Name: פורסים תרבות Organotypic של E18 מוח החולדה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-11T00:00:00.000+00:00
Duration: 18 min 48 s
Description: למדו כיצד לבצע תרבות פרוסות אורגנוטיפית של מוחות עכברוש בגיל E18 באמצעות אגרוז נמס וויברטום. שיטה זו מאפשרת חקר פיתוח קורטיקלי ומיגרציה נוירונלית במעבדה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

פורסים תרבות organotypic של e18 מוח החולדה

Organotypic Slice Culture of E18 Rat Brains

תרבויות פרוסה Organotypic מן המוח מכרסם עובריים נמצאים בשימוש נרחב ללמוד התפתחות המוח. אמנם יש לעתים קרובות יתרונות מערכת ב-vivo, תרבויות פרוסה organotypic לאפשר אחד כדי לבצע מספר מניפולציות כי הם לא ריאלי כרגע ב-vivo. עד כה, organtotypic עובריים פרוסה תרבויות המוח שימשו לעקוב תאים בודדים באמצעות זמן לשגות מיקרוסקופ, לתפעל את הביטוי של גנים ב emanances ganglionic (אזור שקשה היעד על ידי electroporation ברחם), כמו גם עבור תרופתי מחקרים. בפרוטוקול הווידאו הזאת אנחנו מדגימים איך לעשות תרבויות פרוסה organotypic מן החולדה יום עובריים 18 עוברים. פרוטוקול כרוך בניתוח עוברים, הטבעה אותם על הקרח נמוך להמיס agarose, חותך את המוח מוטבע על vibratome, ולבסוף ציפוי הפרוסות על מסננים מנות התרבות. פרוטוקול זה גם רלוונטי במתכונתו הנוכחית לעשיית תרבויות פרוסה organotypic מגיל עובריים שונים עבור שתי חולדות ועכברים.

פורסים תרבות Organotypic של E18 מוח החולדה

תרביות של פרוסות אורגנוטיפיות ממוחות של מכרסמים עובריים משמשות באופן נרחב לחקר התפתחות המוח. בעוד שלמערכת in-vivo יש לעיתים קרובות יתרונות, ...

שמי לורה אליאס. אני סטודנטית לתואר מתקדם במדעי העצבים העובדת במעבדתו של Arnold k Stein. אנחנו נמצאים במכון לרפואת רגנרציה כאן ב-UCSF, והיום אראה לכם כיצד לבצע תרבית של פרוסות אורגנוטיפיות של מוחות חולדה ביום העוברים E 18.הליך זה כולל הוצאת המוחות באמצעות דיסקציה, הטמעתם ב-low melt agarose, לאחר מכן חיתוכם ב-vibratome כדי להשיג חתכי corona, ולבסוף העברתם למערכת תרבית של חתכים (Slice culture system). ישנם מספר כלים וריאגנטים חשובים המשמשים בהליך תרבית החתכים זה. תזדקקו למיקרוסקופ דיסקציה כדי להוציא את המוחות.אנו משתמשים ב-V זה בדומה ל-VT 1000 S vibram, וזו מערכת טובה לחיתוך פרוסות. לדבק עשויה להיות חשיבות רבה. אנו משתמשים בסוג נעילה זה עבור דבק המדביק את המוחות היטב, כיוון שלעיתים, אם משתמשים בסוג דבק שגוי, המוחות ינשלו בעת ניסיון חיתוך שלהם, ודבר זה עלול להיות בעייתי.אנו משתמשים גם במסנני milli cell, שהם המסננים עליהם אנו מניחים את הפרוסות בזמן שהן בתרבית, וזהו חלק חשוב נוסף בתהליך. בשלב זה, לפני תחילת תהליך תרבית הפרוסות, ישנם מספר שלבים שחשוב לבצע. ראשית, עליכם להכין את ה-A CSF, ולאחר סיום ההכנה, יש להניח אותו על קרח לקירור ובו-זמנית להתחיל להעביר דרכו בועות של carbogen.יהיה עליכם להכין גם את ה-4% agros. לשם כך, השתמשו ב-low melt agros והמיסו אותו ב-CSF, חממו במיקרוגל, ולאחר מכן ש

organotypic-slice-culture-of-e18-rat-brains

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

תרבות organoptypic בהיפוקמפוס מודל פרוסה...

תרבות Organotypic בהיפוקמפוס Slice דגם לבחינת פגיעה עצבית

אנו מתארים שיטה להכין פרוסות בהיפוקמפוס organotypic כי ניתן להתאים בקלות לאזורים אחרים במוח. פרוסות המוח מוטלות על ממברנות נקבוביים התקשורת בתרבות מותר להקים ממשק. שיטה זו משמרת את הארכיטקטורה ברוטו של ההיפוקמפוס עד 2 שבועות בתרבות.

