Name: 기본 종양 및 / 또는 전임상에 대한 관련 전이 및 치료제의 임상 개발의 전 생체 치료 응답 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-10-02T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 29 s
Description: 학습하세요 종양 미세환경을 보존한 채 약물 반응을 평가하는 ex vivo 조직 절단 기법을 통해 암 치료제 개발 및 맞춤형 의학 연구를 지원하는 방법을 확인하세요.

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저자는 MSKCC 조직 조달 서비스 팀(TPS), 특히 Maria Corazon Mariano, Priscilla McNeil, Anas Idelbi, Daniel Navarrete 및 Katrina Allen에게 이 프로젝트를 성공적으로 추진하기 위한 모든 노력과 5 R21 CA158609-02 및 Conquer Cancer Foundation 및 Breast Cancer Research Foundation의 자금 지원에 감사드립니다. 또한, 저자는 이 원고를 제출할 수 있도록 지원해 준 Office of Research and Project Administration, Office of Technology Development, Research Outreach and Compliance 및 RTM Information Systems Support의 부사장인 Eric Cottington 박사에게 감사의 뜻을 전합니다.

참고 : 환자 조직 조달이 제도적 검토위원회 (IRB)를 통해 권한이 부여 된 기념 슬로안 케터링 암 센터에서 Biospecimen 및 임상 프로토콜 (프로토콜 번호는 각각 09-121 및 11-041을) -approved. 1 조직 조달 <ol><li> 환자의 기본 종양 / 전이 조달 참고 : 현재까지,이 프로토콜은 수술로 제거 췌장, 위 및 유방 종양 유형뿐만 아니라, 같은 림프종 전이에 수행되었습니다. <ol><li> 멸균 유출 방지 컨테이너 내의 밀봉 및 살균 누수 방지 플라스틱 시편 가방에 병리학 부서에 택배 또는 공압 튜브 시스템에 의해 표본을 제공하기 위해 외과 팀을 직접. 더 포르말린 고정액으로 신선한 상태의 시료를 수송 할 수있는 외과 팀을 직접. </li><li> 어느 것이 Inc의 멸균 기술을 사용하여 신선한 표본을 채취하기 위해 병리학 자 또는 병리학 지원을 직접층류 후드 멸균 장갑과 악기의 ludes 사용. </li><li> 수술의 완성에서 30 분에서 엄격하게 유지된다 조달 시료의 채취 시간을 기록한다. 냉 허혈을 고려하여 효과를 고려,&gt; 30 분 (18)의 감기 허혈성 시간 절제술에서 샘플을 채취하지 않습니다. </li><li> 무균 환경을 유지하기 위해 층류 후드에서 1.0 cm (3)에 약 0.5 cm (3)의 일차 종양 표본을 제거하는 병리학 부서 담당자 직접. 가능하면, 전위 프랭크 중앙 괴사 (세포 사멸)를 피하기 위해 인덱스 병변의 주변부로부터 종양 조직을 선택한다. 참고 : 괴사 조직은 다음 기준 중 하나에 의해 심하게 인식 할 수 있습니다 : 색상이나 조직의 창백 손실; 괴사 조직 부드럽고 무른 인 강도의 손실; 괴사 및 실행 가능한 조직 사이에 뚜렷한 경계. </li><li> pathologi 직접성 또는 병리학 보조 진단 평가를위한 종양의 즉각적인 샘플링 초과 후 (수술 폐기)에 주변 조직을 제공합니다. 