد عملية الزرع.

نعرض هنا أول تطبيق لتقنية الكفة الفريدة هذه على زرع الأنسجة المركبة للأطراف. في نموذج حيواني صغير ، تقلل تقنية الكفة بشكل كبير من وقت الجراحة وخبرة الجراحة المجهرية التي يتطلبها المشغل وفقدان الدم أثناء الجراحة عند مقارنتها بتقنيات الخياطة التقليدية للمفاغرة.