Name: 백혈구 호밍 및 마이 그 레이션의 비침습 영상 생체내에 /em (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-12-05T17:10:00.000+00:00
Duration: 7 min 42 s
Description: 배우세요 생체내 백혈구 호밍 및 마이그레이션 비침습 영상 기법을 이중광자 현미경을 사용하여 마우스 발바닥에서 면역 반응을 실시간으로 관찰하고 정량 분석하는 방법을 익히세요.

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이 작품은 NIH 그랜트 R01 - 3155-53502 워싱턴 대학 화이자 바이오 메디컬 연구 계약에 의해 지원되었다.

1. 동물 준비 : 이 프로토콜은 neutrophils과 macrophages이 찬란 eGFP 1의 표현에 의해 표시하는, 성인 여성 성인 LysM - eGFP 마우스를 사용합니다. <ol class="lalpha"><li> 혈관에 레이블 : 비 타겟 양자 도트의 15μl 혈관을 시각화하는 (655nm) PBS 100 μl에 희석 및 이미징하기 전에 마우스를 10-30 분에 정맥 주입합니다. </li><li> 마취 : <ol><li> 수의과 흡입 마취 시스템 (귀족 의료 서비스, 병원)의 유도 챔버에서 마우스를 놓습니다. </li><li> Isoflurane 3~4%하고 100 % 산소 캐리어 가스 유량에 기화기를 설정 ~ 1 L / 분. 후면 발가락 핀치 반사가 손실 때까지 실수 마취의 과용을 방지하기 위해 밀접하게 동물을 모니터링합니다. </li><li> 마취는 1.5에서 관리하고 있습니다 필요에 따라 호흡 유물을 최소화하기 위해 영상 중에 조정 ~ 2% Isoflurane 및 괜찮아요. 마우스의 호흡 속도는 마취의 적절한 비행기를 확보하기 위해 이미징 세션에 걸쳐 신중하게 모니터링합니다. </li><li> Puralube 수의과 연고가 건조 방지하기 위해 눈을에 적용됩니다. </li><li> 마우스는 규제 36에 배치됩니다 ° C 가열 패드 (브레인 트리 과학) 주입 및 이미징 도중 저체온증을 방지하기 위해. </li><li> 탈수 방지하기 위해 마우스 PBS SC 모든 1~2시간 100 μl 주어집니다. </li></ol></li><li> 백혈구 채용을 유발하는 염증성 자극을 제공합니다 : <ol><li> 수술 단계와 면봉 70 %의 에탄올과 노상 강도에 마우스를 놓습니다. </li><li> ~ 90 도의 분사를 촉진하고 배달 깊이의 정밀도를 향상시키기 위해 베벨 근처 인슐린 주사기 바늘을 구부. </li><li> 1μl PBS에 희석 bioparticles E.coli 0.5 μg과 주사기를로드합니다. 이것은 쉽게 비말을 로드할 수 있도록 microfuge 튜브의 뚜껑에 할 수 있습니다. </li><li> 굽​​은 집게로 발가락을 잡고 그것이 바로 피부 아래까지 베벨이 위를 향하게과 피부를 통해서 부드럽게 바늘을 삽입합니다. </li><li> 천천히 주입하고 다시 물을 방지하기 위해 5 초 동안 장소에서 개최. </li></ol></li></ol> 2. 이미징 단계 설정 : 영상 플랫폼은 센터를 통해 절단 원형 구멍이있는 알루미늄 플레이트로 구성되어 있습니다. 대형 커버 유리 접시와 고무 O - 링이 뒤쪽 발을 수용하기 위해 방수 recessed 챔버를 만드는 상단에 붙어 있습니다 하단에 붙어있다. 알루미늄 플레이트가 36 ° C 접시 상단에 부착된이 가열 요소를 통해 따뜻하게합니다. <ol class="lalpha"><li> 사전 예열 영상 무대에서 마우스를 놓고 36 ° C의 온난 패드를 사용하여 마우스의 핵심 체온을 유지합니다. </li><li> superglue의 박막으로 이미징 챔버의 coverglass에 앞발을 고정합니다. </li><li> 두 접착제의 부동 비트를 제거하고 신선한 PBS (° C 36 미리 예열)와 챔버를 채우기 위해 앞발을 씻으십시오. </li></ol> 생쥐는 동물의 생존을 구성하지 않고 최대 4 시간 동안 몇 군데하실 수 있습니다. 