약 5 ㎖의 1 % 항생제 (페니실린과 스트렙토 마이신)를 포함하는 최소 필수 미디어 (MEM)의 포함 된 15 ㎖의 멸균 원뿔 원심 분리 관에 시료를 놓습니다. </li><li> 사용 가능한 (예를 들어, 유방 절제 표본의 겨드랑이 꼬리 림프절)은 같은 크기 (0.5 cm 3 cm 3 내지 1.0)의 조잡한 포지티브 관련된 림프절 표본을 조달 일차 종양의 약물 반응과 비교하면. 일차 종양 표본 마찬가지로, 1 % 항생제 (페니실린 스트렙토 마이신)를 포함하는 약 5 ㎖의 최소 필수 매체 (MEM)의 함유를 15 ㎖의 멸균 원추형 원심 분리 튜브에 연결된 림프절 표본을 배치. </li><li> 만약 즉 수술 표본 허가 (예를 들어, 유방 절제 표본)을, (주 종양에서 먼) 제거의 정상 조직 샘플 (크기,약 5 ml의 전송만을 목적으로 1 %의 항생제를 함유하는 최소 필수 매체 (MEM)의 함유를 15 ㎖의 멸균 원추형 원심 분리 관에서 통상 고밀도 / 섬유질 유방 실질)​​ 및 장소. 실험실 시설 이전에 따라,에 cryovial, &#39;스냅&#39;동결 및 저장에 &#39;정상&#39;표본을 전송 -80 C의 냉동고 ° 향후 분자 분석을 위해. </li><li> 젖은 얼음에 모든 시편을 놓고 즉시 생체 신선한 조직 절편에 대한 실험실 공간으로 운반 할 것. 하지 부에게 정상적인 시료를 수행 아니라 미래의 분자 분석을위한 C의 냉동고 °에 -80 저장합니다. 미래의 분자 분석을 위해 -80 ° C의 냉동고에 cryovial, &#39;스냅&#39;동결 및 저장에 대한 기본 종양의 부분과 관련된 전이을 전송합니다. </li></ol></li><li> 임상 연구에서 조직의 조달 (예, 선택적 코어 생검 바늘 (CNB)) 참고 : 우리는 환자의 종양 조직을 얻을치료 시작 전 액세스 종양 전이 CNB을 거쳐 그들의 동의를 임상 프로토콜에 등록. CNBs는 현재까지 유방암, 한계 영역 림프종, 맨틀 세포 림프종, 전이성 paraganglioma, 자궁 경부 (편평 상피 세포) 및 난소 암 환자에서 수행되었다. <ol><li> 중재 방사선 또는 관련 부서로부터 임상 인력 함유 멸균 원추형 원심 분리 관을 전처리 코어 생검을 수행하고 15 ml의 시료를 배치 유무 약 5 ㎖의 1 % 항생제 (페니실린 스트렙토 마이신)을 함유하는 최소 필수 매체 (MEM)의. </li><li> 젖은 얼음에 생검 표본을 놓고 즉시 생체 신선한 조직 절편에 대한 실험실 공간으로 운반 할 것. </li></ol></li></ol> 단면 및 Vibratome 설정 재료의 2 준비 <ol><li> 단면 용 재료의 제조 <ol><li> AGA 4 g을 첨가하여 4 % 아가로 오스 용액을 만들기PBS 100 ㎖로 상승했다. 오토 클레이브 (주기 설정 : 액체, 121 ° C, 30 분, 평방 인치 당 15파운드)를 처음 사용할 경우, 사용하기 전에 솔루션을 제공합니다. 이후 용도를 위해, 아가로 오스는 RT에서 굳은 것을 염두에 각각 사용하기 전에 (30 초 간격으로 높은 열을) 액화 적절 ~ 25 ° C (즉, 따뜻한 터치)으로 냉각 전자 레인지에서 4 % 아가로 오스를 배치합니다. </li><li> 비 영구적 인 조직 내장 매체로 4 % 아가로 오스를 사용합니다. 4 %의 아가 로스를 충분히 냉각하고 무균 집게 매립 금형 티슈 시편을 넣고 4 % 아가 로즈 부어와 액체 상태 여전히 때. </li><li> 매립 금형의 절삭면의 벽에 직접 주변 조직 시료 (~ 2mm의 거리)를 배치 아니지만. 4 % 아가로 신속 고화하기 때문에 적절히 빠르게 조직 시편을 위치시킨다. 단면 동안 솔루션을 유지하기위한 55 ° C의 물을 욕조에 4 % 아가로 오스를 유지합니다. </li><li> 단면 분석 24 웰 플레이트에 1 ㎖의 O 추가각 웰에 F 완전한 미디어 (즉, MEM + 10 % 소 태아 혈청 + 1 % 항생제). 