Name: Zebrafish 배아 골격근의 레이저 쏜 부상 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-01-30T12:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 13 s
Description: 배우세요 제브라피쉬 배아 골격근에 레이저를 이용한 정밀 손상 유도 방법을 통해 근육 재생 과정을 연구하는 기술입니다. 유전자 표지 세포 추적과 공초점 현미경 분석으로 재생 메커니즘을 규명합니다.

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우리는 기술적 인 도움과 조언을 밥 Nowak (ANDOR 기술)을 감사드립니다. SA-S. 독일 Forschungsgemeinschaft (DFG)의 하이젠 베르크 친목에 의해 지원됩니다. 이 작품은 기금 SE2016/7-1을 DFG의 지원을했습니다.

1. 단일 셀 라벨 β-고를 프로모터의 조절하에 플라스미드 인코딩 GFP 또는 GFP-융합 단백질과 함께 한 세포 단계 배아를 삽입. 개발 과정, GFP는 다음 모자이크 방식으로 표현된다. 여기, 우리는 사용 된 유전자 변형 구조 TG [β-고를 : α-actinin-GFP], 그 β-고를 프로모터의 제어에 따라 α-Actinin-GFP 융합 단백질을 남깁니다.에게 2. 배아 퍼가기 <ol class="lalpha"><li> zebrafish의 배아를 수집 및 28 hpf (준비는 12에 따라)까지 정상적인 조건에서 유지합니다. </li><li> 포셉 (뒤몽 # 5)으로 stereomicroscope에 따라 Dechorionate 배아. </li><li> 석유 젤리 링과 현미경 슬라이드를 준비합니다. </li><li> 1 %의 낮은 녹는 점 아가로 오스 / E3 매체가 10% tricaine 솔루션 준비 : 액체와 균일 한 아가로 오스 솔루션을 얻기 위해 10 ML E3 솔루션에 종기가 100 MG 아가로 오스를, 나누어지는 및 매장자세한 사용을위한 -20 ° C에서 사용하지 않는 아가로 오스 솔루션입니다. 즉시 사용을 위해, 삶은 솔루션은 냉각과 맥스를 유지 보자. 39 ° C. 10% tricaine의 최종 농도를 얻기 위해 tricaine 주식 솔루션을 추가합니다. tricaine와 아가로 오스는 모두 배아 움직임을 방지하기 위해 필요합니다. </li><li> 배아은 옆에 자연스럽게 놓고와 함께, 1 % 석유 젤리 링에서 낮은 용융 아가로 오스 / 10 % tricaine / E3 매체에 하나의 배아를 삽입, 부드럽게 제자리에 배아를 유지하고 볼록을 피하기 위해 coverslip으로 커버 빛을 깰 것이다 표면. 이상적으로, 타겟팅됩니다 배아 근육 조직은 coverslip을 터치해야합니다. </li></ol> 3. 태아 레이저 남긴 상처 <ol class="lalpha"><li> micropoint 레이저와 현미경을 준비 : <ol class="lroman"><li> 현미경과 함께 설정하고 레이저를 사용하는 방법에 대한 자세한 내용은 micropoint 레이저 설명서를 참조하십시오. </li><li> 올바른을 선택435 nm의 파장 레이저 빔의 생성을위한 염료. </li><li> 감쇠 슬라이더를 사용하여 레이저 파워를 조정합니다. 레이저 전원은 단일 펄스 (이 테스트 샘플의 coverslip에 예를 들면 초점)로 유리 표면을 아프게 할 수있을 정도로 회복이 있어야합니다. 이 세포 절제에 필요한 레이저 파워입니다. </li></ol></li><li> 현미경의 접안 렌즈에 설치된 reticle을 사용하여 관심있는 지역이나 셀에 초점을 맞 춥니 다. 20x 목표를 (40x 더 정확한 손상을 수 있지만, 종종 작동 거리가 렌즈에 충분하지 않습니다)를 사용하십시오. </li></ol> 주 1 : 레이저는 초점 비행기 내에서 세포를 손상뿐만 아니라, 위의 셀과 레이저 빔 내에있는 아래에되지 않습니다. 레이저가 최적으로 설정하고 Z 축에서 최대 초점을 조정하는 실험을하기 전에 있는지 확인합니다. 그것은 알기 위해 실험을 수행하기 전에 레이저 부상의 깊이를 결정하는 가장 적합한 셀s이 (가) 정확히 부상 될 것입니다. <ol class="lalpha" start="3"><li> 휘황 - 라벨 세포를 타겟으로하는 경우 정상적인 사용, 또는 형광에 대한 brightfield : 실험을 시각화에 필요한 빛을 설정합니다. </li><li> 부상 원하는 정도에 따라 대상 지역 또는 여러 펄스에 레이저 빛의 펄스를 보냅니다. </li></ol> 4. 남긴 상처 및 복구 분석 <ol class="lalpha"><li> 원하는 경우, 레이저 부상의 절차는 라이브 (예 : Metamorph 소프트웨어의 스트림 인수 옵션을 사용) 6.를 기록 할 수 있습니다 </li><li> 즉시 남긴 상처 후, 배아는 포셉으로 아가로 오스에서 부드럽게 제거 및 복구에 달걀 물에 다시 배치해야합니다. </li></ol> 2 참고 : 근육질 활동 (수영 꿈틀) 골격근 복구를 위해 특히 중요합니다. 배아는 tricaine 노출과 치열한 아가로 오스 퍼가기 때문에 이동할 수 없습니다 때문에, recomme하지 않습니다너무 오래 슬라이드와 coverslip 사이의 배아을 유지하기 위해 nded. <ol class="lalpha" start="3"><li> 표시로 복구 후, 배아는 빛, 형광 또는 공 촛점 현미경에 의해 수정하고 원하는대로 분석 할 수 있습니다. </li></ol>