발을 부드럽게 아세톤 및 세로 이미징 연구 소생 생쥐의 작은 양의 공개 수 있습니다. 그러나,이 경우, 우리는 &lt;2 시간 이미징 기간을 권장하고 마취의 과다 복용이나 탈수의 위험을 최소화하기 위해 세션 사이 24-48 H를 기다리고 있습니다. 3. 이미징 취득 이 프로토콜에서 사용되는 두 개의 광자 현미경 (2P 현미경)는 똑바로 현미경 구성된 맞춤식 듀얼 레이저 비디오 속도 시스템입니다. 이 시스템은 두 개의 티를 갖추고 있습니다 : 사파이어 레이저, 넷 정면에서 동시에 3, 4 채널 인수 및 20x 물 침지 목표 (올림푸스, 20x/0.95 NA)에 대한 이중 알칼리 PMTs.을 <ol class="lalpha"><li> 890 - 900nm에 사파이어 레이저 (일관된 주) : 카멜레온 XR 티를 조정. </li><li> 파란 (&lt;480 nm의 두번째 고조파 생성 신호), 녹색 (480 - 560nm, LysM - eGFP 긍정 neutrophils)과 빨간색 (&gt; 560 nm의, 양자 도트 표시 혈관 세 채널을 분리하는 480nm와 560nm 이색성 거울 (SemRoc)를 사용 ). 또는 560nm 필터는 E.을 구분하는 570nm 필터를 교체할 수 있습니다 655nm 양자 점 (적색 깊이가 나타납니다)에서 대장균의 bioparticles (576nm bioparticles 오렌지가 나타납니다.) </li><li> 조심스럽게 PBS에 목적을 절감하고 발가락의 혈관에 중점을두고 있습니다. </li><li> 이미지 수집 속도 비디오 속도 (30f/sec)에서 운영하고 조직 랜드마크로 신속하게 관심의 혈관 (하나를 찾을 수 (비디오 속도 수집 속도) 조직을 조사 콜라겐에서 냄새가 나는데 두 번째 고조파 신호를 이용한 보이는 lysM - eGFP의 neutrophils 포함). </li><li> (수 색상 분리를 최적화하고 배경을 통해 충분한 신호를 달성하는 데 필요한 레이저의 양을 최소화하기 위해 PMTs의 게인을 조정주의 이미지를 포화하지!). </li><li> 관심 지역 지역이있는되면, 시간 저속 영상을 시작합니다. 시간 저속 영상은 두 개의 서로 다른 시간적 해상도로 수행할 수 있습니다. 이미징 세포 압연 및 접착 및 혈관 내에서 실시간으로, 우리는 하나의 Z - 비행기에서 30f/sec을 획득. 실질의 세포 넘쳐 흐름 및 마이 그 레이션을 문서화 위해 우리는 3 차원 시간 저속 이미징을 수행합니다. 전형적인 수집 프로토콜은 각각의 Z - 단계 15 프레임 평균 30 초 간격으로 Z - 단계 200-225 50μm의 볼륨에 대해 21 순차 2.5μm 인수로 구성됩니다. </li><li> 일단 데이터 파일이 실험실 서버에 저장되며, Imaris 또는 Volocity 소프트웨어는 2 추적 다차원 렌더링과 셀, 3을 수행하는 데 사용할 수 있습니다. </li></ol> 4. 대표 결과 호중구의 상상 1.Real 시간 (30f/sec)는 200x에있는 혈관을 따라 굴러. 시간 경과 영상은 빨간색으로 표시된 리스테리아 monocytogenes와 감염 후 상업 중심지에 대한 혈관의 내피 놀면서, 녹색, neutrophils를 보여줍니다. 결합 조직의 콜라겐 섬유가 파란색으로 표시됩니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/2062/2062_Miller_Movie1.mov">비디오를 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> 200x에서 호중구 모집 역학 2.Time - 저속 3D 영상. 염증 조직을 통해 유통 및 마이 그 레이션에서 전형적인 호중구 모집이 나타납니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/2062/2062_Miller_Movie2.mov">비디오를 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>

