August 28th, 2010
Всего техника культуре эмбрионов позволяет мыши культуры и крысиных эмбрионов Исключая виво Состоянии в течение ограниченного периода соответствующее середине беременности этапов. В этом видео-протокол, мы демонстрируем наши стандартные процедуры крысы целая культура эмбриона после E12.5 использовании поворотного устройства типа бутылки системе культуры.
В биологии развития существуют различные животные, которые используются для эксперимента. Сельскохозяйственная техника гнильных эмбрионов была создана в 1950-х годах и разработана до появления современных генетических манипуляций в сельском хозяйстве Гавайев. Ослабленный директор напрямую воздействует на области любви с помощью кубика или трансфекта генов, так как эмбрионами можно манипулировать и как микроскопом, поэтому целая эмбр культура является очень полезным инструментом.
Когда мы хотим изучить динамический процесс развития маорийских эмбрионов после постимплантационного развития. Рост маорийских эмбрионов критически зависит от функционального презентатора, что ограничивает период культивирования. В целом, мы можем культивировать эмбрионы в период эмбриональных суток от 8,5 до 14,5 суток у крыс и Е 6,5 и 12,5 у мышей.
В лаборатории мы культивируем эмбрионы крыс и мышей с помощью вращающейся системы культивирования. Эта система культивирования наиболее популярна и подходит для культивирования эмбрионов крыс и мышей во время гестации свинца. То есть после Е 11.5 и 9.5 у красных и мышей.
В этом видео мы хотели бы представить наш стандартный протокол для голодного посева с использованием эмбрионов E 12.5 RU. В этом состоянии эмбрион можно культивировать в течение двух дней, что вполне достаточно для изучения различных эффективных манипуляций в сельском хозяйстве. Есть два критических шага для успеха.
Во-первых, процедура вскрытия должна быть точной, чтобы не повредить эмбрион, особенно стержневые сосуды. Во-вторых, процедура должна быть максимально быстрой. Особенно это касается более старых эмбрионов.
Например, в случае с эмбрионами мышей E 10.5, то именно они должны быть перенесены в течение 30 минут. Мы применили технику культивирования цельного эмбриона для мутантных правых эмбрионов группы из шести штук. Например, мы анализируем характер миграции нейронных клеток у мутанта при любовном малом количестве клеток с красителем или путем трансплантации клеток уровня в эмбрионы белого типа и приглушенного фона.
Кроме того, мы разработали метод переноса генов в культивируемые мышиные и красные эмбрионы с помощью электрооперации, то есть с использованием электрического тока. Мы можем просто ввести конструкты экзогенных генов, доминантных негативных форм и миРНК в область развивающегося мозга. Таким образом, мы можем легко анализировать функции генов по потере функции и эксперименты с усилением функции.
Мы также исследуем поведение клеток, поданных с помощью GFP или RFP, с использованием культуры органов или посева срезов, а также сельского хозяйства. Таким образом, вы можете проводить различные эксперименты с использованием культуры Лио в сочетании с другими техниками.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Этот видеопротокол демонстрирует методику культивирования целого эмбриона для эмбрионов крыс после E12.5 с использованием системы культивирования в бутылке с ротатором. Этот метод позволяет проводить экс-виво культивирование на критических стадиях средней беременности.