단면의 기간에 걸쳐 RT (~ 25 ° C)에서 24 웰 플레이트를 유지합니다. </li></ol></li><li> Vibratome 설정의 준비 <ol><li> 진동 마이크로톰을 사용하여, (10)에 칼날이 시험편에 접근하는 속도 [10 (2.5 mm / 초) 0 (0.00 mm / 초)]와 블레이드 [0 (0 Hz에서)의 주파수를 설정 (100 Hz에서) ]. 조직 (즉, 밀도 / 탄력)의 질감에 따라 설정을 조정합니다. </li><li> 침윤성 암의 주요 유방 종양의 경우, 각각 6, 3, 속도 및 주파수 설정을 조정합니다. 밀도가 낮은 / 회사 종양 조직의 경우, 속도가 감소하고 그에 따라 주파수를 증가시킨다. </li><li> (- 999 μm의 1) 기기의 범위 내에서 부분의 두께를 설정합니다. 이러한 분석의 경우, 200 μm의에서 단면 두께를 설정합니다. </li><li> 시험편 디스크 그쪽에 액상 접착제의 얇은 층을 사용하여 아가로 포매 표본 마운트t는 젖은 얼음에 쌌다 미디어의 저수지에 잠겨있다. </li></ol></li></ol> 3 조직 단면, 처리 및 분석 <ol><li> 즉시 전체 미디어의 1 ml의 멀티 웰 플레이트에서 멸균 포셉과 장소를 사용하여 단면에 정밀 슬라이스 섹션을 제거합니다. 충분한 부분이 상호 반응 및 분석을 위해 획득 될 때, 표준 조직 배양 조건 설정 조직 배양 인큐베이터에서 치료 반응을 위해 멀티 웰 플레이트를 배치했다. </li><li> 배양 아티팩트 반대로 용량 의존적 반응을 확인하기위한 노력으로 처리 된 부분 책꽂이 다중 제어부를 타고. (- 4 시간 ~ 2) 18도 차가운 허혈 시간의 해로운 영향에서, - (40 분 ~ 30) 조직 빠르게 단면을 수행합니다. 단지 1 시간의 순응 기간 다음 섹션의 치료를 수행합니다. </li><li> 1 시간의 순응 기간에 따라, 용량 (치료 관련 증가 추가; <em.&gt; 예, 0 - 치료 기간에 대한 표준 조직 배양 조건에서 섹션과 집으로 약물의 10 μM 농도). 이 연구를 위해 24 및 / 또는 48 시간 평가 기간을 사용합니다. 및 96 시간 평가 기간까지의 기간 동안, 본 연구에서 시험 그러나 제어 (차량 전용) 조직 섹션은 가능한 유지됩니다. </li><li> 치료 후, RT O에서 10 % 포르말린과 장소를 포함하는 튜브에 조직 절편을 배치하여 멸균 조건 및 포르말린으로 고정 섹션이 모두 제거 / N 또는 4 % 파라 포름 알데히드를 함유하는 튜브 (유리 병에서 16 % 파라 포름 알데히드를 희석 2 시간 동안 RT에서 4 %의 최종 농도) 및 장소와 PBS. <ol><li> 큰 조직 섹션을 수정 (예. ~ 6mm X 4mm) 10 % 포르말린의 O에서 200 μm의 두께 / RT에서 N. 작은 부분을 수정 (예를 들면., 1mm X 1mm) 실온에서 2 시간 동안 4 % 파라 포름 알데히드에서 200 μm의 두께. NOTE : 정착액 (F)의 양을 효율적으로 침투ixative 조직의 부피를 20 배한다. 주어진 적절한 고정 사용하는 모든 조직의 크기에 정착 1 ㎖의 보증을위한 매우 작은 조직의 크기 (예를 들어, 6mm 3 조직 = 6 μL 볼륨),이 프로토콜의 결과. </li><li> 고정 후 조직 표본은 병리학 부서 담당자가 포함 된 파라핀있다. 충전 슬라이드 위에 파라핀 블록 표본 섹션 헤 마톡 실린 및 스테인드 에오신 및 평가 면역 조직 화학적 (예를 들면, 세포 사멸) 할 수 있습니다. </li></ol></li></ol>