<ol><li>Charge, S. B., Rudnicki, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+and+molecular+regulation+of+muscle+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Rev%22%5BJournal%5D)">Cellular and molecular regulation of muscle regeneration.</a> Physiol. Rev. 84, 209-238 (2004).</li>
<li>Steffen, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+zebrafish+runzel+muscular+dystrophy+is+linked+to+the+titin+gene%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">The zebrafish runzel muscular dystrophy is linked to the titin gene.</a> Dev. Biol. 309, 180-192 (2007).</li>
<li>Bassett, D., Currie, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+a+zebrafish+model+of+muscular+dystrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Exp.+Pharmacol.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Identification of a zebrafish model of muscular dystrophy.</a> Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 31, 537-540 (2004).</li>
<li>Kawahara, G., Serafini, P. R., Myers, J. A., Alexander, M. S., Kunkel, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+zebrafish+dysferlin+by+morpholino+knockdown%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem.+Biophys.+Res.+Commun%22%5BJournal%5D)">Characterization of zebrafish dysferlin by morpholino knockdown.</a> Biochem. Biophys. Res. Commun. 413, 358-363 (2011).</li>
<li>Behra, M., Etard, C., Cousin, X., Strähle, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+zebrafish+mutants+to+identify+secondary+target+effects+of+acetylcholine+esterase+inhibitors%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol.+Sci%22%5BJournal%5D)">The use of zebrafish mutants to identify secondary target effects of acetylcholine esterase inhibitors.</a> Toxicol. Sci. 77, 325-333 (2004).</li>
<li>Otten, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xirp+proteins+mark+injured+skeletal+muscle+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Xirp proteins mark injured skeletal muscle in zebrafish.</a> PLoS One. 7, e31041(2012).</li>
<li>Roostalu, U., Strähle, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+imaging+of+molecular+interactions+at+damaged+sarcolemma%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Cell%22%5BJournal%5D)">In vivo imaging of molecular interactions at damaged sarcolemma.</a> Dev. Cell. 22, 515-529 (2012).</li>
<li>Stickney, H. L., Barresi, M. J., Devoto, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Somite+development+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Dyn%22%5BJournal%5D)">Somite development in zebrafish.</a> Dev. Dyn. 219, 287-303 (2000).</li>
<li>Stellabotte, F., Dobbs-McAuliffe, B., Fernandez, D. A., Feng, X., Devoto, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+somite+cell+rearrangements+lead+to+distinct+waves+of+myotome+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Dynamic somite cell rearrangements lead to distinct waves of myotome growth.</a> Development. 134, 1253-1257 (2007).</li>
<li>Choi, W. Y., Poss, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Top.+Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">Cardiac regeneration.</a> Curr. Top. Dev. Biol. 100, 319-344 (2012).</li>
<li>Stewart, S., Stankunas, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Limited+dedifferentiation+provides+replacement+tissue+during+zebrafish+fin+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">Limited dedifferentiation provides replacement tissue during zebrafish fin regeneration.</a> Dev. Biol. 365, 339-349 (2012).</li>
<li>Kimmel, C. B., Ballard, W. W., Kimmel, S. R., Ullmann, B., Schilling, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stages+of+embryonic+development+of+the+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Dyn%22%5BJournal%5D)">Stages of embryonic development of the zebrafish.</a> Dev. Dyn. , 203-253 (1995).</li>
</ol>

