Name: Titel Cell Encapsulation door Droplets (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-01T13:09:54.000+00:00
Duration: 13 min 10 s
Description: Leer celinkapseling door druppels voor 3D-bioprinting met behulp van een solenoïdeklep en drukgestuurde ejectie. Deze methode ondersteunt onderzoek naar levensvatbaarheid van cellen in weefseltechniek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

NIH3T3 cellen voorbereiding: A. Cellen voor Ejection <ol><li> Trypsinize cellen, dan verdunnen 1:1 met cel-media, en de transfer van een T75 kolf met een 15 ml Falcon buis </li><li> Spin down cellen in een pellet door centrifugeren, aspireren supernatant en wassen cellen met DPBS </li><li> Spin down cellen in een pellet weer, en zuig supernatans </li><li> Resuspendeer cellen in de media </li><li> Bepaal celdichtheid met hemocytometer (~ 200 X 10 4 cellen / ml per fles T75) </li><li> Centrifuge cel oplossing, aspireren supernatant, en resuspendeer in de juiste hoeveelheid media voor uiteenlopende celconcentraties </li></ol> B. Cel uitwerpen <ol><li> Vortex cellen voordat u voor het uitwerpen </li><li> Overdracht 200 pi van de cel oplossing in de spuit </li><li> Zet juiste modus op pulsgenerator <ol><li> Voor het uitwerpen van een enkele druppels en meerdere druppels (uitbarstingen), ingesteld pulsgenerator &quot;E. BUR&quot;-modus </li><li> Voor continue druppel uitwerpen, stelt pulsgenerator op &quot;NORM&quot;-modus </li></ol></li><li> Veranderen signaal instellingen <ol><li> Stel hoog niveau en laag niveau uitgangsspanning: HIL tot 5 V en LOL op 0 V en zorg ervoor dat de &quot;LIM&quot; LED is op </li><li> Stel signaal als een vierkant puls </li><li> Wijzig de hoeveelheid tijd die de magneetklep staat open voor druppel het uitwerpen door het veranderen van de waarde voor &quot;WID&quot; of veranderen duty cycle (&quot;DUTY&quot;) </li><li> Verander de frequentie van de uitwerpen door het veranderen van de waarde voor &quot;PER&quot; </li><li> Wijzig het aantal druppels uitgestoten in een uitbarsting door het veranderen van de waarde voor &quot;BUR&quot; </li></ol></li><li> Eject cel oplossing op voorbereide ondergrond voor beeldvorming met een microscoop </li></ol> C. kleuring <ol><li> Make-up dye-oplossing met 0,5 pi calceïne-AM en 2 pl ethidium homodimeer per ml DPBS </li><li> Dompel bereid substraat in kleurstofoplossing </li><li> Laat monster gedurende 10 minuten incuberen bij 37 ° C voor imaging </li></ol> Experiment Validatie <ol><li> Op een Nikon Eclipse TE-2000 U fluorescentiemicroscoop <ol><li> Spot geavanceerde software (Diagnostics, Inc) </li><li> Live / Dead Assay </li></ol></li></ol>

De auteurs hebben niets te melden.

<table><tbody><tr><td>Fluorescentiemicroscoop</td><td></td><td>Nikon Instruments</td><td>Eclipse TE-2000 U</td><td></td></tr><tr><td>Solenoidklep-celejector</td><td></td><td></td><td></td><td>Bedieningsfrequentie: 1 KHz, 30psi, 50nl~0.5ul. 12V klepaandrijver: 2,5 Amp aanstuurstroom</td></tr><tr><td>Draagbare luchttank van 5 gallon</td><td></td><td>Coleman</td><td>Powermate CT5</td><td>Perslucht: 30 PSI </td></tr><tr><td>Drukregelaars</td><td></td><td>Marsh Bellofram</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pulsgenerator</td><td></td><td></td><td>HP8112A</td><td>Activeringsfrequentiegeneratie: 50 MHz</td></tr><tr><td>XYZ-tafel</td><td></td><td>Newmark Systems</td><td></td><td>Met stappenmotor: xy-tafel met 6 inch bereik (NLS4-6-25), z-tafel met 2,5 inch bereik (NLS4-2.5-25), 3-assige controller (NSC-G3), 0,1um resolutie</td></tr><tr><td>NIH 3T3</td><td>Cellijn</td><td></td><td></td><td>fibroblasten</td></tr><tr><td>Trypsine</td><td></td><td></td><td></td><td>0,05% oplossing</td></tr><tr><td>NIH 3T3 celmedium</td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Buffer</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>T75</td><td></td><td></td><td></td><td>Weefselkweekflessen</td></tr><tr><td>Plastic conische buisjes</td><td></td><td></td><td></td><td>15 ml, voor weefselkweek</td></tr></tbody></table>

titel cell encapsulation door droplets

Title Cell Encapsulation by Droplets

Titel Cell Encapsulation door Droplets

Mijn naam is Hang Moon. Ik werk samen met de professor condomen. Hij en ik werken met de XYJ-tafel om een 3D-structuur van cellen te maken.Hallo, ik ben PE en Lynn en ik werk aan het celprintproject met celencapsulatie, media en gels. Dit is de solenoïde voor de ejectie van een cel- en celmengsel van aros over celmedium. De solenoïdeklep wordt geactiveerd door twee signaallijnen.De signaallijn komt hier van een droge printplaat. Het signaal komt hiervandaan. Via die lijn loopt het signaal naar de eerste functiegenerator.Ten eerste wordt deze gegenereerd via onze geprogrammeerde methode. Als u de puls wilt wijzigen, kunt u het programma aanpassen via de schakellijn of het proces via de computer aansturen. De cellulaire klep wordt geopend en gesloten door een elektrisch signaal, maar de cel wordt via die lijn gevoed.De cellen en het medium of de agrogel worden via de spuiten toegediend. De spuiten bevinden zich in het water; de inhoud van de spuit wordt door lucht voortgestuwd. De perslucht wordt geleverd vanuit een tank via de leiding, zoals hier te zien is.De luchtstroom stroomt via de leiding door het luchtfilter. Het luchtfilter scheidt het stof en andere soorten vuil. De drukgen