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이해 상충은 공개되지 않았습니다.

효과적인 치료 전략을 개발하려고 할 때 암 생물 학자들은 상당한 도전에 직면하고 있습니다. 확립 암 세포주에서 약물 개발을 테스트하는 것은 정확하게 생체 반응과 PDX 모델에서 생체 내 실험은 노동 집약적이고 비용이 매우 다를 수있다. 상기를 감안 기본 환자의 생체 기술의 애플리케이션 (15)은 현재 설정된 암 세포주와 환자 유래의 이종 이식 (PDX)의 분자량 분석 옆에 위치되는, 14 종양. 이 문서는 기술이 충실하게 응답에 (IC50)를 알려주는 것을에 새로운 높이로, 오프 - 타겟 효과를 생체 기술의 적용을 받아 저항과 피드백 메커니즘을 분자 분석을 할 수 있습니다. 응답 데이터는 종양 분자 프로필에 종양 몰 대 (즉, 단백질, 종양 바이오 마커의 발현, 돌연변이) 상호 연구 (응답 상관되면ecular 프로필) 환자의 결과를 개선하기위한 노력으로, 특...

효과적인 암 치료제를 개발하는 것이 매우 어려운 것으로 입증되었습니다. 암 세포주와 종양 이식편 -뿐만 아니라 이종 절반 위에 세기 1,2,3 대한 암 연구에서 사용되어왔다. 현재까지, 약물 감수성 및 내성 둘 확립 암 세포주 및 이종 이식 환자 유래의 분자량 분석 (PDX)이 필수적이다. 그러나, 확립 암 세포주에서의 시험 화합물들은 생체 내 효능을 예측할 수없고, 특히 PDX 모델에서, 동물의 생체 내 연구에 대응하는, 매우 많은 비용과 시간이 소요된다. 이 모델 시스템, 종양 진행 및 치료 전략에 응답하여 네이티브 미세의 영향에 알리는 즉 무능력의 한계는 이러한 분석을 보완하기위한 추가 방법을 개발하는 연구 분야를 주도하고있다. 최근의, 높아진 관심은 환자 다치의 생체 분석으로 지급되는암 치료 반응은 암세포의 내재적 분자 조성물 단독이 아니라 오히려 크게 기존 배양 방법에 의해 효과적으로 요약 할 수없는 종양 세포 미세 환경 (6, 7) 기능에 의해 영향을 받는다는 인해 큰 이해 또는 이식편 4, 5 / 또는 PDX. 상기 컨텍스트의 생체 외 분석 (예. 인접한 주위 종양 세포 미세 환경의 영향)보다는 셀룰러 균주 8, 9의 생체 외 분석을보다 실용적 일차 종양 / 전이 섹션의 평가를 의미한다. 우리는 모두 환자의 기본 종양 (정밀 분리 된 신선한 조직 섹션 즉.) 및 관련 전이 (즉, 림프절)을 충실하게 응답에 알립니다 (IC50), 오프 대상 효과 생체 기술에 여기에보고하고 분자 수 있습니다 저항과 피드백 메커니즘의 분석. 치료 적 레이저 각막 절제의 또한, 상관 관계 분석바이오 마커 및 유전자 발현 프로파일 대 utic 감도 / 저항 (즉. 높은 약물 반응이 특히 생물학적 프로필을 가진 환자와 일치) 관심 실험 약물에 반응 할 가능성 환자를 확인하기 위해 수행 될 수있다. 다중 매개 변수 방식으로 생체 기술과 평가의 적용은 환자의 선택과 임상 결과의 전반적인 개선을 향한 움직임이다. 생체 내 치료 반응 분석은 암 치료제의 전임상 및 임상 개발의 표준 도구가 될 수 있고, 치료 개발 전략에 맞춤 의학의 접근 방식으로 단계로 구상된다.