<ol><li>Faust, N., Varas, F., Kelly, L. M., Heck, S., Graf, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insertion+of+enhanced+green+fluorescent+protein+into+the+lysozyme+gene+creates+mice+with+green+fluorescent+granulocytes+and+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Insertion of enhanced green fluorescent protein into the lysozyme gene creates mice with green fluorescent granulocytes and macrophages.</a> Blood. 96, 719-726 (2000).</li>
<li>Zinselmeyer, B. H., Lynch, J. N., Zhang, X., Aoshi, T., Miller, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Video-rate+two-photon+imaging+of+mouse+footpad+-+a+promising+model+for+studying+leukocyte+recruitment+dynamics+during+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Inflamm+Res%22%5BJournal%5D)">Video-rate two-photon imaging of mouse footpad - a promising model for studying leukocyte recruitment dynamics during inflammation.</a> Inflamm Res. 57, 93-96 (2008).</li>
<li>Zinselmeyer, B. H., Dempster, J., Wokosin, D. L., Cannon, J. J., Pless, R., Parker, I., Miller, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chapter+16.+Two-photon+microscopy+and+multidimensional+analysis+of+cell+dynamics%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Chapter 16. Two-photon microscopy and multidimensional analysis of cell dynamics.</a> Methods Enzymol. 461, 349-378 (2009).</li>
<li>Gray, D. F., Jennings, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Allergy+in+experimental+mouse+tuberculosis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+Rev+Tuberc%22%5BJournal%5D)">Allergy in experimental mouse tuberculosis.</a> Am Rev Tuberc. 72, 171-195 (1955).</li>
<li>Lin, A., Loughman, J. A., Zinselmeyer, B. H., Miller, M. J., Caparon, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Streptolysin+S+inhibits+neutrophil+recruitment+during+the+early+stages+of+Streptococcus+pyogenes+infection.+Infect+Immun%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Streptolysin S inhibits neutrophil recruitment during the early stages of Streptococcus pyogenes infection. Infect Immun.</a> 77, 5190-5201 (2009).</li>
<li>Smith, C. J., Zhang, Y., Koboldt, C. M., Muhammad, J., Zweifel, B. S., Shaffer, A., Talley, J. J., Masferrer, J. L., Seibert, K., Isakson, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacological+analysis+of+cyclooxygenase-1+in+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Pharmacological analysis of cyclooxygenase-1 in inflammation.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 95, 13313-13318 (1998).</li>
<li>Wipke, B. T., Allen, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Essential+role+of+neutrophils+in+the+initiation+and+progression+of+a+murine+model+of+rheumatoid+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Essential role of neutrophils in the initiation and progression of a murine model of rheumatoid arthritis.</a> J Immunol. 167, 1601-1608 (2001).</li>
<li>Baez, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+open+cremaster+muscle+preparation+for+the+study+of+blood+vessels+by+in+vivo+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Microvasc+Res%22%5BJournal%5D)">An open cremaster muscle preparation for the study of blood vessels by in vivo microscopy.</a> Microvasc Res. 5, 384-394 (1973).</li>
<li>Mempel, T. R., Scimone, M. L., Mora, J. R., von Andrian, U. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((in+vivo+imaging+of+leukocyte+trafficking+in+blood+vessels+and+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Immunol%22%5BJournal%5D)">in vivo imaging of leukocyte trafficking in blood vessels and tissues.</a> Curr Opin Immunol. 16, 406-417 (2004).</li>
<li>Miller, M. J., Wei, S. H., Cahalan, M. D., Parker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autonomous+T+cell+trafficking+examined+in+vivo+with+intravital+two-photon+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Autonomous T cell trafficking examined in vivo with intravital two-photon microscopy.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 100, 2604-2609 (2003).</li>
</ol>

모든 실험은 세인트 루이스에있는 워싱턴 대학의 동물 연구위원회에 의해 승인된 프로토콜에 따라 수행되었다.