Organotypic Slice תרבויות בהיפוקמפוס

פרוטוקול זה מתאר assay פרוסה organotypic אופטימיזציה עבור המוח לאחר הלידה ברזולוציה גבוהה זמן לשגות הדמיה של הגירה neuroblast בזרם נודדות מקורי.

Assay Slice Organotypic עבור זמן לשגות הדמיה ברזולוציה גבוהה נדידת הנוירונים במוח אחרי לידה

זהו פרוטוקול להכין ולתחזק הכנה פרוסה neocortical בתרבות organotypic לצורך ביצוע הקלטות חשמל עצב פירמידליים.

הקלטה נייד שלמים מן ההכנה פורסים Organotypic של הניאוקורטקס

שיטה לייצר פרוסות organotypic מן המוח התיכון E12.5 העוברי Murine מתואר. תרבויות פרוסה organotypic ניתן להשתמש כדי לבחון את התנהגות של נוירונים דופאמינרגיים או נוירונים המוח התיכון הגחון.

פורסים תרבויות Organotypic של המוח התיכון הגחון עובריים: מערכת מחקר ופיתוח עצבי דופאמין במבחנה</em

סרטון זה מדגים שיטה להכנת תרביות פרוסות היפוקמפוס אורגנוטיפיות ממוחו של גור חולדות. הוא מתאר את השלבים הכרוכים בנתיחת ההיפוקמפוס, החיתוך ותנאי התרבית הדרושים לקידום קיום התאים וצמיחתם בפרוסות ההיפוקמפוס, ובסופו של דבר ליצירת תרביות פרוסות אורגנוטיפיות.

הכנת תרביות פרוסות אורגנוטיפיות מההיפוקמפוס של גור חולדות

הסרטון מדגים שיטה להשגת פרוסות קליפת המוח-היפוקמפוס של קליפת המוח ממוחו של גור חולדות וטיפוחן בתוספות קרומיות בתוך צלחת מרובת בארות מלאה במדיה לניתוח נוסף.

הכנת פרוסות קליפת המוח-היפוקמפוס של קליפת המוח של עכברוש

מתוארת טכניקה לחקר תאי NG2 ואוליגודנדרוציטים באמצעות מערכת תרבית פרוסות של המוח הקדמי והמוח הקטן.  שיטה זו מאפשרת לבחון את הדינמיקה של התפשטות והתמיינות של תאים בתוך שושלת האוליגודנדרוציטים שבה ניתן לתפעל בקלות את הסביבה החוץ-תאית תוך שמירה על ציטו-ארכיטקטורת רקמות.

תרבויות Organotypic Slice ללמוד oligodendrocyte Dynamics וmyelination

כאן אנו מתארים טכניקה ללימוד neurogenesis לאחר הלידה בהיפוקמפוס באמצעות טכניקת התרבות הפרוסה organotypic. שיטה זו מאפשרת למניפולציה במבחנה של neurogenesis למבוגרים ומאפשרת היישום הישיר של סוכנים תרופתיים להיפוקמפוס התרבותי.

תרבויות Organotypic Slice ללימודים של אחרי לידה נוירוגנזה

אנו מתארים פרוטוקול עבור ביטוי מסוים בסוג תא של החיישן מקודד גנטית המבוסס על החיישנים ATeam 1.03ימק בתרבויות הפרוסות של העכבר הקדמי. יתר על כן, אנו מראים כיצד להשתמש בחיישן זה עבור הדמיה דינמית של רמות ATP סלולריים בנוירונים ו astrocytes.

הדמיה של ATP תאיים בפרוסות רקמה אורגנותית של המוח העכבר באמצעות חיישן מבוסס-הסריג ATeam 1.03ימק

כאן, אנו מתארים את הכנת פרוסות אורגנוטיפיק קליפת המוח הריאנלית-היפוקמפוס. תחת קיפוח הדרגתי ומבוקר של סרום, פרוסות אלה מתארות אירועים מתפתחים דמויי אפילפטיים ויכולים להיחשב מודל אקס ויוו של אפילפטוגנזה. מערכת זו מייצגת כלי מצוין לניטור הדינמיקה של פעילות ספונטנית, כמו גם להערכת ההתקדמות של תכונות נוירואינפלמטוריות לאורך כל מהלך אפילפטוגנזה.

מודל של אפילפטוגנזה בתרבויות פרוסות קליפת המוח-היפוקמפוס של רינאל קליפת המוח

למדו כיצד לבצע תרבות פרוסות אורגנוטיפית של מוחות עכברוש בגיל E18 באמצעות אגרוז נמס וויברטום. שיטה זו מאפשרת חקר פיתוח קורטיקלי ומיגרציה נוירונלית במעבדה.

פורסים תרבות Organotypic של E18 מוח החולדה

גלה סרטונים נוספים