<table><tbody><tr><td>Vibratome Leica VT1000s</td><td>Leica</td><td>14047235613</td><td></td></tr><tr><td>UltraPure 아가로스</td><td>Invitrogen</td><td>16500500</td><td>사용 전에 4%와 6%를 준비하십시오</td></tr><tr><td>. 주입기 블레이드</td><td>Ted Pella</td><td>121-4</td><td></td></tr><tr><td>MEM과 페니실린; + 스트렙토마이신</td><td>미디어 코어 시설 (MSKCC)</td><td></td><td>미디어는 Memorial Sloan Kettering Cancer Center에서 준비됩니다&nbsp;</td></tr><tr><td>메스 번호 10</td><td>Thermo Scientific</td><td>31-200-32</td><td></td></tr><tr><td>일회용 집게</td><td>Cole-Parmer</td><td>84011182</td><td></td></tr><tr><td>Embedding mold</td><td>전자 현미경 과학</td><td>70181</td><td></td></tr><tr><td>FBS (불활성화)</td><td>Gemini</td><td>100106</td><td></td></tr><tr><td>24웰 플레이트</td><td>Corning</td><td>3524</td><td></td></tr><tr><td>포르말린(10%)</td><td>Sigma Diagnostics</td><td>SDHT501128&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>16% 포름알데히드 용액</td><td>Thermo Scientific</td><td>28908</td><td></td></tr><tr><td>임베딩 마이크로제트</td><td>Simport</td><td>M503-2</td><td></td></tr><tr><td>에탄올(70%)</td><td>Fisher Scientific</td><td>A405P-4</td><td></td></tr><tr><td>수조</td><td>Fisher Scientific</td><td>15-462-2SQ</td><td></td></tr><tr><td>마이크로파</td><td>General Electric</td><td>ModelJES2051DNBB</td><td></td></tr><tr><td>접착제(에틸 시아노아크릴레이트)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E1505-5G</td><td></td></tr><tr><td>10mm 접시</td><td>BD 팔콘</td><td>353003</td><td></td></tr><tr><td>15ml 튜브</td><td>BD 팔콘</td><td>352096</td><td></td></tr></tbody></table>

기본 종양 및 / 또는 전임상에 대한 관련 전이 및 치료제의 임상 개발의 전 생체 치료 응답

Ex Vivo Treatment Response of Primary Tumors and/or Associated Metastases for Preclinical and Clinical Development of Therapeutics

확립된 암 세포주의 분자 분석은 지난 수십 년 동안 암 연구의 주류였습니다. 세포 배양은 치료 민감도와 내성에 대한 직접적이고 신속한 분석을 제공합니다. 그러나 최근의 증거에 따르면 치료 반응은 암세포의 고유한 분자 구성에 국한되지 않고 오히려 전통적인 배양 방법으로는 요약할 수 없는 특징인 종양 세포 미세환경에 의해 크게 영향을 받습니다. 종양 이종이식편의 구현조차도 약물 전달/효능에 대한 풍부한 정보를 제공하지만, 인간 종양 내에서 발생하고 종양 반응에 큰 영향을 미치는 종양 세포/미세환경 누화(즉, 용해성 인자)를 포착할 수 없습니다. 이를 위해 우리는 전임상 및 임상 치료제 개발을 위한 치료 반응을 직접 평가할 수 있는 생체 외(fresh tissue sectioning) 기술을 개발했습니다. 이 기술은 치료 반응 전반에 걸쳐 종양 세포/미세환경 컨텍스트 내에서 조직 무결성과 세포 구조를 유지하여 약물 효능을 평가할 수 있는 보다 정확한 수단을 제공합니다.

이 연구를 위해 생체 외 기술은 열 충격 단백질 90 저해제 (Hsp90i)의 치료 감수성 / 내성 상관 분석에 사용 하였다. 이 Hsp90i, 유방암 일차 종양, ER + 침윤성 암종 (IDC), 및 관련된 림프절 전이의 임상 평가에 치료 반응을위한 생체 외 분석 하였다   (그림 1). 여러 200 μm의 시리얼 섹션 Hsp90i의 차량 만 증가 복용량 (0.25, 0.50, 1.0 및 2.5 μM)로 처리 하였다. 그림 1의 데이터는 포르말린에 고정 된 48 시간의 치료 기간에 따라 파라핀 (FFPE)와 헤 마톡 실린 및 에오신 (H &amp; E) 염색 섹션을 나타냅니다. 핵 형태 학적 변화에 의해 볼 때 2.5 μM 처리 조직 절편은 세포 사멸의 40 % 유도 결과 반면 처리 부분 제어 (전용 차량) 가능한 IDC 둥지를 보여줍니다 (즉, pyknotic 핵 / APOPtotic ...