이 비디오 프로토콜에서 우리는 염증에 대한 응답으로 백혈구 모집의 비침습 2P 이미징을위한 절차를 보여줍니다. 노상 강도는 알레르기, 감염 및 면역 질환 4-7로 염증을 공부에 대한 고전적인 생리적 사이트입니다. 2P 영상은 압연 및 이펙터 기능의 사이트에 chemotaxis하는 혈관에 접착에서 백혈구 매매 경로의 별개의 단계에 대한 자세한 그림을 제공합니다. 우리는 백혈구 모집은 염증성 자극의 종류에 대응 다릅니다 것으로 나타났습니다. 자극의 복용은 신중하게 선택된 모든 시도는 생리 모욕을 요점을 되풀이하다을하여야한다. 복용량이 너무 높거나 아닌 생리적 사이트에 전달되면 자극이 실험 유물에 호스트 또는 리드를 압도하고 비정상적인 현상을 생산 수 있습니다. 우리는 적절한 제어와 결합하여 제공되는 볼륨과 주사의 깊이 모두의 정밀도를 높이기 위해 구부러진 바늘을 사용하는 시범 실험을위한 자극의 titrated 복용을 권장합니다. 그것은 연쇄 이미징 실험도 주사...

<table><tbody><tr><td>Isoflurane, USP</td><td>Butler Animal Health Supply</td><td>029405</td><td></td></tr><tr><td>655nm 비표적 양자점</td><td>Invitrogen</td><td>Q21021MP</td><td></td></tr><tr><td>Tetramathylrhodamine 접합 &lt;em&gt;E. coli&lt;/em&gt; BioParticles </td><td>Invitrogen</td><td>E2862</td><td></td></tr><tr><td>Listeria monocytogenes (Lm)</td><td>Reference 2</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Quick gel</td><td>Duro</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Puralube Vet 연고</td><td>Pharmaderm Animal Health</td><td></td><td></td></tr><tr><td>인슐린 주사기</td><td>BD Biosciences</td><td>08290-3284-38</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Thermo Fisher Scientific, Inc.</td><td>SH30256.02</td><td></td></tr></tbody></table>

백혈구 호밍 및 마이 그 레이션의 비침습 영상 생체내에</em

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

두 광자 (2P) 현미경은 생물학에 의해 광범위하게 적응되어 고해상도 이미징 기술이다. 2P 현미경의 가치는 그대로 조직 내에서 라이브 생쥐의 세포 행동에 관한 풍부한 spatiotemporal 정보를 제공한다는 것입니다. 백혈구 모집 호스트 감염에 대한 방어와시 선택하지에 큰 역할을, 염증 및 면역 질환에 기여하실 수 있습니다. 세포가 빛을 산란 조직 내에 깊이있는 혈관 내에 빠르게 이동되므로 생체내에서 백혈구 채용을 공부하는 것은 기술적으로 도전합니다. 지금까지 대부분의 intravital 영상 연구는 혈관과 조직을 노출 외과 준비가 필요합니다. 수술 자체 유도 조직 손상과 염증을 방지하려면 여기, 우리는 마우스 노상 강도 및 지골에서 백혈구 거래를 연구하는 데 사용할 수있는 비침습 단일 세포 이미징 방법을 설명합니다. 우리는 2P 이미징 준비의 기술적 측면을 논의하고 실행 및 데이터를 수집하도록 설정 초기의 전형적인 실험을 통해 독자를 걸어보세요.

여기, 우리는 마우스 노상 강도의 백혈구가 추적 연구 비침습 두 개의 광자 (2P) 현미경의 접근 방식을 설명합니다. 우리는 조직 이미징 준비의 기술적 측면을 논의하고 실행 및 데이터를 수집하도록 설정 초기의 전형적인 실험을 통해 독자를 걸어보세요.

이광자(2P) 현미경법은 생물학자들에 의해 널리 채택된 고해상도 이미징 기술입니다. 이광자 현미경법의 가치는 ...