관심 없음 충돌이 선언 없습니다.

레이저로 인한 손상은 zebrafish 배아의 제어 조건 하에서 재생을 연구하기 위해 셀을 흡열하여 원하는 크기의 상처를 가하는위한 강력한 방법입니다. 특히, 세포는 정확하게 타겟팅 할 수 있습니다 (그림 2)와 상해 지역뿐만 아니라 타이밍이 모두 제어 할 수 있습니다. 그 후, 부상 사이트 및 재생 프로세스는 쉽게, 모니터링 기록 (그림 3) 및 (그림 1) 분석됩니다. 레이저 잘 X 축, Y 축에 초점이 맞추어 져 있지만 그러나 그것은 완전히 Z 축에 초점을 맞추고 있지 않습니다. 이 관심의 셀 아래에 이상에 위치한 세포에 손상을 줄 수 있습니다. 그럼에도 불구하고, 이러한 방식은 근육 수리 생체 조사에서의 광대 한 필드를 열어 준다.

<table border="1"><tbody><tr><td> 가열 블록 </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 짝 # 5 포셉 </td><td> 뒤몽 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 유리 슬라이드 </td><td> Menzel </td><td></td><td> 76 X 26mm </td></tr><tr><td> Coverslips </td><td> 로스 </td><td></td><td> 50 X 24mm # 1 </td></tr><tr><td> 석유 젤리 </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Stereomicroscope </td><td> Leica </td><td></td><td> MZFLIII </td></tr><tr><td> Micropoint 레이저 </td><td> ANDOR 기술 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 형광 현미경 </td><td> Zeiss </td><td></td><td> Axioplan II </td></tr><tr><td> Metamorph 소프트웨어 </td><td> 분자 장치 </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> 시약 <ul><li> 낮은 녹는 점 아가로 오스 (# 50081,Lonza) </li><li> Tricaine 재고 솔루션 : 400 밀리그램 Tricaine (# A-5040, 시그마 - 알드리치) / 100 ML DH 2 O pH를 9.0 </li><li> E3 중간 (5 MM NaCl, 0.17 MM KCl, 0.33 MM CaCl 2, 0.33 MM MgSO 4) </li></ul></td></tr></tbody></table>