설립 암 세포주 및 이종 이식편은 지난 수십 년간 암 연구의 주류이었다. 그러나, 최근의 증거는 치료 반응이 크게 종양 세포 미세 환경에 의해 영향을 받는다는 의미한다. 따라서, 우리는 약물 개발을 목적으로 일차 종양 시료의 생체 외 분석을 개발 하였다.

The molecular analysis of established cancer cell lines has been the mainstay of cancer research for the past several decades. Cell culture provides both ...

다음 생체 외 약물 반응 기법의 목표는 약물의 전임상 및 임상 개발에 구현하여 반응 또는 IC 50 오프 타겟 효과에 대해 알리고 내성 및 피드백 메커니즘의 분자 분석을 가능하게 하는 것입니다. 이는 먼저 생존 가능한 종양 표본을 신속하게 확보하여 절편을 위해 실험실로 즉시 이송함으로써 달성됩니다. 다음으로, 조직을 아그로스(agros)에 삽입하고, 절편화하고, 다양한 기간 동안 치료적으로 관련된 용량으로 관심 약물로 처리합니다.마지막으로, 비반응성 종양 성장을 남기고 웰에서 절편을 제거하고 조직을 포뮬러 고정 및 파라핀 포매한 후 각 처리된 절편의 H 및 e 슬라이드를 준비합니다. 결과는 세포사멸을 나타내는 핵의 형태학적 변화에 기초한 약물 치료, 종양의 반응 및/또는 전이를 보여줍니다. 약물 반응의 IC 50 결정, off-target 효과의 식별, 비반응성 종양 성장의 내성 및 피드백 메커니즘에 대한 분자 분석을 평가합니다.기존 암 세포주 또는 원발성 환자 종양에서 분리된 세포의 약물 반응 평가와 같은 기존 방법에 비해 이 기술의 주요 장점은 이 방법을 통해 인접한 미세환경의 맥락에서 약물 반응을 평가할 수 있다는 것입니다. 그럴 수 있습니다. 또한 종양 선택성 및 off-target effect와 같은 약물 개발의 핵심 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다.이 기술의 의미는 예를 들어 임상 연구에 등록된 환자로부터 얻은 각막 생검에 적용될 때 임상 환경에서의 약물 개발로 확장됩니다. 이 기술을 사용하면 광범위한 양의 데이터가 필요하기에 충분한 매우 작은 표본 크기를 분석할 수 있습니다. 이 방법의 시각적 시연은 모든 종양 유형이 유사한 것은 아니며 적절한 조정을 하는 것이 이 기술의 성공의 열쇠이기 때문에 배우기 어려울 수 있는 임베딩 및 절편과 관련하여 특히 직면할 수 있는 몇 가지 어려움을 해결하는 데 중요합니다.우선, 수술 팀에게 포뮬러나 고정제가 없는 신선한 상태의 검체를 택배 또는 공압 튜브 시스템을 통해 단단히 밀봉되고 멸균된 누출 방지 플라스틱 검체 백에 담아 병리과로 전달하도록 지시합니다. 멸균 유출 방지 용기 내에 조달된 표본의 채취 시간을 기록하고, 이는 수술 절차 완료 후 30분 미만으로 엄격하게 보관해야 합니다. 병리과 직원에게 층류 후드 아래에서 멸균 기술을 사용하여 약 0.5-1입방센티미터의 원발성 종양 표본을 가급적이면 지표 병변의 주변에서 제거하도록 지시합니다.약 5ml의

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Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

Bryostatin의 1/Ionomycin에 의해 종양 반응 T 세포의 생체내 전 확장 및 일반 감마 체인 크린 시토킨 제제

우리는 안티 - 암 치료에 영상 응답하는 방법을...