백혈구 모집은 감염에 대한 숙주 방어에 중요한 역할을 하며, 이것이 조절되지 않으면 염증성 및 자가면역 질환의 원인이 될 수 있습니다. 본 영상에서는 먼저 마우스에 양자점을 주입하여 혈관 내강을 형광 표지한 후, 발에 박테리아를 피하 주입하여 백혈구의 모집과 이동을 시각화합니다. 그 후 마우스를 예열된 스테이지로 옮겨 발을 이미징 챔버의 커버 글라스에 고정합니다.그 다음 이광자 현미경을 사용하여 생체 내 neutrophil 모집 및 이동 이미지를 획득하며, 롤링과 부착부터 혈관외 유출 및 화학주성까지 백혈구 모집의 다양한 단계들을 정량적으로 분석합니다. 안녕하세요, 저는 세인트루이스 워싱턴 대학교 병리학 및 면역학과의 Dr. Mark Miller 연구실의 Wan입니다. 오늘은 생체 내 백혈구 호밍 및 이동을 비침습적으로 관찰하는 이광자 이미징 절차를 보여드리겠습니다.제 이름은 Jeremiah McDowell입니다. 저 또한 Mark Miller 연구실 소속입니다. 저희는 염증 과정 중 단핵구 및 호중구의 모집 역학을 연구하기 위해 이 절차를 사용합니다.그럼 시작하겠습니다. 본 프로토콜에서는 성체 lys, M-E-G-F-P 마우스를 사용합니다. 이 마우스들의 중성구와 대식세포는 EGFP로 표지되어 있습니다. 먼저 15 µL의 비표적 퀀텀 닷을 100 µL의 PBS에 희석한 후, 추후 혈관 시각화를 위해 마우스에 정맥 주사하십시오.양자점을 주입하고 약 10분이 지난 후 영상 촬영을 진행하는 동안, 마우스를 isof fluorine 마취 챔버에 넣고 isof fluorine 농도를 3%, 산소 유량을 분당 약 1L로 설정합니다. 마우스가 마취되면 발가락끔지 반응(toe pinch)을 통해 마취 깊이가 적절한지 확인합니다. 마우스의 눈이 건조해지는 것을 방지하기 위해 순수 lube 수의용 연고를 도포합니다.마취용 노즈콘이 장착된 수술대 위에 마우스를 놓고, 뒷발 하나를 70% ethanol로 닦아줍니다. 마취 상태를 유지하기 위해 isof fluorine 농도를 1.5에서 2% 사이로 조절합니다. 적절한 마취 수준이 유지되는지 확인하기 위해 이미징 세션 동안 마우스의 호흡수를 모니터링합니다. 곡선 핀셋을 사용하여 인슐린 주사바늘의 사면 근처를 잡고 45도에서 90도 각도로 구부립니다.이렇게 하면 주입이 수월해지고 주입 깊이 피펫의 정밀도를 높일 수 있습니다. 적절히 희석된 박테리아 0.5 µL를 마이크로 튜브 뚜껑에

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Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

본 논문은 특정 리간드에 leukocytes의 chemotactic 응답을 확인하고 라이브 셀 이미징 기술을 사용하여 세포 표면 수용체와 cytosolic 단백질 사이의 상호 작용을 식별하는 방법을 설명합니다.

Leukotriene B의 실시간 영상 4 중재 셀 마이 그 레이션 및 β - arrestin로 BLT1 상호 작용

우리는 생체내에서 호중구 chemoattractant의 근원에 대한 응답으로 호중구 모집 중에 동적으로 호중구 - 내피 세포 상호 작용을 측정하기위한 brightfield intravital 현미경의 프로토콜을 설명합니다. 호중구 intraluminal 크롤링, 마우스 cremaster 근육 조직에 transendothelial 마이 그 레이션 및 chemotaxis 시간은 타락한 동영상 사진 및 ImageJ와 추적과 시각입니다.

추적 호중구 Intraluminal 크롤링, Intravital 비디오 현미경에 의한 조직의 Transendothelial 마이 그 레이션 및 Chemotaxis

우리는 생체 표지 세포와 마우스 모델에서 MRI를 사용하여 생체 내 세포 추적을위한 일반적인 프로토콜을 설명합니다. 셀 라벨, 이미지 수집 처리 및 정량화를위한​​ 일반적인 프로토콜이 포함되어 있습니다.