zebrafish 배아 골격근의 레이저 쏜 부상

Laser-inflicted Injury of Zebrafish Embryonic Skeletal Muscle

다양한 실험 방법은 손쥐 근육 영양 장애 모델도 myotoxin 주사 (bupivacaine, cardiotoxin 또는 notexin), 근육 transplantations (denervation-devascularization 유도 재생), 집중적 인 운동을 포함하여 근육 재생을 연구하는 목적으로 근육 부상을 유발하기 위해 마우스를 사용하지만, 한 MDX 마우스 (이 방법의 검토 1 참조) 등. zebrafish에서 유전자 접근법은 근육의 영양 장애의 phenotypes (예 : runzel 2 sapje 3 등) 전시 및 영양 장애 - 관련 유전자의 표현 4 차단 oligonucleotide morpholinos를 안티센스 돌연변이가 포함되어 있습니다. 또, 화학 접근함으로써 결국 근육 영양 장애 5 연결 hypercontraction, 그 결과도 Galanthamine, 화학 화합물 억제 acetylcholinesterase와 예 가능합니다. 그러나, 유전 및 약리 접근 g물리적으로 입은 부상의 정도가보다 쉽게 spatially과 시간적으로 한 통제하는 반면 enerally, 개인 내의 모든 근육에 영향을 미칩니다. 현지화 신체적 부상은 내부 통제 등의 contralateral 근육 평가를 할 수 있습니다. 다른 그룹은 최근 매우 로컬 개별 배아 zebrafish 근육의 플라즈마 막에 손상을하기 위해 두 광자 레이저 (822 nm 정도)의 사용을보고하면서 실제로, 우리는 최근 zebrafish 배아 6 골격근 재생을 공부하는 레이저로 인한 세포 절개를 사용 세포 7. 여기, 우리는 zebrafish 배아의 골격근 세포 손상에 대한 micropoint 레이저 (ANDOR 기술)를 사용하는 방법을보고합니다. micropoint 레이저는 435 nm의 파장을 대상으로 휴대 절제에 적합한 고 에너지 레이저입니다. 레이저는 현미경이 동일한 시간 F에서 사용할 수있는 방식으로 (우리의 설치, Zeiss의 광학 현미경)을 현미경에 연결되어또는 샘플에와 남긴 상처 (brightfield 또는 형광)의 효과를 시각화를위한 레이저 빛을 초점을 맞추고. 레이저 펄스를 제어하기위한 매개 변수 파장, 강도, 그리고 펄스의 수를 포함합니다. 의 투명성과 외부 배아 발달로 인해, zebrafish 배아는 레이저 유도 부상 및 모두 후속 복구를 공부 높은 의무가 있습니다. 1 ~ 2 일 후 수정을, somitic 골격근 세포는 점차적으로 꼬리 8, 9 트렁크에서 somitogenesis의 진행으로 인해 뒤쪽하기 위해 앞의 성숙을 받고있다. 이 단계에서 배아는 자발적으로 경련과 수영을 시작합니다. zebrafish는 최근 성인 zebrafish 10, 11 부상 후 다시 생성 할 수 있습니다 조직의 여러 유형 (등 혈관, neuronal, 심장)으로, 조직 재생 연구의 중요한 척추 모델 생물체로 인식되었습니다.

레이저로 인한 부상은 고정 일일 된 배아에서 수행되었다. 그림 1에 도시 된 바와 같이, 몇 레이저 펄스는 일반적으로 체절 경계 사이에 뻗어있는 손상된, 코일, 고를 풍부한 myofibrils로 쉽게 알아볼 수, 작은 상처를 생성 할 수 있습니다. 레이저 펄스의 더 많은 그러나 대부분의 myofibrils이 파괴되어 크게 손상 체절 블록에서 발생합니다. 그럼에도 불구하고, 우리는 그대로 큰 사람보다 더 빨리 회복 작은 부상으로, &quot;시간이 모든 상처를 치유&quot;라고 볼 수 있습니다. 복구 후, 고를의 stainings는 myofibrils가 다시 정상적으로 체절에 걸쳐 것을 보여하지만, 추가 정보가 Xirp1에 얼룩으로 얻은 수 있습니다. Xirp1 단백질 그것이 ectopically 이전에 부상을 근육 세포 6 시간 내에 myofibrils를 복구 함께 지역화로 부상 및 복구가 발생한 곳을 검출하기위한 좋은 표시입니다. <p class="jove_conte...

여기에 제시된 방법은 고 에너지 레이저 펄스와 시간을 통해 이러한 부상과 회복의 후속 분석 라이브 zebrafish 배아의 정확한 부상을 포함한다. 우리는 또한 유전자 하나의 표시 또는 골격근 세포의 그룹이 동안 레이저 광 유도 손상 후 추적 할 수있는 방법을 보여줍니다.

Zebrafish 배아 골격근의 레이저 쏜 부상

근육 재생 연구를 목적으로 마우스에서 근육 손상을 유도하기 위해 마이오톡신(myotoxin) 주입을 포함한 다양한 실험적 접근법이 사용되어 왔습니다...