유방암의 마우스 모델에서 종양 Microenvironment에 약물 응답의 영상을 라​​이브

여기에서는 전이의 in vivo chicken embryo chorio-allantoic membrane(CAM) 모델과 결합된 종양 세포 대사의 실시간 모니터링을 사용하여 종양 세포를 DNA를 손상시키는 화학 요법에 감작하는 능력에 대해 새로운 항암 표적/제제를 평가하는 데 사용됩니다.

암 약물 과민 반응의 효과를 평가<em&gt; 체외</em&gt; 및<em&gt; 생체</em

우리는 쥐에 형광 기자를 활용, 폐 전이에서 종양 세포 기질 상호 작용의 생체 라이브 영상에 대한 비교적 간단한 방법을 설명합니다. 스피닝 디스크 공 촛점 현미경을 사용하여,이 기술은 최소 4 시간 동안 생균의 시각화를 가능하게하고 다른 염증성 폐 상태를 학습하도록 구성 될 수있다.

예는 폐 전이 및 그들의 미세 환경의 라이브 영상을 생체 내

이 프로토콜은 정형 외과 췌장 종양의 외과 생성 및 갓 단송된 뮤린 췌장 종양의 급속한 소화를 기술합니다. 소화 후, 실행 가능한 면역 세포 집단은 유세포 세포 분석에 의한 세포내 사이토카인 검출을 위한 T 세포의 생체내 자극을 포함하는 추가하류 분석을 위해 사용될 수 있다.

종양 침투 T 세포 독성의 정형 외 췌장 종양 및 Ex 생체 특성의 생성

여기서 우리는 종양의 게놈 메이크업에 기초하여 선택된 표적 치료의 효능을 시험하기 위한 프로토콜을 제시한다. 프로토콜은 구조적인 DNA 재배열의 확인 그리고 검증, 마우스로 환자의 종양의 이식 및 해당 약에 대한 반응을 시험하는 것을 기술합니다.

구조적 DNA 변경 분석 및 환자 유래 제노이식을 사용하여 암에 있는 표적으로 한 치료 시험

기술된 접근법은 실험적인 꼬리 정맥 전이 실험과 생체 내 살아있는 동물 화상 진찰을 결합하여 폐에 있는 전이 수 그리고 크기의 정량화 이외에 유방암 전이 대형 및 성장의 실시간 감시를 허용합니다.

꼬리 정맥 전이 검사의 결합된 사용 및 생체 내 실시간 생체 내 이미징을 결합하여 폐암 전이성 식민지화 및 폐의 부담을 정량화

환자 유래 제노이식(PDX) 모델과 이식 가능한 유전자 조작 마우스 모델은 인체 질환을 충실히 재구성하고 기본 및 번역 형 유방암 연구를 위한 선호 모델입니다. 여기서, 종양 생물학을 연구하고 약물 반응을 평가하기 위해 유방 지방 패드로 유방 종양 단편을 정형전으로 이식하는 방법이 설명된다.

유방암을 위한 전임상 모형으로 유방 종양의 정형소 이식

이 논문은 살아있는 환자 관련 전임상 모델 시스템에서 종양 약물 반응을 평가하기 위한 환자 유래 각종의 생성, 약물 치료 및 분석을 위한 방법을 설명합니다.

환자 유래 종양은 환자의 약물 내성을 예측하기위한 "라이브"전임상 플랫폼으로 이월합니다.

이 원고는 전이성 캐스케이드의 모든 단계에서 개입할 수 있는 orthotopically 주입된 유방 종양의 자발적 폐 전이의 확립 및 종단 성장 모니터링을 위한 방법론을 설명합니다.

생체 내 Orthotopically injected breast tumor cells의 자발적 폐 전이를 측정하기 위한 이미징

학습하세요 종양 미세환경을 보존한 채 약물 반응을 평가하는 ex vivo 조직 절단 기법을 통해 암 치료제 개발 및 맞춤형 의학 연구를 지원하는 방법을 확인하세요.

기본 종양 및 / 또는 전임상에 대한 관련 전이 및 치료제의 임상 개발의 전 생체 치료 응답

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