세포 추적을위한 생체 19 F MRI에서

백혈구는 세포층 또는 세포 횡단 경로를 사용하여 내피 세포 단일 층을 교차. 우리는 내생 접합부의 분포가 VE-cadherin의 및 PECAM-1 백혈구 transendothelial 이주 중에 생리 흐름에 따라이 윤회 노선을 구별하기 위해 수행하는 간단한 분석을 개발했다.

호중구 윤회에서 생리 흐름 중 내피 세포 - 세포 접합의 실시간 영상

단핵구는 선천성 면역의 핵심 조절자이며 말초 단핵 식세포 시스템의 재생과 염증의 경우에 중요한 역할을 합니다. 이 원고는 단핵구 동원 메커니즘을 연구하기 위해 마우스 칼바리아 골수를 실시간으로 이미징하는 절차를 설명합니다.

마우스 골수 단핵구를 추적<em&gt; 생체</em

마우스의 장간막 정맥에 대한 이 단순화된 생체 내 현미경 검사는 백혈구-내피 및 혈소판-백혈구 상호 작용을 관찰하기 위해 다양한 염증 모델에 사용할 수 있습니다.

마우스의 Mesenterial 혈관에서의 생체 내에 현미경 백혈구 - 내피 세포와 혈소판 - 백혈구 상호 작용

마취된 마우스에서 생체 내 컨포칼 현미경을 사용하여 정상 상태 및 염증 상태에서 장간막 정맥의 호중구 및 단핵구의 거동을 모니터링하는 프로토콜에 대해 자세히 설명합니다.

실시간으로 마취 마우스에 생체 내에 현미경으로 장간막 혈관에서 호중구와 단핵구 이미징

염증 부위에서 이펙터 CD4 T 세포의 삽입 운동을 제어하는​​ 메카니즘은 상대적으로 알려져 있지 않다. 우리는 시각화 현장에서 이러한 세포의 동적 거동의 연구를 허용 염증 귀 진피의 시험 관내 -primed CD4 T 세포에서 조작하는 비 침습적 방법을 제시한다.

염증이 진피의 이미징 CD4 T 세포 간질 마이그레이션

여기 소개 된 프로토콜 vivo에서 염증 성 조건 하에서 기본 인간 림프 톨의 폐 유도 용량 특성을 수 있습니다. 알레르기 염증의 마우스 모델에서 adoptively 전송된 인간의 면역 세포의 폐 침투 몇 군데 하 고 화학적으로 허가 폐 조직의 빛 시트 형광 현미경 검사 법에 의해 측정할 수 있습니다.

고급 폐 유도 빛 시트 현미경 검사 법에 따라 알레르기 염증의 Vivo 모델에서 실험에서 인간 림프 톨의 이미징

호중구 이동은 화학 유인 물질 및 세포 외 미세 환경과의 상호 작용에 대한 반응으로 원형질막의 빠르고 지속적인 리모델링에 의존합니다. 본원에서는 마취된 마우스의 귀에 주입된 호중구에서 막 리모델링의 역학을 조사하기 위한 Intravital Subcellular Microscopy에 기초한 절차가 설명됩니다.

생리학적 조건에서 세포하막 리모델링을 조사하기 위해 마우스 피부의 호중구 이동을 이미징합니다.

관절의 생체 영상 촬영은 염증이 생긴 관절 내 백혈구의 이동 행동과 분자 역학을 밝히는 데 매우 유용한 기법입니다. 여기서는 제2형 콜라겐 유발 관절염(CIA) 마우스 모델을 사용한 관절의 생체 내 영상 검사에 대한 상세한 프로토콜을 제시합니다.

생체 내 영상 검사는 관절 내 백혈구의 이동 행동을 밝혀냅니다

배우세요 생체내 백혈구 호밍 및 마이그레이션 비침습 영상 기법을 이중광자 현미경을 사용하여 마우스 발바닥에서 면역 반응을 실시간으로 관찰하고 정량 분석하는 방법을 익히세요.

백혈구 호밍 및 마이 그 레이션의 비침습 영상 생체내에

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