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

We presenteren protocollen voor de 3-dimensionale (3D) het inkapselen van de cellen binnen synthetische hydrogels. De inkapseling procedure is beschreven voor de twee meest gebruikte methodes van verknoping (michael-type naast en licht geïnitieerde vrije radicalen mechanismen), evenals een aantal technieken voor het beoordelen van ingekapselde cel gedrag.

Cellulaire Encapsulation in 3D Hydrogelen voor Tissue Engineering

De combinatie van monodisperse druppel generatie met traagheid ordening van cellen en deeltjes, beschrijven we een methode om een ​​gewenst aantal cellen of deeltjes in te kapselen in een enkele druppel op kHz tarieven. We laten zien efficiëntie twee maal groter dan die van niet-geordende inkapseling voor enkel-en dubbel-deeltje druppels.

High Throughput Single-cel en Multiple-cel Micro-encapsulatie

This video demonstrates a technique for immunostaining cells encapsulated in a 3D hydrogel. The hydrogel culture containing neural progenitor cells is fixed, permeabilized, and treated with a blocking solution to prevent non-specific immunostaining. A primary antibody cocktail is added to bind specific proteins, followed by fluorescently labeled secondary antibodies and a nuclear stain. The sample is then mounted on a slide and observed under a confocal microscope.

Immunostaining of Cells Encapsulated in a 3D Hydrogel System

Deze video en manuscript beschrijven een emulsie gebaseerde methode om zoogdiercellen in 0,5% tot 10% alginaatkralen te inkapselen die in grote batches kunnen worden geproduceerd onder gebruikmaking van een eenvoudig geroerd vat. De ingekapselde cellen kunnen in vitro worden gekweekt of getransplanteerd voor toepassingen op het gebied van cellotherapie.

Zoogdiercelcapsulatie in Alginaatkralen Met Een Eenvoudig Verrijkt Vaartuig

Dit artikel presenteert een protocol voor het zaaien van schaarse bevolking van cellen gebruikt pipet-tips om druppel microfluidic apparaten ten behoeve van hogere efficiëntie van de inkapseling van cellen in druppeltjes.

Een pipet-Tip gebaseerde methode voor Seeding cellen Droplet Microfluidic Platforms

Hier gepresenteerd is een protocol voor het gebruik van alginaat als een polymeer in micro-inkapseling van vereeuwigde cellen voor langdurige levering van biologische producten aan knaagdierogen.

Ingekapselde celtechnologie voor de levering van biologics aan het muisoog

Water-in-olie druppels testen zijn nuttig voor analytische chemie, enzymevolutie en eencellige analyse, maar vereisen meestal microfluïdica om de druppels te vormen. Hier beschrijven we deeltjessjabloonemulgering, een microfluïdische benadering om druppeltests uit te voeren.

Deeltjessjabloonemulgering maakt microfluïdische druppeltests mogelijk

Dit artikel beschrijft de inkapseling van menselijke pluripotente stamcellen (hPSC's) met behulp van een co-axiale stroomfocusapparaat. We tonen aan dat deze microfluïdische inkapselingstechnologie een efficiënte vorming van hPSC-sferoïden mogelijk maakt.

Microfluïdische fabricage van core-shell microcapsules met menselijke pluripotente stamcelsferoïden

Dit artikel introduceert een eenvoudige methode voor snelle productie van gigantische unilamellaire blaasjes met ingekapselde cytoskeletale eiwitten. De methode blijkt nuttig te zijn voor bottom-up reconstitutie van cytoskeletstructuren in opsluiting en cytoskelet-membraaninteracties.

Snelle inkapseling van gereconstitueerd cytoskelet in gigantische unilamellaire blaasjes

Dit artikel presenteert een fabricageprotocol voor een nieuw type kweeksubstraat met honderden microcontainers per mm2, waarin organoïden kunnen worden gekweekt en waargenomen met behulp van microscopie met hoge resolutie. De protocollen voor het zaaien en immunostainen van cellen zijn ook gedetailleerd.

Een high-throughput platform voor cultuur en 3D-beeldvorming van organoïden

Deze beginnershandleiding presenteert een algemeen protocol voor de bereiding van Giant Unilamellaire blaasjes (GUV's) via de druppeloverdrachtsmethode, bespreekt de kritieke stappen en biedt inzichten om mogelijke aanpassingen te helpen die nodig zijn voor verschillende toepassingen, waaronder synthetische biologie en microrobotica.

De druppeloverdrachtsmethode gebruiken om op betrouwbare wijze gigantische unilamellaire blaasjes te bereiden

Leer celinkapseling door druppels voor 3D-bioprinting met behulp van een solenoïdeklep en drukgestuurde ejectie. Deze methode ondersteunt onderzoek naar levensvatbaarheid van cellen in weefseltechniek.

Titel Cell Encapsulation door Droplets

Meer video's verkennen