이 실험 절차의 전체적인 목표는 근육 재생 과정을 연구하기 위해 제브라피쉬 배아 골격근에 정밀하게 제어된 손상을 유도하는 것입니다. 이는 먼저 단일 골격근 세포를 모자이크 방식으로 유전적으로 표지함으로써 수행됩니다. 그다음, 선택된 배아를 trica가 포함된 agarose와 함께 슬라이드에 매립합니다.그 다음 배아를 현미경 아래에 두고 마이크로 포인트 레이저를 사용하여 표적 근육 세포에 손상을 줍니다. 마지막으로, 배아를 아가로스 겔에서 제거하여 정해진 시간 동안 회복시킵니다. 최종적으로, 레이저 손상 후 공초점 현미경 관찰을 통해 근섬유 조직의 변화를 보여주는 결과를 얻을 수 있습니다.오늘 저희가 소개할 방법은 근육 재생 분야와 관련이 있지만, 지느러미 재생이나 제브라피쉬와 같은 다른 재생 패러다임에도 적용될 수 있습니다. 세포를 표지하기 위해, 보편적 프로모터 또는 세포 유형 특이적 프로모터의 제어를 받는 GFP 또는 임의의 GFP 융합 단백질을 인코딩하는 플라스미드를 단세포 단계의 배아에 주입합니다. 그러면 발달 과정 동안 조직 내에서 GFP가 모자이크 형태로 발현됩니다. 이 예시에서는, 주입된 플라스미드가 단일 근육 세포에서 GFP 형태의 alpha actin을 발현하도록 유도합니다.beta actin 프로모터의 제어 하에 수정 후 28시간까지 배아를 배양합니다. 다음으로, actinin을 검출하기 위한 형광 램프가 장착된 해부 현미경 하에서 GFP 클론을 확인하며 핀셋을 사용하여 배아를 코팅합니다. E three 배지 10mL에 agros 100mg을 넣고 끓여 1% 저융점 agros 10% trica 용액을 E three 배지로 제조합니다.용액을 39°C까지 식힌 후 trica를 최종 농도 10%가 되도록 첨가합니다. 그다음 바셀린 링이 있는 현미경 슬라이드를 준비합니다. 현미경 하에서 바셀린 링에 저융점 agro 용액을 넣은 후, 바셀린 링 내부의 저융점 agro 내에 배아 하나를 매립합니다. 커버 슬립으로 배아를 부드럽게 덮고, 완벽한 측면 관찰을 위해 커버 슬립과 평행하게 배치합니다.마이크로 포인트 레이저를 준비하려면, 레이저의 설정 및 사용 방법에 대한 자세한 지침이 담긴 마이크로 포인트 레이저 매뉴얼을 참조하십시오. 현미경과 연결하여, 435 nanometer 파장의 레이저 빔을 생성하기 위해 CUMERIN four 40 레이저 염료를 선택하십시오. 감쇠 슬라이더를 사용하여 레이저 출력을 조

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Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

인간의 급성 신장 상해 (아키)는 신장 nephrons을 구성하는 상피 세포 손상으로 인한 일반적인 임상 문제, 그리고 아키는 50~70% 1 높은 사망률 속도와 연결되어 있습니다. 이 현상을 안내하는 메커니즘과 한계가 제대로 이해 남아 있지만 상피 세포의 파괴에 따라 nephrons은 재생에 제한 기능이 있습니다. 이 비디오를 문서에서, 우리는 타겟 레이저 zebrafish 배아 신장의 신장 nephron 세포의 박리 또는 pronephros위한 기술을 설명합니다. 새로운 방법은 아키의 nephrotoxicity 유도된 모델을 보완하고 신장 nephron의 상피 조직이 재생된과 관련된 세포 및 분자 변경의 고해상도 이해하는 데 사용할 수 있습니다.

Zebrafish의 Pronephros의 레이저 절제는 신장 상피 조직이 재생된를 공부

이 비디오는 두 개의 광자 레이저 축삭 절개술을 사용하여 제브라피시 배아에서 축삭을 손상시키고 손상으로부터 축삭 회복을 관찰하는 방법을 설명합니다.

이광자 레이저 축삭 절개술: 제브라피시 배아에서 축삭을 손상시키고 축삭 회복을 관찰하는 방법

이 비디오는 레이저 손상을 사용하여 성인 제브라피시의 망막 변성을 유도하는 절차를 보여줍니다. 레이저는 망막의 광수용체 세포를 표적으로 삼아 세포 사멸과 퇴행성 과정을 유발합니다. 이 손상은 뮐러 신경교세포(MG) 세포를 활성화하여 망막 재생을 돕는 줄기세포 전구세포로 역분화시킵니다.

Targeting Retinal Degeneration and Regeneration in Zebrafish Using a Focal Laser Injury(초점 레이저 손상을 사용한 제브라피시의 망막 퇴행 및 재생 모델링)

출처: Morsch, M.,   et. al., Triggering cell stress and death Using Conventional UV Laser Confocal Microscopy. J. Vis. 특급. (2017) 이 비디오에서는 형질전환 제브라피시의 개별 뉴런을 정확하게 표적화하고 연구하기 위한 고강도 UV 레이저 절제 기술을 살펴봅니다. 우리는 신경 반응을 준비하고, 고정하고, 시각화하는 방법을 보여주며, 부상과 회복의 세포 역학을 강조합니다.

컨포칼 현미경을 사용한 제브라피시 유충의 선택적 단일 뉴런 레이저 절제

말초 신경계 (PNS)가 부상 후 중요한 수리 할 수​​ 있지만, 거의가이 현상을 제어하는​​ 세포 및 분자 메커니즘에 대해 잘 알려져 있습니다. 라이브 형질 전환 제브라 피쉬와 재현 신경 절개 분석하여, 우리는 신경 변성과 재생 중에 동적 아교 세포의 행동을 공부할 수 있습니다.

모터 신경 절개와 라이브 제브라 피쉬의 아교 세포 행동의 시간 경과 영상

이 기사는 제브라피시 배아에서 기계적 혈관 손상을 일으키는 방법을 설명합니다. 이 부상 모델은 실시간 현미경 검사에 이상적으로 적합한 유기체에서 지혈, 부상 관련 염증 및 상처 치유를 연구하기 위한 플랫폼을 제공합니다.

Zebrafish의 태아에서 기계 선박 부상

Zebrafish는 척추 동물의 망막 변성/중생의 메커니즘 연구 인기 동물 모델입니다. 이 프로토콜에서는 내부 망막에 최소한의 손상으로 외부 망막을 방해 하는 지역화 된 상해를 유도 하는 방법을 설명 합니다. 망막 형태학 및 망막 재생 내내 뮐러 명과 응답 이후, vivo에서 모니터링합니다.

레이저 유도 된 망막 변성 및 재생 Zebrafish 모델 뮐러 명과 셀 활성화

레이저 절제는 생물학적 시스템의 재생을 연구하는 데 널리 적용되는 기술입니다. 제시된 프로토콜은 제브라피시 측면에서 신경마비 세포를 재생시키는 레이저 절제 및 후속 시간 경과 화상 진찰을 위한 표준 레이저 스캐닝 공초점 현미경의 사용을 설명합니다.

제브라피시 간 신경종 세포의 공초점 현미경 기반 레이저 절제 및 재생 분석

본 프로토콜은 유충 취급을 위한 자동화된 미세유체 플랫폼과 결합된 레이저 병변 시스템을 사용하여 제브라피쉬 유충에서 조직 특이적이고 재현성이 높은 부상을 유도하는 방법을 기술한다.

제브라피쉬 유충의 척수 재생 연구를위한 제어 된 반자동 레이저 유도 부상

이 프로토콜은 성인 제브라피쉬에서 여러 꼬리 근소체의 심각한 손상을 유도하는 냉동 손상 모델을 설명합니다. 이 방법은 비포유류 척추동물에서 심각한 조직 손실 후 골격근 재생을 연구하기 위한 새로운 접근 방식을 제공합니다.

성인 제브라피쉬에서 꼬리 꽃자루의 골격근 재생을 연구하기 위한 냉동 손상 모델

이 프로토콜은 제브라피시 유충에서 수행된 이광자 레이저 절제 접근법을 설명하며, 이는 뼈 재생과 절제에 대한 면역 반응의 효과를 연구하기 위한 모델 역할을 합니다.

발달 중인 제브라피시 유충에서 조골세포의 Two-photon 레이저 매개 절제

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